Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,118

ОСОБЕННОСТИ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГОРТАНИ В НОРМЕ И ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ

Азнабаева Л.Ф. 1 Арефьева Н.А. 1 Даянов А.Н. 1
1 ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет»
Представлены результаты изучения особенностей местного иммунитета слизистой оболочки гортани у практически здоровых лиц по сравнению с другими участками верхних дыхательных путей (высокая продукция IgE, сниженная - sIgA). У больных хроническим ларингитом иммунное реагирование слизистой оболочки гортани характеризуется активацией на местном уровне гуморальных факторов гиперпродукцией реагиновых антител (IgE), а также рекрутацией антител из кровеносного русла (IgG, IgM).
местный иммунитет слизистой оболочки гортани
хронический неспецифический ларингит
1. Арефьева Н.А., Медведев Ю.А. Иммунология в ото-риноларингологии: Методические рекомендации. - Уфа, 1997. - 27с.
2. Иммунологические исследования в ринологии: учебное пособие / Н.А. Арефьева, Ф.А. Кильсенбаева, Л.Ф. Аз- набаева, Ф.А. Хафизова, П.Н. Машко. - Уфа: Изд-во «Здра¬воохранение Башкортостана», 2002. - 88 с.
3. Клиническая патология гортани: руководство-атлас / Н.А. Дайхес, В.П. Быкова, А.Б. Пономарев, Х.Ш. Давудов. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2009. - 160 с.
4. Костюкова С.Б., Рязанцев С.В. Иммуноглобулины ларингеальных секретов // Новости оториноларингологии и логопатологии. - 1995. - №3(4). - С. 155.
5. Матвеева Л.А. Местный иммунитет при болезнях лёгких у детей. - Томск, 1986. - 189 с.
6. Рязанцев С.В. Роль слизистой оболочки в защите ЛОР-органов от потенциально патогенных для организма антигенных факторов / С.В. Рязанцев, Н.М. Хмельницкая, Е.В. Тырнова // Вестник оториноларингологии. - 2000. - №3. - С. 60-64.
7. Тотолян А.А. Современные подходы к диагностике иммунопатологических состояний // Медицинская иммуно¬логия. - 1999. - Т.1, №1-2. - С. 75-108.
Слизистая оболочка гортани обеспечивает защиту от проникновения в организм болезнетворных микроорганизмов за счёт взаимодействия факторов иммунной защиты с клетками эпителиального слоя.

Местный иммунитет слизистой оболочки гортани характеризуется несколькими уровнями. Первый уровень - над- эпителиальный слой - иммунная защита формируется прежде всего антителами [6] и фагоцитами, что обеспечивает противобактериальный эффект. Второй уровень - клетки многослойного плоского эпителия и многорядного цилиндрического реснитчатого эпителия [1, 2, 3], которые выполняют механическую защиту, обеспечивая мукоцилиарный клиренс.

Клетки плоского эпителия являются участниками иммунного ответа. Здесь происходит продукция секреторного компонента и присоединение его к иммуноглобулинам классов А [3, 5]. В подэпителиальном слое синтезируются антитела. Изучение факторов иммунной защиты слизистой гортани представлено в ограниченных публикациях [4]. В этой связи представляется важным проведение исследований состояния местного иммунитета слизистой оболочки гортани в норме и при хронических воспалительных процессах.

Цель исследования - определение особенностей формирования иммунного ответа на слизистой оболочке гортани в норме и при хроническом воспалении.

Задачи исследования

  1. Оценить показатели местного иммунитета на различных участках слизистой оболочки верхних дыхательных путей (нос, глотка и гортань) у практически здоровых лиц на основе изучения иммуноцитограмм (клеточное представительство, состояние деструкции) и уровня антител (IgG, IgA, IgE, IgM, sIgA) в смывах со слизистой оболочки гортани.
  2. Провести сравнительное изучение показателей местного иммунитета слизистой оболочки гортани при хроническом воспалении в зависимости от формы заболевания (катаральная, гиперпластическая, атрофи- ческая формы хронического ларингита).

