Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,074

СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПОСЛЕ СПЛЕНЭКТОМИИ

Масляков В.В. 1 Громов М.С. 1 Киричук В.Ф. 1 Поляков А.В. 1
1 НГОУ ВПО «Саратовский филиал Самарского медицинского института «РЕАВИЗ», Саратов
Проведено изучение состояния иммунного статуса в отдаленном послеоперационном периоде 50 пациентов после удаления селезенки по поводу ее травмы. Проводился анализ гуморального и клеточного звена системы иммунитета. В результате проведенного исследования установлено, что в клеточном звене системы иммунитета происходит снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечается повышение количества Т-цитотоксических лимфоцитов, В-лимфоцитов. В гуморальном звене систем иммунитета отмечается снижение количества иммуноглобулинов, за исключением IgA, интерлекинов, за исключением ИЛ-4. На основании проведенного исследования с целью коррекции выявленных иммунологических нарушений применяли полиоксидоний в дозе 12 мг. В результате проведенных исследований установлено, что применение этого препарата улучшает показатели как клеточного, так и гуморального звена системы иммунитета у пациентов после удаления селезенки. В связи с этим физиологически оправданным препаратом для коррекции иммунологических нарушений после спленэктомии рекомендуем полиоксидоний.
селезенка
спленэктомия
иммуностимуляторы
1. Барта И. Селезенка. – М.: Медицина, 1976. – С. 5–40.
2. Виноградов В.В., Денисенко В.И. Гетеротопическая аутолиентрансплантация селезеночной ткани после сплен­эктомии // Хирургия, 1986. – № 2. – С. 87–90.
3. Павлова И.Е. Особенности функционирования иммунной системы после спленэктомии у пациентов с заболеваниями системы крови и травмами селезенки: автореф. дис. … д-ра мед. наук. – СПб., 2007. – №5. – 34 с.
4. Чуманов А.Ю. Хирургическое лечение повреждений селезенки с учетом изменений иммунного статуса: автореф. дис. … канд. мед. наук – М., 2011 – 12 с.
5. Шапкин Ю.Г., Киричук В.Ф., Масляков В.В. Иммунный статус в отдаленном послеоперационном периоде у пациентов, оперированных по поводу повреждений селезенки // Хирургия. – 2006. – № 2. – С. 27–34.
6. Musavi M., Dayem H.A., Whitl A. Function of splenic omental implants in man after traumatic rupture of the spleen // The 32 nd World Congress of Surgery. – Sidney, 1987. – P. 49.
7. Okita K., Komaga K., Okaja K. Effect of splenectomy in tumor-beaking and gastric cancer patients // Gann. – 1977. – Vol. 680. – P. 731–736.
8. Vobofil Z. Segmntare resktion der verletzter humanmils // Chirurg. – 1982. – Bd. 53, № 11. – P. 692–696.
9. West K.W., Grosteld J.L. An autopsy method for evaluafing trauma // Wel. J. Surg. – 1985. – Vol. 115, № 4. – P. 447–451.

Известно, что селезенка не является жизненно важным органом. Однако она относится к периферическим лимфоидным тканям. В ней концентрируются супрессорные, хелперные и часть эффекторных клеток, здесь же происходит процесс активного антителообразования и продукция гуморальных медиаторов [1]. В селезенке содержится приблизительно 25% лимфоцитов типа Т и около 60% лимфоцитов типа В [1]. В ней протекают оба этапа дифференцировки антителообразующих клеток из костномозговых предшественников, в то время как для Т-лимфоцитов антигеннезависимый этап дифференцировки из костномозговых предшественников осуществляется в тимусе, а антигеннезависимый - в селезенке [6, 7, 8]. В селезенке осуществляется синтез IgM, IgC, вырабатывается С3- и С4-фрагментов комплемента [9]. Кроме того, в этом органе происходит синтез компонентов комплемента, которые включаются в альтернативный путь его активации [6]. Также в селезенке содержится большое количество пропердина [7]. Кроме того, селезенке принадлежит активное участие в процессе опсонизации - изменения клеточной поверхности патогена или других частиц, что приводит к захвату опсонированных клеток фагоцитами. По мнению процесс опсонизации связан с наличием иммуноглобулинов, причем из них хорошо опсонирует только IgG. В системе комплемента эту функцию выполняет практически один компонент - С3b, который присутствует в этом органе [8]. В настоящее время травма этого органа занимает одно из ведущих мест в хирургии, при этом наиболее часто выполняют спленэктомию [5]. Вместе с тем известно, что удаление этого органа приводит к развитию различных осложнений, связанных с иммунологическими нарушениями [3, 4]. С целью коррекции этих осложнений предложено применять иммуностимуляторы [4].

