Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,674

ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ ЗДОРОВОГО ЧЕЛОВЕКА В УСЛОВИЯХ ЭМОЦИОНАЛЬНОГО НАПРЯЖЕНИЯ

Сажина Н.В. 1 Грязных А.В. 1
1 ГОУ ВПО «Курганский государственный университет», Курган
В работе рассматривается влияние эмоционального напряжения на секреторную деятельность слюнных желез, желудка, поджелудочной железы и на показатели лимфоцитарно-клеточного, фагоцитарного и гуморального звеньев иммунной системы у здорового человека. Установлено, что эмоциональное напряжение вызывает сочетанные изменения в секреторной деятельности пищеварительных желез и показателей иммунологического профиля. При эмоциональном напряжении отмечается высокая устойчивость механизмов выделения желудочного сока, показателей лимфоцитарно-клеточного звена (CD 8+ и ауторозеток, IgM, сывороточной концентрации γ-ИФН и sIgA в смешанной слюне). В отличие от этого выявлено угнетение панкреатической секреции, уровня почти всех показателей фагоцитарного звена иммунной системы (за исключением % фагоцитирующих нейтрофилов), показателей IgA и комплемента по 50 % гемолизу. Наиболее устойчивыми к стрессовому фактору оказались показатели лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы, показатели лейкоцитарной формулы и основных цитокинов (ИЛ-4 и γ-ИФН).
эмоциональное напряжение
желудочная и панкреатическая секреция
иммунная система
1. Кузнецов А.П. Пищеварительная система человека при действии экстремальных факторов // Вестник Международной академии наук экологии и безопасности жизнедеятельности. - 2009, Т. 14, №2 - С. 81-87.
2. Смелышева, Л.Н. Секреторная функция желудка и поджелудочной железы при действии эмоционального стресса: дис. ... д-ра мед. наук. - Тюмень, 2007. - 300 с.
3. Овсянников В.И. Нейромедиаторы и гормоны в желудочно-кишечном тракте (интегративные аспекты). - СПб., 2003. - 136 с.
4. Хаснулина А.В. Влияние психоэмоционального стресса на адаптационно-восстановительный потенциал человека в условиях вахтового труда на Севере // Экология человека. - 2010. - №12. - С. 18-22.
5. Сапин М.Р. Иммунная система, стресс и иммунодефицит. - М.: АПП «Джангар», 2000. - 184 с.
6. Хаитов, Р.М., Лесков В.П. Иммунитет и стресс // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. - 2001. - Т. 86, №3. - С. 254-267.
7. Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. - 2000. - Т. 87, №8. - С. 1060-1071.
8. Волчек И.А. Клинико-иммунологические характеристики ближайших и отдаленных последствий влияния на организм человека экстремальных факторов внешней среды: дис. ... д-ра мед. наук. - М., 1999. - 380 с.
9. Егорова Г.А. Особенности неспецифических адаптационных реакций и иммунного статуса у студентов в процессе адаптации к условиям обучениия в ВУЗе: дис. ... канд. биол. наук. - М., 2000. - 154 с.
10. Shaking upimmunity: psychological and disaster / G.F. Solomon, S.C. Segerstrom, D. Grohr et.al. // Psychosom. Med. - 1997. - Vol. 59, №2. - P. 114-127.
11. Левандо В.А., Суздальский Р.С., Кассиль Г.Н. Стрессорные иммунодефициты у человека // Успехи физиол. наук. - 1990. - №3. - С. 79-97.
12. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. - СПб.: Фолиант, 2008. - 212 с.
13. Copind life attitudes and group support after breast cancer treatment / M.A. Richardson, I. Post-White, А. Crimm et al. // Aftern. Ther. Health. Med. - 1997. - Vol. 3, №2. - P. 114-127.
14. Демьянов А.В., Котов А.Ю., Симбирцев А.С. Диагностическая ценность исследования уровня цитокинов в клинической практике // Каталог 2003-2004. иммуноферментные тест-системы для количественного определения цитокинов человека и компонентов комплемента. - СПб., 2003. - С. 4-5.
15. Сабсай Б.Н. Сравнительная оценка некоторых методов определения протеолитической активности желудочного сока // Бюл. экспериментальной биологии и медици- ны. - 1966. - Т. 52, № 9. - С. 117-120.
16. Туголуков В.Н. Современные методы функциональной диагностики состояния слизистой оболочки желудка и их клиническое значение. - Л.: Медицина, 1965. - 212 с.
17. Гриневич Ю.А. Кинетика образования розеток клетками крови и небных миндалин, больных хроническим тонзиллитом при взаимодействии с сенсибилизированными эритроцитами барана in vitro // ЖМЭИ. - 1974. - №1. - С. 97-101.

