Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,074

ЗНАЧЕНИЕ ДИАСКИНТЕСТА И КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА В ДИАГНОСТИКЕ ТУБЕРКУЛЕЗА У ДЕТЕЙ

Белушков В.В. 1 Лозовская М.Э. 1 Новик Г.А. 1 Гурина О.П. 1 Шибакова Н.Д. 1
1 ГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия», Санкт-Петербург
В статье представлены результаты применения нового диагностического кожного теста –ДИАСКИНТЕСТ (ДСТ). Обследовано 355 детей, среди которых 121 – больные туберкулезом, 176 – были инфицированы МБТ без заболевания и 58 неинфицированные. У 106 детей параллельно с диаскинтестом выполнен квантифероновый тест (QFT). У детей с активным туберкулезом ДСТ имел положительный результат в 71,6%, что значительно чаще, чем у инфицированных детей и больных с кальцинатами. У неинфицированных детей диаскинтест был отрицательным в 100%. У детей в очагах туберкулезной инфекции, реакция на ДСТ значительно выше, чем при неустановленном контакте. Совпадение результатов диаскинтеста и QFT наблюдалось в 84,9% случаев. Сделан вывод о высокой информативности ДСТ и QFT и необходимости использования комплексного подхода к диагностике туберкулеза у детей.
туберкулез
дети
диагностика
диаскинтест
квантифероновый тест
1. Аксенова В.А., Клевно Н.И., Севостьянова Т.А. Эпидемиологическая ситуация по туберкулезу у детей и подростков в России // Туберкулез и болезни легких: материалы IX съезда фтизиатров России. – 2011. – №4. – С. 22.
2. Клинические исследования нового кожного теста «диаскинтест» для диагностики туберкулеза / В.И. Киселев, П.М. Барановский, И.В. Рудых, А.М. Шустер, В.А. Мартьянов // Туберкулез и болезни легких. – 2009. – №2. – С. 11–16.
3. Кожная проба с препаратом «Диаскинтест» – новые возможности идентификации туберкулезной инфекции / под ред. академика РАН и РАМН М.А. Пальцева. – М.: Изд. «Медицина», 2010. – 176 с.
4. Мейснер А.Ф., Овсянкина Е.С., Стахеева Л.Б. Туберкулинодиагностика у детей. Скрытая (латентная) туберкулезная инфекция? // Проблемы туберкулеза и болезней легких. – 2008. – №6. – С. 29–32.
5. Митинская Л.А. Новые технологии при профилактике, выявлении, диагностике и лечении туберкулеза у детей // Проблемы туберкулеза. – 2003. – №1. – С. 19–25.
6. Опыт применения нового кожного теста (диаскинтеста) для диагностики туберкулеза органов дыхания у детей и подростков в туберкулезном отделении / Е.С. Овсянкина, М.Ф. Губкина, Н.Г. Ершова, М.Г. Кобулашвили // Туберкулез и болезни легких. – 2010. – №1. – С. 16–19.
6. Сравнительные результаты кожного теста с препаратом, содержащим рекомбинантный белок CFP-10-ESAT-6, и лабораторного теста QUANTIFERON / Л.В. Слогоцкая, Я.А. Кочетков, Д.А. Иванова, О.Ю. Сенчихина, О.И. Алещенкова, Н.В. Куликовская, Т.В. Ванеева // Совершенствование медицинской помощи больным туберкулезом: материалы Всероссийской научно-практической конференции. – СПб., 2011. – С. 379–381.
7. Туберкулиновая чувствительность у детей старшего возраста с впервые выявленным активным туберкулезом / Т.Е. Тюлькова, Ю.П. Чугаев, Л.В. Андреева, Э.А. Кашуба, И.Б. Куликова, Н.Г. Белобородова // Проблемы туберкулеза и болезней легких – 2008. – №8. – С. 19–21.