Цель исследования: изучить влияние полиоксидония и имунофана для коррекции иммунологических осложнений после спленэктомии.

Материалы и методы исследования

В работе проведен анализ изменений в иммунном статусе 50 пациентов с закрытыми травмами селезенки. Распределение пациентов по полу и возрасту представлено в табл. 1.

Таблица 1 Пациенты с травмой селезенки

Возраст, лет

Мужчины

Женщины

21-30

13

6

31-40

10

8

41-50

9

4

Всего:

32

18

Группу сравнения составили 30 относительно здоровых донора-добровольца того же возраста и пола. Сроки после операции составили от 5 до 9 лет.

При изучении иммунного ответа организма определялись следующие показатели: субпопуляции Т- и В-лимфоцитов: количество в периферической крови лимфоцитов, несущих медиаторы CD3 (зрелые Т-лимфоциты); CD4 (Т-хелперы); CD8 (цитотоксические Т-клетки); CD16 (натуральные киллеры); CD20 (В-клетки), а также соотношение CD4/CD8. Изучение названных показателей выполнялось с помощью проточной цитофлюрометрии с моноклональными антителами.

Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводилось турбодидометрическим методом. Для этого исследования применяли 3,5%-й раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 6000 Д (США) в фосфатном буфере (pH 8,4). Результаты учитывали на спектрометре СФ-46 при длине волны 450 нм и выражали в условных единицах. Общее содержание IgG, M, A - по методу простой радиальной иммуннодиффузии по Mancini и соавторам, а также IgE, определяемый по методу ИФА. Содержание С3-, С4-компонентов комплемента, ФНОα, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8, интерферона-γ (ИНФγ), ИЛ-4, ИЛ-10 в плазме крови определяли с помощью набора реагентов ProCon (ООО «Протеиновый контур» г. Санкт-Петербург. Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови оценивалось по фагоцитарному индексу (ФИ) и фагоцитарному числу (ФЧ). Активность кислородсодержащих систем нейтрофилов оценивалась по реакции восстановления нитросинего тетразолия спонтанного (НСТ-сп.) и стимулированного (НСИ-ст.) зимозаном. Полиоксидоний применялся ежедневно внутримышечно в дозе 12 мг один раз в сутки, имунофан в дозе 50 мкг, оба препарата общим курсом 9 инъекций.

Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи непараметрического метода U-критерия теста Mann - Whitney (пакет программ Statistica 6.0.). При этом были вычислены основные вероятностные характеристики случайных величин: среднее значение; нижний (25%) и верхний (75%) квартили, которые имели достоверность не менее 95% (p-значение < 0,05).

Результаты исследования и их обсуждение

Состояние клеточного звена системы иммунитета у пациентов после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде представлено в табл. 2.