Эмоциональное напряжение вызывает существенные изменения секреторной, моторно-эвакуаторной функций желудочно-кишечного тракта [1, 2, 3, 4]. Иммунная система обладает интегральной функцией между составляющими ее звеньями. Это обеспечивает ее высокий уровень адаптивности и резистентности к действию экзо- и эндогенных факторов. Стрессовые ситуации способствуют выявлению несостоятельности иммунного ответа [5]. Пищеварительная система участвует в реализации вегетативной стресс-реакции.

В условиях эмоционального стресса происходят изменения на органном, клеточном и молекулярном уровнях иммунитета [6]. Включение одной из наиболее лабильных систем организма - иммунной системы, в развитие общего адаптационного синдрома, тем не менее, представляется безусловным. Существенные изменения в работе внутренних органов, в том числе и в работе пищеварительных желез, могут быть итогом тех изменений иммунитета, которые возникают при сдвигах гормонального гомеостаза при стрессе.

В литературе имеются работы, указывающие на отклонения различных иммунологических показателей при развитии общего адаптационного синдрома в условиях действия эмоционального напряжения [7, 8]. Считается, что Т-система иммунитета наиболее чувствительна к действию стрессоров. Сообщается о снижении количества Т-лимфоцитов и повышении содержания В-лимфоцитов в периферической крови у студентов перед экзаменами [9]. G.F. Solomon et al. [10] сообщают об увеличении числа CD8 клеток при стрессе. В.А. Левандо и др. [11] сообщают о резком снижении концентрации секреторного иммуноглобулина «А» (sIgA) в слюне 7 студентов во время экзаменационной сессии. γ-ИФН продуцируется эффекторными Т-клетками после индукции адаптивного иммунного ответа и является основным активатором макрофагов. Выявленные изменения эндогенной продукции цитокинов: γ-интерферона (γ-ИФН), интерлейкина 1 (ИЛ-1) и интерлейкина 2 (ИЛ-2) при стрессе носят разнонаправленный характер [12, 13, 14].

Данные о сочетанном изучении механизмов секреции пищеварительных желез и показателей иммунологического профиля в условиях относительного покоя и эмоционального напряжения практически отсутствуют.

Целью настоящей работы явилось исследование влияния эмоционального напряжения на секреторную функцию пищеварительных желез и на некоторые показатели лимфоцитарно-клеточного, фагоцитарного и гуморального звеньев иммунной системы у здорового человека.

Материалы и методы исследования

В исследовании приняли участие 19 здоровых мужчин-добровольцев в возрасте 18-23 лет. Испытуемые прошли углубленное медицинское обследование и были отнесены к основной медицинской группе.

Секреторную функцию пищеварительных желез и иммунный статус организма исследовали в условиях эмоционального покоя за 8-10 дней до действия эмоционального напряжения. В качестве модели эмоционального напряжения использовали сдачу государственного экзамена, после которого сразу проводилось исследование секреторной функции слюнных желез, желудка и поджелудочной железы.

Данное исследование осуществлялось методом фракционного гастродуоденального зондирования через 12-14 часов после приема пищи. Исследование проводилось утром натощак, не менее чем за 1 час до завтрака, чтобы устранить условно-рефлекторное влияние времени приема пищи. Извлечение секрета происходило в межпищеварительный период, сразу после введения зонда в течение 3 минут, далее исследовалась часовая базальная секреция 15-минутными порциями. В качестве стимулятора внешнесекреторной функции поджелудочной железы в двенадцатиперстную кишку через зонд вводили 30 мл 0,5 %-го раствора соляной кислоты, далее исследовалась часовая стимулированная панкреатическая секреция и часовая ингибированная желудочная секреция 15-минутными порциями.