Туберкулез в Российской Федерации продолжает оставаться серьезной проблемой, ежегодно заражается микобактериями туберкулеза 280-290 тыс. детей и подростков [1]. Основным методом выявления туберкулеза в детском возрасте уже около ста лет является туберкулинодиагностика. С введением в нашей стране с 1949 года массовой вакцинации новорожденных БЦЖ диагностическое значение пробы с туберкулином снизилось из-за перекрестной сенсибилизации организма вакцинным штаммом M. bovis BCG и вирулентными штаммами M.tuberculоsis при инфицировании [5]. В последние годы информативность кожного туберкулинового теста еще больше понизилась в связи с распространением у детей аллергических заболеваний и иммунопатологических состояний, искажающих его результаты [4, 8]. В современных условиях, по данным некоторых авторов, количество ложноположительных реакций Манту (RМ), составляет от 40 до 90%. [2]. Важным шагом в диагностике туберкулеза стало открытие белков ESAT-6 и CFP-10, специфичных для фазы размножения МБТ, и создание на их основе лабораторных методов [3], в частности, квантиферонового теста (Quantiferon-Gold in tube - QFT) широко применяемого для диагностики туберкулезной инфекции in vitro за рубежом. Российскими учеными на основе ESAT-6 и CFP-10 разработан и успешно апробирован новый диагностический препарат: туберкулезный рекомбинантный аллерген - диаскинтест (ДCТ), предназначенный для диагностики туберкулеза путем постановки внутрикожной пробы [2, 3, 6]. По мнению ряда авторов, ДСТ выгодно отличается от квантиферонового теста не только дешевизной и простотой выполнения, но и более точными результатами [6]. Вместе с тем по результатам применения диаскинтеста и квантиферонового теста на практике возникает ряд вопросов, требующих дальнейшего изучения.

Цель исследования: повышение эффективности диагностики туберкулезного инфицирования и локальных форм туберкулеза у детей на основе применения диаскинтеста и квантиферонового теста.

Материалы и методы исследования

Обследовано 355 детей от 0 до 15 лет пациентов туберкулезного диагностического отделения ДИБ №3 Санкт-Петербурга. Все дети поступили для уточнения диагноза в связи с подозрением на заболевание туберкулезом. Средний возраст детей составил 7,1 ± 0,19 года. Детей раннего возраста (от 0 до 3 лет) - 36 чел., дошкольного (с 3 до 7 лет) -139 чел., младшего школьного (с 7 до 12 лет) - 119 чел., старшего школьного возраста (с 12 до 15 лет) - 61 чел. Дети проходили стандартное клиническое и лабораторно-инструментальное обследование, дополненное томографическим исследованием (в большинстве случаев - компьютерной томографией органов грудной полости), индивидуальной туберкулинодиагностикой, серологическим исследованием, фибробронхоскопией (по показаниям), ультразвуковым исследованием. Уточнялись наличие и характер сопутствующей патологии. Все дети были тщательно обследованы на наличие гельминтозов и при необходимости пролечены. Проводились консультации специалистов: офтальмолога, оториноляринголога, невропатолога, кардиолога, аллерголога, инфекциониста и др. Всем 355 детям выполнялся ДСТ, из них методом квантиферонового теста обследовано 106 детей.

Неспецифическую патологию имели 285 детей (80,3%), в том числе 97 чел. (27,3%) имели 2 и более заболевания. Среди них преобладали глистные и паразитарные инвазии (лямблиоз, аскаридоз) - 118 чел. (33,2%), заболевания ЛОР-органов (хронические аденоидит, тонзиллит, ринит, отит) - 60 (16,9%), заболевания желудочно-кишечного тракта (дискинезия желчевыводящих путей, гастро-дуаденит) - 57 (16,1%). Реже встречались другие заболевания: аллергический дерматит - 22 (6,2%), заболевания нервной системы - 22 (6,2%), заболевания мочевыделительной системы - 19 (5,3%), бронхиальная астма - 13 (3,7%), обменные нарушения - 13 (3,7%). ВИЧ инфекцию имели 5 пациентов (1,4%). К числу часто болеющих детей (ЧБД) относился 41 чел. (11,5%). Статистическая обработка данных выполнена с использованием компьютерных программ МС Excel, Statistica v.6.