Таблица 2 Показатели клеточного звена иммунитета у пациентов после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде (M ± m)

Показатель

(Группа сравнения (n = 30)

После спленэктомии (n = 50)

p

%

абс. число

%

абс. число

CD 3

61 ± 0,3

1,6 ± 0,4·109

46 ± 0,1

0,7 ± 0,2·109

< 0,05

CD 4

48 ± 0,4

1,3 ± 0,3·109

26 ± 0,3

0,3 ± 0,8·109

< 0,05

CD 8

15 ± 0,6

0,4 ± 0,2·109

35 ± 0,1

10 ± 0,2·109

< 0,05

CD 16

15 ± 0,4

0,5 ± 0,3·109

10 ± 0,3

0,1 ± 0,2·109

< 0,05

CD 20

8 ± 0,1

0,3 ± 0,2·109

19 ± 0,2

0,7 ± 0,2·109

< 0,05

CD4/CD8 (у.е.)

1,6 ± 0,3

2,0 ± 0,3

< 0,05

Примечание. * здесь и далее p - по сравнению с группой сравнения.

Из данных, представленных в табл. 2, видно, что в группе пациентов после спленэктомии зарегистрировано статистически достоверное снижение количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечается повышение количества Т-цитотоксических лимфоцитов, В-лимфоцитов.

Результаты гуморального звена системы иммунитета, полученные в группе пациентов после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде, представлены в табл. 3.

Из данных, представленных в табл. 3, видно, что у пациентов после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде, происходит статистически достоверное снижение по сравнению с группой сравнения, практически всех показателей. Необходимо отметить, что в этой группе оставалось в пределах физиологически нормальной величины количество IgA и ИЛ-4.

Таблица 3 Показатели гуморального звена иммунитета у пациентов после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде (M ± m)

Название показателей

Группа сравнения (n = 30)

После спленэктомии (n = 50)

р

Ig A, г/л

1,3 ± 0,2

1,4 ± 0,9

> 0,05

Ig G, г/л

6,3 ± 0,4

4,6 ± 0,2

< 0,05

Ig M, г/л

2,4 ± 0,3

0,3 ± 0,3

< 0,05

Ig E, г/л

1,4 ± 0,3

5,3 ± 0,6

< 0,05

Общее количество комплемента, МЕ/мл

221 ± 0,4

115 ± 0,2

< 0,05

С3 - фракция комплемента, г/л

12,5 ± 0,6

0,65 ± 0,4

< 0,05

С4 - фракция комплемента, г/л

0,18 ± 0,6

0,6 ± 0,3

< 0,05

С1-инг. нг/мл

220,4 ± 0,4

120 ± 0,1

< 0,05

ЦИК, у. е.

30 ± 0,4

46,7 ± 0,1

< 0,05

ФНОα, пг/мл

3,69 ± 0,2

1,2 ± 0,2

< 0,05

ИЛ1β, пг/мл

5,94 ± 0,1

3,21 ± 0,2

< 0,05

ИЛ-6, пг/мл

1,48 ± 0,2

0,22 ± 0,1

< 0,05

ИЛ-8, пг/мл

26,1 ± 0,2

21,7 ± 0,03

< 0,05

ИЛ-4, пг/мл

0,81 ± 0,1

0,80 ± 0,1

> 0,05

ИЛ-10, пг/мл

29,8 ± 0,3

20,1 ± 0,2

< 0,05

ИЛ-2, пг/мл

0,08 ± 0,1

0,01 ± 0,1

< 0,05

ИНФγ, пг/мл

4,02 ± 0,1

2,01 ± 0,01

< 0,05

Фактор Н, нг/мл

32,8 ± 0,3

21,1 ± 0,2

< 0,05

ФИ,%

53,2 ± 11

31 ± 0,2

< 0,05

ФЧ, абс.

5,81 ± 0,1

1,23 ± 0,03

< 0,05

НСТ-сп.,%

25,1 ± 0,2

23,6 ± 0,1

< 0,05

НСТ-ст.,%

31,4 ± 0,3

21,3 ± 0,1

< 0,05

При анализе клинических данных установлено, что в группе пациентов с ранее удаленной селезенкой наблюдается развитие заболеваний, которые могут быть связанны с изменениями в иммунном статусе: склонность к частым «простудным заболеваниям» - в 42,1% наблюдений, вовлечение в патологический процесс легких и брон- хов - в 42%, склонность к гнойничковым заболеваниям кожи - в 12,2% случаев.