Во всех фракциях секретов определяли объем, pH, концентрацию и дебит-час соляной кислоты, электролитный состав. В желудочном соке определяли концентрацию и валовую продукцию пепсиногена и суммарную протеолитическую активность натурального желудочного сока при исходном pH (методика, модифицированная Б.Н. Сабсай [15]. В поджелудочном соке определяли бикарбонатную щелочность. pH поджелудочного сока определяли методом pH-метрии, содержание натрия и калия методом пламенной фотометрии, хлоридов (по В.Н.  Туголукову) [16] и кальция (комплексонометрическим методом).

Для исследования иммунологического профиля была выбрана общепринятая методика определения иммунного статуса организма, рекомендованная Институтом иммунологии (Москва, 1995). Количественное определение иммуноглобулинов класса A, M, G в сыворотке крови было проведено иммуноферментным методом с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента. Использовали набор реагентов proConJg производства ООО «Протеиновый контур» (по инструкции производителя). Для количественного определения циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) использовался стандартный метод (Ю.А. Гриневич) [17]. Количественное определение интерлейкина-4, γ-интерферона в исследуемых сыворотках крови человека производилось методом ИФА-анализа с использованием тест-системы «Цитокин» (Санкт-Петербург, по инструкции производителя). Регистрацию результатов производили на горизонтальном фотометре ELх800 (США) при длине волны 450 нм. Работа проводилась в лаборатории НИИ клинической иммунологии (Тюменский филиал Сибирского отделения РАМН). Все исследования проводились при наличии письменного согласия обследуемых и с учетом биоэтических норм. Статистический анализ проводили с использованием t-критерия Стьюдента. Взаимосвязь параметров оценивали путем расчета коэффициента корреляции (r) Пирсона при уровне безошибочного прогноза более 95 % (р < 0,05).

Результаты исследования и их обсуждение

В условиях покоя (до сдачи экзамена) после стимуляции панкреатической секреции выявлено повышение объема смешанной слюны (p < 0,001), объема панкреатического сока (p < 0,001), уровня его pH. Параллельно отмечено снижение некоторых показателей лейкоцитарной формулы: достоверное снижение относительного содержания лимфоцитов (p < 0,01), моноцитов (p < 0,02) при сочетанном повышении общего числа лейкоцитов (p < 0,01) (в основном за счет увеличения основных клеточных популяций (сегментоядерных нейтрофилов (p < 0,01)) (табл. 1).

В этих условиях результаты, приведенные в табл. 2, демонстрируют изменения со стороны лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы в ответ на адидификацию двенадцатиперстной кишки соляной кислотой (достоверное снижение общего числа и относительного содержания Т-лимфоцитов (CD 3+, p < 0,05 и p < 0,001 соответственно). При этом отмечено снижение хелперно-индукторной субпопуляции CD 4+ общего числа и абсолютного числа, p < 0,05 и p < 0,01 соответственно).

Уровень натуральных киллеров (NK-клеток) в этих условиях достоверно повышался (p < 0,02) (см. табл. 2). Показатели фагоцитарного звена в условиях ацидификации дуоденума (до сдачи экзамена, фон) оказались более устойчивы (табл. 3), чем характеристики лейкоцитарной формулы (см. табл. 1).

В условиях межпищеварительного периода при интрадуоденальной стимуляции слизистой двенадцатиперстной кишки не выявлено изменений исследуемых показателей гуморального звена иммунной системы (табл. 4) и уровня цитокинов (Il 4, γ-ИФН). При этом обращает на себя внимание достоверное падение концентрации sIgA в смешанной слюне (с 233,69 ± 21,63 до 110,67 ± 18,36, p < 0,001) и соответственно тенденцию к повышению ее в составе панкреатического сока (с 34,42 ± 5,13 до 59,99 ± 12,54, p < 0,1) (табл. 5).