Результаты исследования и их обсуждение

Диагноз туберкулеза, заподозренный в противотуберкулезном диспансере, был подтвержден в стационаре лишь у 121 ребенка (34,1%). У 37 (10,4%) детей диагностирован ранний период первичной туберкулезной инфекции (РППТИ) без заболевания, у 48 (13,5%) детей - туберкулезное инфицирование (ТИ) с прошлых лет с гиперергической реакцией Манту с 2ТЕ (RM 2ТЕ), 33 (9,3%) пациента имели ТИ с нарастанием RM 2ТЕ, у 58 (16,3%) детей было ТИ с монотонностью туберкулиновых проб без заболевания. Признаны не инфицированными МБТ 58 (16,3%) детей. У большинства детей (88 из 121 чел.) с диагностированным туберкулезом процесс был расценен как активный (I группа диспансерного учета (ДУ). У остальных 33 детей изменения во внутригрудных лимфоузлах и легких, в виде мелких единичных кальцинатов при отсутствии клинических признаков активности, были расценены как остаточные изменения перенесенного туберкулеза (III-А группа ДУ).

В соответствии с окончательными диагнозами сформированы 7 групп детей (табл. 1 и 2), у которых оценены результаты ДСТ. Оценка проводилась, как в целом в группе, так и в двух ее подгруппах - А и Б (соответственно у детей, имеющих и не имеющих установленный туберкулезный контакт). Особенностью ответа на ДСТ была низкая частота сомнительных реакций (гиперемия без папулы) - 3 из 355 обследованных (0,8%).

1-я группа - 37 детей в раннем периоде первичной туберкулезной инфекции (РППТИ или «вираж»). Положительный результат ДСТ отмечен у 45,9%, отрицательный - у 51,4%, сомнительный - у 2,7% детей. Важно, что у всех 12 детей в РППТИ, имеющих установленный туберкулезный контакт, отмечался положительный результат ДСТ (в 100%), тогда как при отсутствии контакта только у 5 из 25 детей (20%, р < 0,05). Частота гиперергического ДСТ составила 18,9%, в том числе у 2 детей отмечалась общая реакция с подъемом температуры тела до 37,5 градусов и 3-х дополнительные элементы (везикулы, буллы, лимфангит). Частота гиперергических реакций на ДСТ и средний размер папулы были достоверно выше в группе детей, имеющих туберкулезный контакт, чем без него. Между положительными результатами ДСТ и RM отмечалась слабая корреляция (r = 0,40).

2-ю группу составили 48 детей, инфицированных с прошлых лет с гиперергической пробой Манту. Частота положительного ДСТ составила 56,3%. У детей, имеющих и не имеющих туберкулезный контакт, частота положительного ДСТ была близкой (63,6 и 54,1%; р > 0,05). Однако частота гиперергических результатов ДСТ была достоверно выше в подгруппе детей с туберкулезным контактом, чем без него (54,5 и 29,7% р < 0,05). У 3-х детей отмечались гиперергические результаты ДСТ с дополнительными элементами, но общих реакций при этом не было. Среднее значение диаскинтеста составило 15,5 ± 1,0 мм, что значительно выше, чем у детей 1-й группы (с виражом) - 12,2 ± 1,1 мм (р < 0,05) (рисунок).

3-я группа - 33 ребенка, инфицированные с прошлых лет с резким нарастанием чувствительности к туберкулину (но без гиперергических RM 2ТЕ). Положительный результат ДСТ имели 24,2% детей, гиперергический - 6,1%, средний размер папулы составил 9,9 ± 2,1 мм. Эти показатели значительно ниже, чем в двух предыдущих группах (р < 0,05). Вместе с тем четко прослеживается более высокая частота положительного ДСТ в подгруппе детей из очагов инфекции, по сравнению с не имеющими семейного очага (60,0 и 8,7%, р < 0,05).

Таблица 1 Результаты постановки диаскинтеста у детей, инфицированных МБТ

Группы

Положит. ДСТ (абс./%)

Папула в мм (М ± m)

Гиперергич. ДСТ (абс./%)

Доп. элементы

1 гр.

