Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,441

STRUCTURAL METABOLIC CHANGES IN ALCOHOLIC HEPATOPATHI RECEPTION EXTRACTS FROM GRASS CORIANDER SEED

Arakelyan V.V. 1 Vasilenko J.K. 1 Ogurtsov A.J. 1
1 Piatigorsk Medical-Pharmaceutical Institute – branch of the State Budgetari Educational Establishment of Higher Professional Education Volgograd State Medical University of the Ministry of Public Health Services of the Russian Federation
Изучено гепатопротекторное действие водного извлечения из травы кориандра посевного в опытах на крысах с алкогольным гепатозом. В качестве объекта сравнения использовано аналогичное извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами. Проведено сравнительное изучение влияния курсового введения извлечений в дозе 150 мг/кг на микроморфологическую картину печени и биохимические показатели функционального состояния печени у крыс с гепатозом. Проведенные исследования позволили прийти к заключению, что все изученные извлечения в той или иной степени снижают глубину поражения печени относительно контроля. Однако по выраженности гепатозащитного действия водное извлечение из травы кориандра занимает лидирующее положение. Выявленные лечебные свойства извлечения из травы кориандра связаны с наличием в них биологически активных веществ, присущих этому растению и, по-видимому, определяются антиоксидантной направленностью их действия.
Studied hepatoprotective effect of aqueous extract of the herb coriander seed in rats with alcoholic hepatosis. As the object of comparison used a similar extraction of corn columns with stigmas. A comparative study of the influence of course administration extracts at 150 mg/kg on micromorphological picture and biochemical indicators of liver function state of the liver in rats with hepatosis. Studies have allowed to come to the conclusion that in all the studied extract some extent reduce the depth of liver relative to the control. However, the severity of hepatoprotective action water extraction from herbs coriander occupies a leading position. Identified medicinal properties of the herb coriander extract associated with the presence of biologically active substances inherent in this plant, and, apparently, determined the direction of their antioxidant action.
coriander seed
corn columns with stigmas
water extraction
alcoholic hepatosis
1. Bandyukova V.A. Fenoloksiloty plants, their esters and glycosides // Nature Chemistry. soedineniy. 1983. no. 3. рр. 263-273.
2. Gatsura V.V. Methods of primary pharmacological studies of biologically active veschestv. M.: Medical, 1974. pp. 125–126.
3. Dorkina E.G. Hepatoprotective properties of flavonoids (pharmacodynamics and perspectives of clinical trials): Author. dis. Doctor. biol. Sciences. Volgograd. 2010. 49 p.
4. Ilina I.G., Rudakov I.P., Samilina I.A. Antioxidants: pharmaceutical and biochemical aspects of the application // Pharmacy. 2013. no. 8. pp. 3–6.
5. Oganesyan E.T., Nersessian Z.M., Parkhomenko A. The chemical composition of grass coriander seed // Chem- pharmacy. Well. 2007.T. 41, no. 3. pp. 30–34.
6. Comparative study of the effect of flavonoids on the pro-antioxidant balance in acute CCl4-gepatoze / E.G. Dorkina, Sergeeva E.O. Parfentieva E.P. etc. // Questions biol. honey. and pharmacy. Chemistry. 2013. no. 3. pp. 61–66.
7. The pharmacological activity of the polyphenol complex rhubarb Horticultural / J.K. Vasilenko., N.S. Kaysheva., V.A. Kompantsev. etc. // Farmatsiya. 1992. no. 4. pp. 45–47.

Алкогольная интоксикация проявляется генерированным поражением органов и систем, прежде всего – печени как барьерного органа, выполняющего антитоксическую функцию. В патогенезе алкогольной гепатопатии существенную роль играет образующийся в процессе метаболизма этанола ацетальдегид. Гепатотоксическое действие ацетальдегида проявляется усилением процессов перекисного окисления липидов с последующим нарушением функций фосфолипидов клеточных мембран. В этой связи можно полагать, что средства, обладающие антиоксидантной активностью, способны задерживать развитие алкогольной болезни печени. Используемые при патологии печени растительные средства обладают широким спектром биологического действия, включая антиоксидантный, мембраностабилизирующий, антитоксический, репаративный эффекты, обусловленные, как полагают [1, 3, 5, 7], преимущественно фенольными соединениями. В этой связи перспективным источником лекарственного средства могут служить извлечения из травы кориандра посевного, в котором содержатся флавоноиды, кумарины, органические кислоты, фенолкарбоновые кислоты, микроэлементы и ряд других биологически активных веществ [6].

Цель исследования – экспериментально обосновать целесообразность применения при алкогольной гепатопатии извлечения из травы кориандра посевного, содержащего флавоноиды, кумарины, фенолокислоты, витамины и ряд других биологически активных веществ.