Результаты, полученные в группе пациентов после спленэктомии и введения полиоксидония внутримышечно в дозе 12 мг, представлены в табл. 4.

Таблица 4 Показатели клеточного звена системы иммунитета в группе пациентов после введения полиоксидония в дозе 12 мг (M ± m)

Показатель

Группа сравнения (n = 30)

После спленэктомии (n = 25)

p

%

абс. число

%

абс. число

CD 3

61 ± 0,3

1,6 ± 0,4·109

60 ± 0,1

1,4 ± 0,4·109

> 0,05

CD 4

48 ± 0,4

1,3 ± 0,3·109

47 ± 0,2

1,3 ± 0,5·109

> 0,05

CD 8

15 ± 0,6

0,4 ± 0,2·109

15 ± 0,4

0,4 ± 0,2·109

> 0,05

CD 16

15 ± 0,4

0,5 ± 0,3·109

13 ± 0,5

0,1 ± 0,1·109

< 0,05

CD 20

8 ± 0,1

0,3 ± 0,2·109

5 ± 0,3

0,3 ± 0,1·109

> 0,05

CD4/CD8 (у.е.)

1,6 ± 0,3

1,5 ± 0,4

> 0,05

Из данных, представленных в табл. 4, видно, что в группе пациентов, которым вводили полиоксидоний в 12 мг, отмечается восстановление таких показателей клеточного звена системы иммунитета, как зрелые Т-лимфоциты (CD3); Т-хелперы (CD4). Данные показатели в анализируемой группе соответствовали результатам, полученным в группе относительно здоровых людей, и физиологически нормальным величинам. В то же время в обеих исследуемых группах зарегистрировано снижение показателей лимфоцитов несущих рецепторы CD16 - натуральные киллеры.

Результаты, полученные в гуморальном звене системы иммунитета после применения полиоксидония, представлены в табл. 5.

Таблица 5 Показатели гуморального звена системы иммунитета в группе пациентов после введения полиоксидония в дозе 12 мг (M ± m)

Название показателей

(Группа сравнения (n = 30)

После спленэктомии (n = 25)

р

Ig A, г/л

1,3 ± 0,2

1,4 ± 0,9

> 0,05

Ig G, г/л

6,3 ± 0,4

4,6 ± 0,2

< 0,05

Ig M, г/л

2,4 ± 0,3

2,3 ± 0,3

> 0,05

Ig E, г/л

1,4 ± 0,3

1,3 ± 0,6

> 0,05

Общее количество комплемента, МЕ/мл

221 ± 0,4

115 ± 0,2

< 0,05

С3 - фракция комплемента, г/л

12,5 ± 0,6

0,65 ± 0,4

< 0,05

С4 - фракция комплемента, г/л

0,18 ± 0,6

0,6 ± 0,3

< 0,05

С1-инг. нг/мл

220,4 ± 0,4

120 ± 0,1

< 0,05

ЦИК, у. е.

30 ± 0,4

29,7 ± 0,1

> 0,05

ФНОα, пг/мл

3,69 ± 0,2

3,69 ± 0,2

> 0,05

ИЛ1β, пг/мл

5,94 ± 0,1

5,71 ± 0,2

> 0,05

ИЛ-6, пг/мл

1,48 ± 0,2

1,35 ± 0,1

> 0,05

ИЛ-8, пг/мл

26,1 ± 0,2

21,7 ± 0,03

< 0,05

ИЛ-4, пг/мл

0,81 ± 0,1

0,80 ± 0,1

> 0,05

ИЛ-10, пг/мл

29,8 ± 0,3

20,1 ± 0,2

< 0,05

ИЛ-2, пг/мл

0,08 ± 0,1

0,08 ± 0,1

> 0,05

ИНФγ, пг/мл

4,02 ± 0,1

4,01 ± 0,01

> 0,05

Фактор Н, нг/мл

32,8 ± 0,3

21,1 ± 0,2

< 0,05

ФИ,%

53,2 ± 11

31 ± 0,2

< 0,05

ФЧ, абс.