Эмоциональный стресс оказывал разнонаправленные сдвиги на секреторную функцию пищеварительных желез и показатели иммунного статуса. В условиях эмоционального напряжения объем ингибированного желудочного секрета возрастал (p < 0,05), при этом повышались показатели кислотопродукции (концентрация (p < 0,05) и дебит-час (p < 0,05) соляной кислоты). Снижалось валовое выделение пепсиногена (p < 0,01) по отношению к таковым показателям в условиях фона.

Таблица 1. Влияние эмоционального напряжения на показатели лейкоцитарной формулы у здорового человека (M ± m) (n = 19)

Показатели

В условиях тощаковой секреции (межпищеварительный период)

В условиях ингибированной желудочной секреции

фон

стресс

фон

стресс

Лейкоциты, 109

5020 ± 129,8

5500 ± 292,4

6330 ± 181,5^^^

5960 ± 209,3

Эозинофилы, %

3,33 ± 0,59

5,2 ± 1,27

2,0 ± 0,3

3,8 ± 1,2

Палочкоядерные, %

2,143 ± 0,27

1,75 ± 0,22

2,08 ± 0,23

2,4 ± 0,26

Сегментоядерные, %

53,07 ± 1,66

58,8 ± 1,09*

69,08 ± 1,33^^^

68,2 ± 1,83

Лимфоциты, %

34,87 ± 1,63

30,0 ± 1,37*

22,0 ± 1,1^^^

21,8 ± 0,71

Моноциты, %

6,73 ± 0,27

4,6 ± 0,35***

4,92 ± 0,41^^

3,8 ± 0,38

Примечание. Различия достоверны по отношению к показателям в условиях фона: * - p < 0,05; ** - p < 0,01; *** - p < 0,001; различия достоверны по отношению к показателям в условиях тощаковой секреции: ^ - p < 0,05; ^^ - p < 0,02; ^^^ - p < 0,01.

Таблица 2. Влияние эмоционального напряжения на показатели лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы у здорового человека (M ± m) (n = 19)

Показатели

В условиях тощаковой секреции

В условиях ингибированной желудочной секреции

фон

стресс

фон

стресс

CD 3, %

CD 3, абс.ч., кл/мкл

64,27 ± 1,12

1113,1 ± 55,11

64,2 ± 1,25

1102 ± 113,79

59,15 ± 1,66 ^

827,77 ± 48,58 ^^^^

59,0 ± 3,51

853,8 ± 40,71

CD 4, %

CD 4, абс.ч., кл/мкл

38,67 ± 1,22

671,53 ± 40,94

37,6 ± 1,33

658,6 ± 81,23

34,92 ± 1,26 ^

491,92 ± 32,09^^^

38,2 ± 1,8

500,8 ± 38,11

CD 8, %

CD 8, абс.ч.,кл/мкл

21,6 ± 0,98

374 ± 22,56

25,6 ± 1,53 *

419,8 ± 32,74

22,62 ± 1,54

310,54 ± 23,14

24,0 ± 1,01

307,4 ± 14,84

CD 20, %

CD 20, абс.ч., кл/мкл

15,07 ± 0,82

259,73 ± 16,97

13,6 ± 0,6

232,8 ± 25,95

16,92 ± 0,81

240,15 ± 19,25

17,4 ± 0,5

227,4 ± 14,35

NK-клетки, % (CD16)

14,73 ± 0,96

16,4 ± 1,21

19,62 ± 1,51 ^^

17,2 ± 1,74

CD 4 / CD 8

1,83 ± 0,09

1,6 ± 0,14

1,71 ± 0,17

1,62 ± 0,07

Ауторозетки

1,33 ± 0,16

2,25 ± 0,22**

1,54 ± 0,18

1,6 ± 0,13

Примечание. Различия достоверны по отношению к показателям в условиях фона: * - p < 0,05; ** - p < 0,01; различия достоверны по отношению к показателям в условиях тощаковой секреции: ^ - p < 0,05; ^^ - p < 0,02; ^^^ - p < 0,01; ^^^^ - p < 0,001.