Материалы и методы исследования

Водное извлечение из травы кориандра посевного получали согласно фармакопее ХI. В состав комплекса веществ входят флавоноидные соединения (апигенин, лютеолин, кверцетин и др.), кумарины, фенолкарбоновые кислоты, органические кислоты, витамины и другие биологически активные вещества [6]. В качестве препарата сравнения использовали водный экстракт из кукурузных стобиков с рыльцами.

Суммарный комплекс веществ водного извлечения вводили животным в течение двух недель перорально в виде водных растворов в объеме 2 мл в дозе 150 мг/кг, выбранной на основе фармакологического скрининга гепатотоксичности извлечений по В.В. Гацура [2]. Гепатоз у животных вызывали в конце первой недели семидневным пероральным введением 33 % раствора этанола из расчета 0,75 мл на 100 г массы тела. Животных декапитировали и забирали для исследования кровь и ткань печени. Часть печени помещали в 5 % раствор формалина. Срезы ткани печени готовили общепринятым методом заливки в парафиновые блоки, окраску проводили гематоксилин-эозином. Изучение гистологических срезов проводили с использованием светового микроскопа ЛОМО при увеличениях ×160 в проходящем свете. Снимки срезов производили на компьютеризированном микроскопе. Для морфометрических измерений использовали компьютерную программу для анализа изображений ImageJ 1.4. В сыворотке крови определяли активность аланинаминотрансферазы (АлТ), аспартатаминотрансферазы (АсТ), содержание альбуминов, общего холестерина, триглицеридов с помощью автоматического биохимического анализатора ВS-120 (Minzey, Китай) со стандартным набором реактивов (Diasis, Германия). Кроме того, в крови определяли активность каталазы, щелочной фосфатазы (ЩФ), содержание ТБК-активных продуктов общепринятыми методами.

В ткани печени определяли содержание гликогена по реакции с фенолом после щелочного гидролиза гликогена, содержащегося в определенной навеске печени. Полученные результаты обрабатывались методом вариационной статистики по t-критерию Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

Исследования показали, что у интактных животных микроморфологическая картина печени в целом соответствовала нормальным вазоцитарным взаимоотношениям в строении печеночной дольки (рис. 1), равно как и уровень биохимических показателей соответствовал нормальным величинам, что видно из таблицы.

pic_71.tif

Рис. 1. Микроморфологическая картина печеночной дольки у интактных животных (увеличение 160)

Иная картина наблюдалась у животных контрольной группы с гепатозом. На гистологических срезах печени наблюдалось перивенулярное центролобулярное поражение гепатоцитов. В отдельных гепатоцитах имелась конденсация нуклеофильного вещества в сочетании с кариорексисом и плазмолизом. Некроз гепатоцитов имелся преимущественно в центре печеночных долек, в цитоплазме клеток появились вакуоли различной величины, клетки были увеличены в размерах, цитоплазма их была просветлена. Вместе с тем массового некроза клеток печени не наблюдалось. Определялось нарушение балочной структуры печеночных долек, резкая гиперемия центральных вен и кровеносных сосудов триад. Пространства Диссе были резко расширены (рис. 2). Признаков жирового стеатоза в гепатоцитах не отмечалось.

pic_72.tif

Рис. 2. Микроморфологическая картина печеночной дольки у животных с гепатозом (увеличение 160)

Гисто морфологические нарушения в печени сочетались с существенными нарушениями биохимических показателей (таблица): в крови животных отмечалось достоверное повышение содержания триглицеридов, общего холестерина, активности АлТ, АсТ, щелочной фосфатазы, ТБК-активных продуктов, снижение содержания альбуминов, каталазы крови, а также гликогена в ткани печени.

В группе животных, получавших извлечение из кориандра, в отличие от контрольных, нарушение балочной структуры гепатоцитов было выражено умеренно (рис. 3). Балочная структура долек в целом была сохранена. Центральные вены и кровеносные сосуды триад были без признаков гиперемии, свободны от содержимого. Определялась умеренная лимфоцитарная инфильтрация и активация пролиферативных процессов в зонах центральных вен (рис. 3). Гиперемии сосудов и диапедезных периваскулярных кровоизлияний не наблюдалось. Отмечались единичные клетки в состоянии гидропической дистрофии.

pic_73.tif

Рис. 3. Микроморфологическая картина печеночной дольки у животных с гепатозом, получавших извлечение из травы кориандра посевного (увеличение 160)

Влияние извлечения из травы кориандра посевного на биохимические показатели функционального состояния печени крыс при курсовой алкоголизации

№ п/п

Серии опытов

Количество животных

Гликоген, г/кг

АлТ крови, Е/л

АсТ крови, Е/л

ЩФ крови, Е/л

Альбумины крови, г/л

ТБК-активные продукты крови, мкмоль/л

Общий холесте-рин, ммоль/л

Тригли-цериды крови, ммоль/л

Каталаза в крови, к.ч.