5,81 ± 0,1

1,23 ± 0,03

< 0,05

НСТ-сп.,%

25,1 ± 0,2

23,6 ± 0,1

< 0,05

НСТ-ст.,%

31,4 ± 0,3

21,3 ± 0,1

< 0,05

В результате изучения влияния полиоксидония на показатели гуморального звена системы иммунного статуса нами установлено, что по сравнению с данными, полученными в группе исследуемых без иммунизации, в основной группе зарегистрированы следующие изменения: количество IgE и IgM соответствовало нормальным величинам; нормализовалось количество ЦИК; количество ФНОα, ИЛ1β, ИЛ-6, ИЛ-2, ИЛ-4, ИНФγ стало соответствовать данным, полученным в группе сравнения здоровых людей. В то же время показатели IgG, общего количества комплемента, его С3- и С4-фракций, фактора Н, ФИ, ФЧ абс., НСТ-сп., НСТ-ст. не изменялись и оставались пониженными (см. табл. 5).

Таким образом, представленные результаты применения полиоксидония в дозе 12 мг после спленэктомии показывают, что применение того препарата физиологически оправдано. Это подтверждается восстановлением показателей клеточного звена системы иммунитета и основных показателей гуморального звена системы иммунитета, увеличивается секреция ИФНγ, продуцирующая Th1-клетками.

Для сравнения нами проведено изучение влияния имунофана в дозе 50 мкг на состояние клеточного и гуморального звена системы иммунитета в отдаленном послеоперационном периоде после спленэктомии.

Полученные данные клеточного звена системы иммунитета представлены в табл. 6

Таблица 6 Показатели клеточного звена системы иммунитета в группе пациентов после введения имунофана

Показатель

Результаты в группах

p*

(Группа сравнения (n = 30)

после спленэктомии (n = 25)

%

абс. число

%

абс. число

 

CD3

61 ± 0,3

1,6 ± 0,4∙109

56 ± 0,1

1,3 ± 0,4∙109

< 0,05

CD4

48 ± 0,4

1,3 ± 0,3∙109

45 ± 0,2

1,0 ± 0,5∙109

< 0,05

CD8

15 ± 0,6

0,4 ± 0,2∙109

15 ± 0,4

0,4 ± 0,2∙109

> 0,05

CD16

15 ± 0,4

0,5 ± 0,3∙109

13 ± 0,5

0,1 ± 0,1∙109

< 0,05

CD20

8 ± 0,1

0,3 ± 0,2∙109

5 ± 0,3

0,3 ± 0,1∙109

> 0,05

CD4/CD8

1,6 ± 0,3

1,3 ± 0,4

> 0,05

Как видно из данных, представленных в табл. 6, после введения имунофана изменений в клеточном звене системы иммунитета не получено, все показатели после введения этого препарата соответствовали данным, полученным в группе обследуемых без введения имунофана. Отсюда следует, что введение имунофана после спленэктомии не приводит к коррекции иммунологических нарушений в клеточном звене системы иммунитета.

Результаты изучения гуморального звена системы иммуннитета после введения имунофана представлены в табл. 7.

Таблица 7 Показатели гуморального звена иммунитета в группе пациентов после введения имунофана (M ± m)

Название показателей

Группа сравнения (n = 30)

После спленэктомии (n = 25)

р

Ig A, г/л

1,3 ± 0,2

1,4 ± 0,9

> 0,05

Ig G, г/л

6,3 ± 0,4

6,2 ± 0,2

> 0,05

Ig M, г/л

2,4 ± 0,3

0,3 ± 0,3

< 0,05

Ig E, г/л

1,4 ± 0,3

5,3 ± 0,6

< 0,05

Общее количество комплемента, МЕ/мл

221 ± 0,4

200 ± 0,2

> 0,05

С3 - фракция комплемента, г/л

12,5 ± 0,6

11,5 ± 0,4

> 0,05

С4 - фракция комплемента, г/л

0,18 ± 0,6

0,16 ± 0,3

> 0,05

С1-инг. нг/мл

220,4 ± 0,4

120 ± 0,1

< 0,05

ЦИК, у. е.