Анализ динамики изменения показателей иммунологического профиля продемонстрировал следующие изменения: высокую устойчивость к эмоциональному напряжению проявили показатели лейкоцитарной формулы (см. табл. 1) и показатели лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы (см. табл. 2). При этом в условиях тощаковой секреции после стрессового воздействия происходило достоверное повышение (p < 0,05) относительного содержания супрессорно-цитотоксической субпопуляции (CD 8+) и ауторозеток (p < 0,05) (см. табл. 2). В условиях эмоционального напряжения происходило угнетение большинства показателей фагоцитарного звена иммунной системы (в межпищеварительный период и после ацидификации дуоденума) по отношению к соответствующим фоновым показателям (см. табл. 3).

Таблица 3. Влияние эмоционального напряжения на показатели фагоцитарного звена иммунной системы у здорового человека (M ± m) (n = 19)

Показатели

В условиях тощаковой секреции

В условиях ингибированной желудочной секреции

фон

стресс

фон

стресс

Процент фагоцитированных нейтрофилов, %

91,73 ± 0,58

87,4 ± 1,03**

91,0 ± 0,96

88,6 ± 1,68

Фагоцитарное число

11,24 ± 0,28

9,94 ± 0,15***

11,14 ± 0,26

9,92 ± 0,26**

Индекс опсонизации

12,51 ± 0,5

11,44 ± 0,26

10,88 ± 0,1**

10,6 ± 0,1**

11,83 ± 0,21

11,28 ± 0,2

10,94 ± 0,25 *

10,5 ± 0,26 *

Индекс завершенности фагоцитоза

11,26 ± 0,29

10,74 ± 0,19

9,94 ± 0,15***

9,64 ± 0,09***

11,08 ± 0,27

10,7 ± 0,25

9,92 ± 0,26**

9,42 ± 0,34**

Примечание. Различия достоверны по отношению к показателям в условиях фона: * - p < 0,05; ** - p < 0,01; *** - p < 0,001.

Сравнительный анализ показателей гуморального звена иммунной системы в межпищеварительный период после эмоционального напряжения (табл. 4) выявил достоверное увеличение концентрации сывороточных иммуноглобулинов класса М (IgM) (p < 0,001), снижение концентрации IgA (p < 0,05) и комплемента по 50 %-му гемолизу (p < 0,05) по отношению к таковым показателям в условиях фона. В условиях ацидификации двенадцатиперстной кишки эмоциональное напряжение вызывало повышение концентрации IgM (p < 0,05), снижение комплемента по 50 %-му гемолизу (p < 0,01).

Таблица 4. Влияние эмоционального напряжения на показатели гуморального звена иммунной системы у здорового человека (M ± m) (n = 19)

Показатели

В условиях тощаковой секреции

В условиях ингибированной желудочной секреции

фон

стресс

фон

стресс

IgG, ме/мл

143,21 ± 5,3

148,0 ± 1,74

149,58 ± 4,73

156,0 ± 3,18

IgA, ме/мл

165,14 ± 12,65

129,2 ± 11,45*

189,58 ± 11,19

179,2 ± 12,46

IgM, ме/мл

141,79 ± 7,3

195,0 ± 6,69 ***

144,58 ± 5,98

189,0 ± 13,96 *

ЦИК, у.е.

15,0 ± 1,62

17,0 ± 1,31

16,67 ± 0,89

16,0 ± 1,5

Комплемент по 50 % гемолизу, СН 50 Е/мл

53,64 ± 2,29

48,4 ± 0,6 *

56,0 ± 2,13

47,4 ± 1,88 **

Примечание. Различия достоверны относительно показателей в условиях фона: * - p < 0,05; ** - p < 0,01; *** - p < 0,001.

Более устойчивыми в этих условиях оказались механизмы выработки IgG, IgA и ЦИК (см. табл. 4). Наиболее чувствителен к эмоциональному стрессу оказался механизм выделения sIgA, отмечено повышение его концентрации в составе смешанной слюны и панкреатического сока (см. табл. 5).