1

Интактные

n = 9

29,4 ± 2,42

48,5 ± 15,00

173,1 ± 8,20

226,3 ± 22,00

33,6 ± 1,00

2,85 ± 0,540

1,90 ± 0,200

0,80 ± 0,080

0,5 ± 0,05

2

Контрольные (гепатоз)

n = 9

26,2 ± 5,09

Р1 < 0,05

66,4 ± 3,50

Р1 < 0,05

220,6 ± 12,40

Р1 < 0,001

314,0 ± 22,10

30,9 ± 0,20

Р1 < 0,001

5,44 ± 2,200

Р1 < 0,05

2,10 ± 0,050

Р1 < 0,05

1,01 ± 0,067

Р1 < 0,05

0,8 ± 0,05

Р1 < 0,05

3

Получавшие извлечение кориандра

n = 9

34,5 ± 9,64

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Р3 < 0,05

58,9 ± 2,30

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Р3 < 0,05

218,2 ± 11,20

Р1 < 0,001

Р2 < 0,05

Р3 < 0,05

264,6 ± 28,60

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Р3 < 0,05

31,3 ± 0,60

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Р3 < 0,001

3,46 ± 1,150

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Р3 < 0,05

1,88 ± 0,040

Р1 < 0,05

Р2 < 0,001

Р3 < 0,05

0,73 ± 0,040

Р1 < 0,05

Р2 < 0,01

Р3 < 0,05

1,0 ± 0,10

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Р3 < 0,05

4

Получавшие извлечение кукурузных столбиков с рыльцами

n = 9

31,5 ± 4,54

Р1 < 0,001

Р2 < 0,05

65,2 ± 1,95

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

227,2 ± 6,50

Р1 > 0,05

Р2 < 0,05

270,4 ± 16,20

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

33,7 ± 0,50

Р1 < 0,05

Р2 > 0,05

3,55 ± 1,27

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

1,85 ± 0,080

Р1 < 0,05

Р2 > 0,05

0,7 ± 0,07

Р1 < 0,05

Р2 < 0,01

0,9 ± 0,05

Р1 < 0,05

Р2 < 0,05

Примечания:

n – количество опытов;

Р1 – вероятность различия к группе интактных животных;

Р2 – вероятность различия к контрольной группе животных;

Р3 – вероятность различия по отношению к группе животных, получавших водное извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами.

В группе животных, получавших в качестве лечения извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами, наблюдались аналогичные контрольной группе микроморфологические изменения в печени, однако они были выражены в меньшей степени, чем в контрольной группе, и близки к изменениям в группе животных, получавших извлечение из травы кориандра (рис. 4).

Изменения биохимических показателей в крови и печени в общем соответствовали динамике микроморфологической картины печени. Уровень гликогена в ткани печени, содержание в крови триглицеридов, холестерина, ТБК-активных продуктов, альбуминов, активность АлТ, АсТ, ЩФ у животных, получавших извлечение из кориандра, проявили тенденцию к нормализации. У животных, получавших извлечение из кориандра посевного, содержание триглицеридов по сравнению с контролем понизилось на 54,1 % (p < 0,01), общего холестерина на 21,5 % (p < 0,001), ТБК-активных продуктов на 62,6 % (p < 0,05), снизилась активность АлТ на 48,3 % (p < 0,05), АсТ на 28,5 % (p < 0,05), ЩФ – на 54,5 % (p < 0,05), тогда как активность каталазы повысилась на 25,3 % (p < 0,05), содержание альбуминов ‒ на 8,9 % (p < 0,05), а гликогена в печени на 42,6 % (p < 0,05). Изменения показателей у животных, получавших водное извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами, приближались к таковым у животных, получавших извлечения из кориандра. Однако изменения в содержании гликогена в печени и активность АлТ, АсТ и каталазы характеризовались меньшей степенью выраженности, чем в опытах с извлечением из кориандра. Существенное повышение активности каталазы и снижение ТБК-активных продуктов под влиянием водного извлечения из кориандра свидетельствует об увеличении эффективности эндогенной системы антиоксидантной защиты, что обусловлено, по-видимому, действием фенольных соединений, содержащихся в извлечении [4, 6, 7].

pic_74.tif

Рис. 4. Микроморфологическая картина печеночной дольки у животных с гепатозом, получавших извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами (увеличение 160)

Заключение

Динамика микроморфологической картины печени и биохимических показателей свидетельствует, что суммарный комплекс веществ водного извлечения из травы кориандра посевного снижает глубину поражения печени при ее токсическом поражении. Этот эффект по некоторым показателям превышает аналогичное влияние извлечений из кукурузных столбиков с рыльцами. Учитывая состав веществ комплекса водного извлечения из кориандра посевного, можно говорить о существенной роли антиоксидантного действия в его лечебном эффекте.

Рецензенты:

Попова О.И., д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии Пятигорского медико-фармацевтического института – филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Пятигорск;

Погорелый В.Е., д.б.н., профессор кафедры фармакологии Пятигорского медико-фармацевтического института – филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Пятигорск.

Работа поступила в редакцию 01.04.2014.