РППТИ

n = 37

17

(45,9)

12,2 ± 1,1

р1-2,3 < 0,05

7

(18,9)

3

(8,1)

1-А гр.

РППТИ Туб.конт.(+)

n = 12

12

(100,0)*

13,5 ± 1,1*

4

(33,3)*

1

(8,3)

1-Б гр.

РППТИ Туб.конт.(-)

n = 25

5

(20,0)

9,2 ± 2,6

3

(12,0)

2

(8,0)

2 гр.

ТИ с гиперергией

n = 48

27

(56,3)

15,5 ± 1,0

р2-1,3 < 0,05

17

(35,4)

3

(6,3)

2-A гр.

ТИ с гиперергией. Туб.конт.(+)

n = 11

7

(63,6)

17,7 ± 1,1*

6

(54,5)*

1

(9,1)

2-Б гр.

ТИ с гиперергией. Туб.конт.(-)

n = 37

20

(54,1)

14,7 ± 1,3

11

(29,7)

2

(5,4)

3 гр.

ТИ с нарастанием n = 33

8

(24,2)

р3-1,2 < 0,05

9,9 ± 2,1

р3-1,2 < 0,05

2

(6,1)

0

3-A гр.

ТИ с нарастанием. Туб.конт.(+)

n = 10

6

(60,0)*

9,8 ± 2,6

1

(10,0)

0

3-Б гр.

ТИ с нарастанием. Туб.конт.(-)

n = 23

2

(8,7)

10,0 ± 0,5

1

(4,3)

0

4 гр.

ТИ с монотонностью

n = 59

3

5,1

р4-1,2 < 0,05

8,3 ± 2,7

р4-1,2 < 0,05

0

0

IV-А гр.

ТИ с монотонностью

Туб.конт.(+) n = 16

1

6,3

12,0

0

0

IV-Б гр.

ТИ с монотонностью

Туб.конт.(-) n = 43

2

4,7

6,5 ± 3,2

0

0

Примечание. (*) - достоверная разница в подгруппах, имеющих и не имеющих туберкулезный контакт.

В 4-й группе было 58 детей, инфицированных с прошлых лет с монотонной пробой Манту. Клинико-рентгенологические симптомы, обусловленные сопутствующей патологией, вызывали у них подозрение на заболевание туберкулезом, которое в стационаре не подтвердилось. Среди этих детей лишь у 3-х (8,7%) ДСТ был положительным, что значительно реже, чем в остальных группах.

Обобщая данные инфицированных МБТ детей всех групп (176 чел.), можно сделать вывод, что результаты ДСТ были значительно выше в очагах туберкулезной инфекции, чем вне их (частота положительных реакций соответственно составляет 53,1 и 22,6%, р < 0,05). Отмечена корреляция между значениями ДСТ и RM у инфицированных детей (r = 0,44).

5-я группа состояла из 58 детей, у которых по результатам обследования было отвергнуто не только заболевание туберкулезом, но и факт инфицирования МБТ. У этих детей во всех случаях ДСТ был отрицательным.

В 6-й группе (табл. 2) было 88 детей, больных активными формами туберкулеза. Структура клинических форм активного туберкулеза была следующей: 49 детей (55,7%) туберкулез внутригрудных лимфатических узлов (ТВГЛУ) неосложненного течения. С ТВГЛУ осложненного течения - 14 чел. (15,9%), в том числе, с отсевами - 8, туберкулезом бронхов - 3, плевритом - 3. С первичным туберкулезным комплексом (ПТК) неосложненного течения было 10 чел. (11,4%), с осложненным течением ПТК - 4 чел. (4,5%), в том числе, с отсевами - 1, туберкулезом бронха - 1, плевритом - 1, распадом первичного аффекта - 1. Туберкулезная интоксикация была у 4-х детей (4,5%). Остальные формы туберкулеза представлены единичными случаями: генерализованный туберкулез - 2, инфильтративный - 2, туберкулез периферических лимфоузлов - 1, туберкулезный менингит - 1 (как проявление генерализованного туберкулеза), плеврит (как самостоятельная форма) - 1. Микобактерии туберкулеза выделены в промывных водах бронхов у 2-х детей и в ликворе - у 1 ребенка.