Материалы и методы исследования

Под наблюдением находились 54 практически здоровых лица в возрасте 47,2 ± 0,81 лет, в том числе мужчин - 32, женщин - 22, которые не имели хронических воспалительных процессов, и в течение 3 месяцев не болели острыми воспалительными заболеваниями. Из них катаральная форма хронического ларингита была у 27 человек (24,54 %), гиперпластическая форма - у 58 человек (52,72 %о), атрофическая - у 25 человек (22,72 %о). Средний возраст больных составил при хроническом катаральном ларингите 32,03 ± 1,14 года, хроническом гиперпластическом ларингите - 45,98 ± 0,44 и при хроническом атрофи- ческом ларингите - 57,8 ± 0,91 лет. Среди больных мужчин было 68 (61,8 %), женщин - 42 (38,2 %о). Всем больным (110 человек) проводилось клинико-инструментальное обследование носа, глотки, гортани и уха. Больные с гнойно-воспалительными заболеваниями
носа и уха, а также с выявленной патологией других органов и систем в группу исследуемых не включались.

Материалом для исследования служила кровь, а также секрет с поверхности голосовых складок, мазки - перепечатки с поверхности слизистой гортани в области голосовых складок; у практически здоровых лиц дополнительно исследовали смешанную слюну и носовые смывы.

Оценку состояния клеточных факторов местного иммунитета слизистых оболочек проводили по данным иммуноцитограмм. Гуморальные факторы исследовали путём количественного определения в биологических жидкостях (ларингеальный смыв, слюна, носовые смывы, кровь) иммуноглобулинов (sIgA, IgG, IgA, IgM и IgE) и альбумина методом иммуноферментного анализа (тест-системы «ИФА- БЕСТ-СТРИП», ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирская область, п. Кольцово).

Для оценки происхождения антител в смывах производили расчёт относительных коэффициентов секреции (ОКС) иммуноглобулинов (Тотолян А.А., 1999) [7].

Иммуноцитологические исследования включали в себя изучение количественного и функционального состояния присутствующих в мазках клеток. Изучение деструктивных процессов в клетках осуществляли по методу Л.А. Матвеевой (1986)[5]. Функциональная активность нейтрофилов изучалась путём исследования фагоцитарной способности нейтрофилов. Вычислялся процент нейтрофилов, фагоцитирующих аутофлору - показатель фагоцитоза. Среди фагоцитирующих нейтрофилов учитывали процент разрушенных (деструктированных) фагоцитов, в протоплазме которых сохранились целые микроорганизмы - показатель незавершённого фагоцитоза [1].

Результаты исследования и их обсуждение

Анализ клинических особенностей у больных хроническим ларингитом показал, что в большинстве случаев (52,7 %) у них выявлялся гиперпластический вариант заболевания. Катаральная и атрофическая формы заболевания отмечались в небольшом количестве (по 25 %).

Результаты исследования иммуноцитограмм с поверхности слизистых оболочек носа, глотки и гортани у практически здоровых лиц представлены в табл. 1.

   Табл.1. Клеточный состав иммуноцитограмм с поверхности слизистых оболочек у практически здоровых лиц
 

 

Показатели

Место забора

Р

Гортань (1)

Глотка (2)

Нос (3)

Цитоз, кол-во клеток

211,26 ± 40,11

153,54 ± 41,65

83,15 ± 14,04

p 1,3 < 0,01

Плоский эпителий, %

74,7 ± 4,25

63,67 ± 4,84

3,43 ± 0,63

p1,3 < 0,001 p2,3 < 0,001

Нейтрофилы, %

13,76 ± 3,38

7,33 ± 3,68

48,55 ± 4,61

p1,3 < 0,001 p2,3 < 0,001

Фагоцитоз, %

20,87 ± 5,51

43,45 ± 5,27

27,00 ± 4,51

p1,2 < 0,01

p2;3 < 0,01

Незавершенный фагоцитоз, %

62,12 ± 3,14

54,45 ± 7,89

33,50 ± 5,45

p1,3 < 0,001 p;2,3 < 0,05

Как видно из табл. 1, цитограмма слизистой оболочки гортани у практически здоровых лиц характеризовалась повышенным цитозом за счет слущивания клеток плоского эпителия (доля клеток составляла около 75 %). Сегментоядерные нейтрофилы были представлены в незначительном количестве (14 %). Способность к фагоцитозу была сниженной по сравнению с клетками, находящимися на слизистой носа и глотки.