Таблица 5. Влияние эмоционального напряжения на показатели секреторного IgA в смешанной слюне и панкреатическом соке у здорового человека (M ± m) (n = 19)

Показатели

Фон

Стресс

Смешанная слюна: sIgA, кг/мл

тощаковый секрет

базальный секрет

ингибированный секрет

 

233,69 ± 21,63

122,48 ± 21,5^^

110,67 ± 18,36^^^

 

376,43 ± 14,31***

319,29 ± 29,37***

238,6 ± 34,4***

Панкреатический сок: s IgA, кг/мл

базальный секрет

стимулированный секрет

 

34,42 ± 5,13

59,99 ± 12,54

 

158,4 ± 27,23***

80,24 ± 18,43

Примечание. Различия достоверны по отношению к показателям в условиях тощаковой секреции: ^ - p < 0,05; ^^ - p < 0,01; ^^^ - p < 0,001; различия достоверны по отношению к показателям в условиях фона: * - p < 0,05; ** - p < 0,01; *** - p < 0,001.

Эмоциональное напряжение вызывало значительное увеличение сывороточной концентрации ИЛ-4 (p < 0,001) и γ-ИФН (p < 0,001) (в условиях ингибирования желудочной секреции). В межпищеварительный период при стрессе происходило повышение концентрации γ-ИФН (p < 0,05). Поскольку ИЛ-4 является основным цитокином Th 2 лимфоцитов, то рост этого показателя может быть расценен как продукт активации Th2 ответа.

Заключение

Таким образом, эмоциональное напряжение вызывает сочетанные (зачастую однонаправленные) изменения в секреторной деятельности пищеварительных желез и показателей иммунологического профиля у здорового человека.

При эмоциональном напряжении в межпищеварительном периоде отмечается высокая устойчивость механизмов выделения желудочного сока (в отличие от панкреатического секрета), при этом в межпищеварительном периоде после эмоционального напряжения происходит угнетение выделения смешанной слюны и показателей фагоцитарного звена иммунной системы, снижается уровень ИЛ-4. Это сочетается с достоверным повышением некоторых показателей лимфоцитарно-клеточного звена (CD 8+ и ауторозеток), показателей гуморального звена иммунной системы (IgM). При этом повышается сывороточная концентрация γ-ИФН и sIgA в смешанной слюне, наблюдается угнетение показателей IgA и комплемента по 50 %-му гемолизу.

В условиях ацидификации двенадцатиперстной кишки после эмоционального напряжения отмечено достоверное повышение объема желудочного секрета, дебит-часа соляной кислоты. В этих условиях угнетался уровень секреции смешанной слюны и панкреатической секреции, уровень почти всех показателей фагоцитарного звена иммунной системы (за исключением процента фагоцитирующих нейтрофилов). При этом повышались концентрация sIgA в смешанной слюне и сывороточная концентрация IgM, уровень комплемента по 50 %-му гемолизу снижался. Наиболее устойчивыми к стрессовому фактору оказались показатели лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы, показатели лейкоцитарной формулы и основных цитокинов (ИЛ-4 и γ-ИФН).

Рецензенты:

  • Ерохин А.Н., д.м.н., доцент, ведущий научный сотрудник лаборатории функциональных исследований научного клинико-экспериментального отдела физиологии ФГУ «Российского научного центра «Восстановительная травматология и ортопедия» им. академика Г.А. Илизарова» Минздравсоцразвития РФ, г. Курган;
  • Дюльдин В.А., д.м.н., директор ГУ «Курганский областной центр лицензирования медицинской и фармацевтической деятельности», г. Курган.

Работа поступила в редакцию 21.09.2011.


Библиографическая ссылка

Сажина Н.В., Грязных А.В. ДЕЯТЕЛЬНОСТЬ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ ЗДОРОВОГО ЧЕЛОВЕКА В УСЛОВИЯХ ЭМОЦИОНАЛЬНОГО НАПРЯЖЕНИЯ // Фундаментальные исследования. – 2011. – № 10-3. – С. 548-552;
URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28913 (дата обращения: 28.03.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674