30 ± 0,4

29,7 ± 0,1

> 0,05

ФНОα, пг/мл

3,69 ± 0,2

1,2 ± 0,2

< 0,05

ИЛ1β, пг/мл

5,94 ± 0,1

3,21 ± 0,2

< 0,05

ИЛ-6, пг/мл

1,48 ± 0,2

0,22 ± 0,1

< 0,05

ИЛ-8, пг/мл

26,1 ± 0,2

21,7 ± 0,03

< 0,05

ИЛ-4, пг/мл

0,81 ± 0,1

0,80 ± 0,1

> 0,05

ИЛ-10, пг/мл

29,8 ± 0,3

20,1 ± 0,2

< 0,05

ИЛ-2, пг/мл

0,08 ± 0,1

0,01 ± 0,1

< 0,05

ИНФγ, пг/мл

4,02 ± 0,1

2,01 ± 0,01

< 0,05

Фактор Н, нг/мл

32,8 ± 0,3

21,1 ± 0,2

< 0,05

ФИ,%

53,2 ± 11

31 ± 0,2

< 0,05

ФЧ, абс.

5,81 ± 0,1

1,23 ± 0,03

< 0,05

НСТ-сп.,%

25,1 ± 0,2

23,6 ± 0,1

< 0,05

НСТ-ст.,%

31,4 ± 0,3

21,3 ± 0,1

< 0,05

Из данных табл. 7 видно, что у пациентов после спленэктомии и введения имунофана отмечается восстановление таких показателей, как IgG, общего количества комплимента, его С3- и С4-фракций. Все остальные показатели не изменялись и соответствовали данным, полученным в группе пациентов после спленэктомии. Из этого можно сделать заключение, что введение имунофана не приводит к коррекции иммунологических нарушений у пациентов после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде.

Таким образом, проведенные исследования показывают, что спленэктомия, выполненная по поводу травмы, в отдаленном послеоперационном периоде приводит к следующим изменениям в иммунном статусе организма: в клеточном звене к снижению количества зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов и Т-киллеров. Вместе с тем отмечается повышение количества Т-цитотоксических лимфоцитов, В-лимфоцитов. В гуморальном звене: происходит снижение всех исследуемых показателей, за исключением IgA и ИЛ-4. С целью коррекции этих изменений физиологически оправдано применение полиоксидония в дозе 12 мг.

Выводы

  1. Спленэктомия, выполненная по поводу травмы селезенки, в отдаленном послеоперационном периоде приводит к изменениям как в клеточном, так и в гуморальном звене системы иммунитета.
  2. С целью коррекции иммунологических осложнений после спленэктомии в отдаленном послеоперационном периоде следует применять полиоксидоний в дозе 12 мг.

Рецензенты:

  • Александров Д.А., д.м.н., профессор кафедры хирургических болезней и онкологии ФПК и ППС ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет имени В.И. Разумовского Минздравсоцразвития РФ», г. Саратов;
  • Пучиньян Д.М., д.м.н., профессор, заместитель директора по научной работе ФГБУ «Саратовский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии» Минздравсоцразвития России, г. Саратов.

Работа поступила в редакцию 09.04.2012.


Библиографическая ссылка

Масляков В.В., Громов М.С., Киричук В.Ф., Поляков А.В. СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПОСЛЕ СПЛЕНЭКТОМИИ // Фундаментальные исследования. – 2012. – № 5-1. – С. 80-85;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=29850 (дата обращения: 23.10.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074