При изучении состояния фагоцитарного звена иммунной системы слизистой оболочки гортани было установлено, что при хроническом воспалении отмечается незначительное снижение количества нейтрофи- лов 0 степени деструкции. При катаральной форме доля неповреждённых нейтрофилов составила 14,54 ± 2,40 % (p < 0,05), при гиперпластической форме - 9,25 ± 3,31 % (p < 0,01) по сравнению с группой практически здоровых лиц 22,16 ± 4,12 %, что может быть расценено как нарушение выхода нейтрофилов на слизистую оболочку гортани из кровеносного русла. В то же время отмечалось увеличение показателя способности нейтрофилов к фагоцитозу до 34,8 ± 6,85 % (p < 0,05) при катаральной и до 38,0 ± 8,29 % (p < 0,05) при гиперпластической форме хронического ларингита, по сравнению с 20,87 ± 5,51 % в группе контроля. Обращает на себя внимание, что при атрофической форме заболевания показатели функциональной активности нейтрофилов практически не изменялись.

Следовательно, у больных хроническим ларингитом отмечались выраженные деструктивные изменения клеток плоского эпителия слизистой оболочки гортани и снижение количества нейтрофилов на поверхности слизистой, более выражены при гиперпластическом и атрофическом вариантах течения заболевания. Высокие показатели фагоцитарной активности нейтрофилов свидетельствуют о напряжённости иммунной системы слизистой оболочки гортани за счет факторов врожденного иммунитета.

Показатели гуморального иммунитета слизистой оболочки гортани при сопоставлении с данными на других участках слизистой оболочки верхних дыхательных путей - глотки и носа выявили ряд особенностей (рис. 1).

Рис. 1. Спектр антител на слизистой оболочке гортани, глотки и носа (%)

Как видно из рис. 1, иммуноглобулиновый профиль на слизистых носа и глотки был практически идентичен. Иммуноглобулины были представлены преимущественно антителами с секреторным компонентом (sIgA) на слизистой оболочке носа в 77 % и глотке - в 81 %. В то же время в этих областях иммуноглобулины без секреторного компонента (IgA) не превышали 12 %. Иммуноглобулины класса G имелись в незначительном количестве и составляли соответственно 13 и 6 %. Тогда как в гортани доля секреторного иммуноглобулина А (sIgA) была значительно ниже, чем на слизистой носа и глотки - 42 %. Иммуноглобулины без секреторных компонентов (IgA и IgG) были представлены в большем количестве (27 %).

При сравнительной оценке показателей относительных коэффициентов секреции иммуноглобулинов в смывах с различных участков слизистой оболочки верхних дыхательных путей было установлено значительное увеличение продукции IgE и снижение секреции sIgA на слизистой гортани (рис. 2).

Рис. 2. Показатели секреции (ОКС) иммуноглобулинов у практически здоровых лиц на различных участках слизистой оболочки верхних дыхательных путей (гортань, ротовая и носовая полости). ОКС более 1,0 рассматривается как продукция на местном уровне, менее 1,0 - какрекрутация из кровеносного русла


Как видно из рис. 2, ОКС IgE на слизистой оболочке гортани составил 16,64 ± 7,63 по сравнению с показателем со слизистой оболочки глотки 0,19 ± 0,08 (р < 0,05 при t = 2,16) и со слизистой оболочки носа 0,14 ± 0,07 (р < 0,05 при t = 2,16). ОКС sIgA составил 10,65 ± 3,36, по сравнению с показателями на слизистой оболочке глотки 51,44 ± 5,67 (р < 0,001 при t = 6,2) и полости носа 35,71 ± 10,01 (р < 0,05 при t = 2,37).