Средний диаметр папулы при постановке пробы с диаскинтестом детям различных групп

Таблица 2 Результат постановки диаскинтеста у больных туберкулезом детей

Группы

Положит.

ДСТ (абс./%)

Папула в мм

(М ± m)

Гиперергич.

ДСТ (абс./%)

Доп. элементы

Общая реакция

6 гр.

Туберкулез активн.

n = 88

63

(71,6)

Р6-7 < 0,05

15,0 ± 0,7

35

(39,8)

7

(7,9)

4

(4,5)

6-А

Туберкулез активн.

Туб.конт.(+)

n = 45

34

(75,6)

15,5 ± 1,0*

20

(44,4)

5

(11,1)

2

(4,4)

6-Б

Туберкулез активн.

Туб.конт.(-)

n = 43

29

(67,4)

14,0 ± 1,1

15

(34,9)

2

(4,7)

2

(4,7)

7 гр.

Туберкулез,ф. кальц.

n = 33

15

(45,5)

Р7-6 < 0,05

15,7 ± 0,7

10

(30,3)

3

(9,1)

1

(3,0)

7-A

Туберкулез,ф. кальц.

Туб.конт.(+)

n = 10

7

(70,0)

16,9 ± 1,5*

5

(33,3)

1

(6,7)

0

7-Б

Туберкулез,ф. кальц.

Туб.конт.(-)

n = 23

8

(44,4)

14,6 ± 1,7

5

(27,7)

2

(11,1)

1

(5,6)

Примечание. (*) - достоверная разница в подгруппах зависимости от наличия туберкулезного контакта.

Из 88 больных активными формами туберкулеза 63 (71,6%) имели положительный результат ДСТ, значительно чаще, чем в других группах инфицированных детей (р < 0,05). Средний размер папулы составил 15,0 ± 0,7 мм, что было близко к уровню инфицированных детей с гиперергией к туберкулину.

Больные дети из очагов туберкулезной инфекции и из неустановленного туберкулезного контакта имели близкую частоту положительного ДСТ (75,6 и 67,4% соответственно). Причина отрицательного ДСТ у 1/3 (28,4%) больных активными формами туберкулеза, впервые выявленного и не леченного, остается не ясной. Отрицательные результаты не зависели и от возраста. Среди трех детей с ВИЧ инфекцией, больных туберкулезом, ДСТ был положительным в 2-х и отрицательным в 1 случае. У 4-х больных детей гиперергический результат ДСТ сочетался с общей реакцией в виде подъема температуры тела до субфебрильных цифр. Отмечалась слабо выраженная корреляция между положительными результатами ДСТ и пробы Манту с 2ТЕ у больных детей (r = 0,44).

В 7-й группе, у 33 детей с туберкулезным процессом в фазе кальцинации частота положительных реакций на ДСТ была значительно ниже, чем при активных формах 45,5% (по сравнению с 71,6%, р < 0,05). Средний размер папулы у этих больных составил 15,7 ± 0,7 мм (р > 0,05). Среди больных с формами туберкулеза в фазе кальцинации не получено достоверного различия по частоте положительного ДСТ в подгруппах детей в зависимости от туберкулезного контакта. Но средний размер папулы ДСТ был выше у детей из туберкулезных очагов. Корреляция между размером папулы на ДСТ и RM 2 ТЕ в этой группе детей отсутствовала (r = 0,11).

Параллельная постановка ДСТ и квантиферонового теста проведена 106 детям. Сопоставление результатов ДСТ и QFT (положительный или отрицательный) выявило их совпадение у 90 детей (84,9%) случаев. Однако количественная корреляция между уровнями ДСТ и QFT отсутствовала (r = 0,15). У 2-х детей с сомнительным ДСТ наблюдался отрицательный результат QFT, что нельзя считать расхождением результатов. Один из этих детей был с виражом туберкулиновой чувствительности и один с первичным туберкулезным комплексом. У остальных 14 пациентов (13,2% обследованных) ДСТ и QFT дали противоположные результаты, что требует отдельного рассмотрения (табл. 3).