При исследовании гуморальных факторов местного иммунитета слизистой полости гортани у больных хроническим ларингитом была выявлена выраженная активация гуморальных механизмов защиты (табл. 2).

Иммунное реагирование на слизистой оболочке гортани при хроническом воспалении сопровождалось значимым повышением уровня реагиновых антител (IgE) в десятки раз и в 3-5 раз - иммуноглобулинов без секреторного компонента (рекрутируемых из кровеносного русла) - классов G, A и M и незначительным увеличением секреторных антител (sIgA). При атрофической форме заболевания, несмотря на отсутствие признаков выраженной антительной активации, спектр иммуноглобунов характеризовался увеличенным содержанием IgE (в 5 раз) и IgG (в 2 раза).

Таким образом, местный иммунитет слизистой оболочки гортани у практически здоровых людей формируется прежде всего антителами (гуморальный иммунитет) с вовлечением в элиминационный механизм клеток фагоцитарного звена - нейтрофилов (клеточное звено иммунной системы) и клеток плоского эпителия. Выявлены особенности иммунной защиты слизистой оболочки гортани по сравнению с другими участками верхних дыхательных путей. В частности в гортани значимость клеток фагоцитарного звена (нейтрофилов) невысокая, иммунная защита определяется высоким уровнем продукции IgE и привлечением антител из кровеносного русла (IgG).


Таблица 2

Спектр антител на слизистой оболочке гортани у больных с хроническим ларингитом

Показатели

Исследуемые группы

Практически здоровые лица (n = 30)

Формы хронического ларингита

Катаральная (n = 27)

Гиперпластическая (n = 58)

Атрофическая (n = 25)

sIgA,мкг/мл IgA, мкг/мл IgG, мкг/мл IgM, мкг/мл IgE, нг/мл

15,95 ± 3,08 10,09 ± 1,47 10,45 ± 3,29 0,91 ± 0,15 2,43 ± 1,11

17,81 ± 2,98 37,59 ± 3,25*** 62,54 ± 5,58*** 4,11 ± 1,07*** 29,09 ± 9,14***

27,06 ± 4,05* 33,16 ± 2,78*** 56,6 ± 5,37*** 2,19 ± 0,33** 18,04 ± 3,56***

36,27 ± 10,1 18,62 ± 4,52 38,62 ± 10,5* 2,07 ± 0,87 13,36 ± 3,62**

Примечание - различие с данными практически здоровых лиц статистически значимо:

*р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001.


У больных хроническим ларингитом иммунное реагирование слизистой оболочки гортани также характеризуется активацией на местном уровне гуморальных факторов по реагиновому типу (IgE), вовлечением в воспалительный процесс сывороточных антител (из кровеносного русла), нарушением процессов рекрутации нейтрофилов из кровеносного русла и усилением деструктивных процессов, затрагивающих эпителиальные клетки, особенно при гиперпластическом и атрофическом варианте хронического ларингита.

Вывод

Иммунное реагирование на слизистой оболочке гортани, в отличие от других участков верхних дыхательных путей (ротовая полость и нос), формируется путем преимущественной продукции на местном уровне реагиновых антител (IgE) и вовлечения в воспалительный процесс иммуноглобулинов из кровеносного русла, что необходимо учитывать при проведении лечебных мероприятий.

Рецензенты:

  • Хайруллина Р.М., д.м.н., зав. отделением клинической иммунологии ГУЗ «Республиканская детская клиническая больница», г. Чебоксары;
  • Имельбаева Э.А., д.б.н., профессор кафедры клинической лабораторной диагностики ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа.

Работа поступила в редакцию 24.06.2011.


Библиографическая ссылка

Азнабаева Л.Ф., Арефьева Н.А., Даянов А.Н. ОСОБЕННОСТИ МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ГОРТАНИ В НОРМЕ И ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ // Фундаментальные исследования. – 2011. – № 9-3. – С. 373-376;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28513 (дата обращения: 20.10.2018).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252