Таблица 3 Диагнозы детей, имеющих разнонаправленные результаты ДСТ и QFT

Группы детей

Результаты тестов

ДСТ (+) QFT (-)

ДСТ (-) QFT (+)

1 гр. РППТИ

1

0

2 гр. ТИ с гиперергией

1

1

3 гр. ТИ с нарастанием

1

1

5 гр. Не инфицированы

0

1

6 гр. Туберкулез активный

5

1

7гр. Туберкулез,ф. кальцинации

2

0

Всего

10

4

Всего расхождений результатов

14

Как видно из таблицы, случаи расхождения результатов ДСТ и QFT наблюдались во всех группах детей, за исключением группы инфицированных с прошлых лет с монотонной чувствительностью к туберкулину. Среди 14 детей с несовпадающими результатами двух тестов в большинстве случаев положительный ДСТ сочетался с отрицательным QFT (10 из 14 чел.). У 4-х детей, напротив, при отрицательном ДСТ наблюдался положительный QFT (4 чел.). Из таблицы следует, что результаты квантиферонового теста в 3-х случаях позволили дополнительно (при отрицательном ДСТ) диагностировать активную туберкулезную инфекцию, и в одном случае результат QFT был расценен как ложноположительный (у неинфицированного ребенка).

При отрицательном ДСТ результаты QFT имели невысокие значения (от 0,384 до 1,554 МЕ/мл). ДСТ позволил дополнительно выявить активную туберкулезную инфекцию, т.е. оказался более чувствительным у 10 больных с отрицательным QFT.

Выводы

Таким образом, исследование показало, что ДСТ отражает активность туберкулезной инфекции у детей, как имеющих локальные формы туберкулеза, так и являющихся только инфицированными.

  1. Среди инфицированных детей наибольшая частота ДСТ и максимальные размеры папул наблюдаются у детей в раннем периоде туберкулезной инфекции и детей с гиперергической чувствительностью к туберкулину по RM 2ТЕ, когда риск развития локальных форм максимальный.
  2. У детей, имеющих активные формы туберкулеза, частота положительных реакций на ДСТ составляет 71,6%, что достоверно выше, чем во всех группах детей, инфицированных МБТ, и имеющих процесс в фазе кальцинации.
  3. Вместе с тем остается неясной причина отрицательного результата ДСТ у 1/3 детей с активными формами туберкулеза.
  4. У инфицированных детей частота положительных реакций на ДСТ значительно выше в очагах туберкулезной инфекции, чем при неустановленном контакте (с 53,1 и 22,6%, р < 0,05).
  5. При параллельной постановке ДСТ и QFT у 84,9% детей наблюдалось совпадение результатов. При расхождении результатов ДСТ и QFT необходимо учитывать оба результата в совокупности с остальными данными обследования, в сомнительных случаях повторять тесты в динамике.
  6. ДСТ и QFT приобретают важное значение в диагностике туберкулеза у детей, но они должны применяться в комплексе с остальными клинико-лабораторными и инструментальными методами и с учетом эпидемиологического анамнеза.

Рецензент -

Браженко О.Н., д.м.н., профессор кафедры фтизиопульмонологии ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. академика И.П. Павлова», г. Санкт-Петербург.

Работа поступила в редакцию 09.04.2012.


Библиографическая ссылка

Белушков В.В., Лозовская М.Э., Новик Г.А., Гурина О.П., Шибакова Н.Д. ЗНАЧЕНИЕ ДИАСКИНТЕСТА И КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА В ДИАГНОСТИКЕ ТУБЕРКУЛЕЗА У ДЕТЕЙ // Фундаментальные исследования. – 2012. – № 7-1. – С. 34-39;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=30033 (дата обращения: 12.11.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074