Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,074

АГРЕГАЦИОННЫЕ И ЦИТОАРХИТЕКТОНИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТОВ У ПОРОСЯТ В ТЕЧЕНИЕ ФАЗЫ МОЛОЧНО-РАСТИТЕЛЬНОГО ПИТАНИЯ

Медведев И.Н. 1 Парахневич А.В. 1
1 Курский институт социального образования (филиал) РГСУ, Курск
Течение всего онтогенеза у продуктивных животных характеризуется изменениями микрореологических особенностей их форменных элементов, что неизбежно влияет на общие реологические свойства крови. Данная работа посвящена исследованию реологических свойств эритроцитов у здоровых поросят молочно-растительного питания. В исследование включено 39 здоровых поросят молочно-растительного питания породы крупная белая, обследованных на 21-е, 25-е, 30-е и 40-е сутки жизни. У наблюдаемых животных оценивались активность перекисного окисления липидов, показатели цитоархитектоники и агрегации эритроцитов с последующим расчетом индексов, характеризующих сущность данных показателей. Был проведен статистический анализ полученных результатов. У здоровых поросят молочно-растительного питания отмечается оптимальный липидный состав эритроцитов и невысокая активность в них перекисного окисления липидов при некотором повышении агрегации эритроцитов и увеличении в их крови содержания обратимо и необратимо измененных эритроцитов на фоне понижения количества дискоцитов. У поросят к концу наблюдения зарегистрировано понижение количества эритроцитов-дискоцитов до 83,3 ± 0,09%, повышение уровня обратимо измененных до 10,8 ± 0,07% и необратимо измененных эритроцитов до 5,9 ± 0,05%. В крови поросят молочно-растительного питания отмечено небольшое увеличение уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты и количества самих агрегатов при понижении числа свободно перемещающихся красных кровяных телец.
эритроциты
агрегация
цитоархитектоника
поросята
молочно-растительное питание
1. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, О.Л. Колесников, В.Э. Цейликман. – Челябинск: Изд-во Челябинского государственного педагогического университета, 2000. – 167 с.
2. Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лабораторное дело. – 1983. – №3. ‒ С. 33–36.
3. Козинец Г.И., Симоварт Ю.А. Поверхностная цитоархитектоника клеток периферической крови в норме и при заболеваниях системы клеток. – Таллин, 1984. – 116 с.
4. Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клинической химии. – Минск: Изд-во «Беларусь», 1982. – 367 с.
5. Кубатиев А.А., Андреев А.А. Перекиси липидов и тромбоз // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 1979. – № 5. – С. 414–417.
6. Методические подходы к исследованию реологических свойств крови при различных состояниях / И.Н. Медведев, А.П. Савченко, С.Ю. Завалишина и др. // Российский кардиологический журнал. – 2009. – №5. – С. 42–45.
7. Медведев И.Н., Завалишина С.Ю. Активность тромбоцитарного гемостаза у здоровых новорожденных телят // Доклады РАСХН. – 2011. – №5. С. 32–34.
8. Чевари С., Андял Т., Штренгер Я. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте // Лабораторное дело. – 1991. – №10. – С. 9–13.

Непрерывное перемещение крови по сосудам в значительной мере определяет состояние функциональной активности организма всех продуктивных животных, в т.ч. поросят, контролируя процес­сы тканевого обмена в любых условиях экологической обстановки. Важными элементами реологии крови у них на всех этапах их развития являются ее форменные элементы [7], в т.ч. эритроциты, во многом определяющие ее жидкостные свойства за счет определенной их агрегационной активности и геометрии [6]. Не вызывает сомнения, что в любом возрасте у поросенка очень важно состояние микрореологических свойств эритроцитов, т.к. достаточный приток кислорода к тканям обеспечивает наилучшее протекание всех биохимических процессов [3, 6]. При этом, несмотря на важность состояния цитоархитектоники и агрегации эритроцитов у здоровых поросят, их особенности в отдельные фазы онтогенеза остаются исследованными весьма недостаточно.

В этой связи в настоящей работе была поставлена цель: выяснить реологические свойства эритроцитов у здоровых поросят молочно-растительного питания.

Материалы и методы исследования

В работе обследовано 39 здоровых поросят породы крупная белая на 21-е, 25-е, 30-е, 35-е и 40-е сутки жизни. У поросят оценивалась активность перекисного окисления липидов (ПОЛ) плазмы по количеству в ней ацилгидроперекисей (АГП) [2], тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором «Агат-Мед». Регистрировалась антиокислительная активность (АОА) жидкой части крови [1].

Эритроциты отмывались и ресуспендировались с последующей оценкой уровня в них ПОЛ, регистрирующегося по количеству в них АГП [2] и малонового диальдегида (МДА) [5]. С использованием набора «Витал Диагностикум» в эритроцитах поросят количественно определен уровень холестерина (ХС). По количеству в их мембранах фосфора было выявлено содержание общих фосфолипидов (ОФЛ) [4] с вычислением на основе полученных данных соотношения ОХС/ОФЛ. Уровень возможностей внутриэритроцитарных ферментов антиокисления выявлялся для каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) [8].

Цитоархитектоника эритроцитов поросят определялась путем световой фазовоконтрастной микроскопии в результате их типирования на дискоциты, дискоциты с одним выростом, дискоциты с гребнем, дискоциты с множественными выростами, эритроциты в виде тутовой ягоды, куполообразные эритроциты (стоматоциты), сфероциты с гладкой поверхностью, сфероциты с шипиками на поверхности, эритроциты в виде «спущенного мяча», дегенеративные формы эритроцитов. Первые пять классов эритроцитов (с признаками эхиноцитарной трансформации) считались обратимо деформированными, остальные классы относили к необратимо деформированным формам [3].

На основе полученных количеств обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов рассчитывали следующие индексы [6]:

индекс трансформации

(ИТ) = (ОД + НД)/Д,

где Д - процент дискоцитов; ОД - процент обратимо деформированных эритроцитов; НД - процент необратимо деформированных эритроцитов.

индекс обратимой трансформации (ИОТ) = ОД/Д;

индекс необратимой трансформации (ИНОТ) = НД/Д;

индекс обратимости (ИО) = ОД/НД.

Выраженность агрегации эритроцитов выясняли в ходе световой микроскопии при подсчете в камере Горяева агрегированных и неагрегированных эритроцитов, а также количества эритроцитарных агрегатов во взвеси отмытых красных кровяных телец с последующим расчетом среднего размера агрегата

СРА = СЭА/КА,

где СЭА - сумма всех эритроцитов в агрегате; КА - количество агрегатов.

Также высчитывался показатель агрегации

ПА = (СРА·КА + КСЭ)/(КА + КСЭ),

где КСЭ - количество свободных эритроцитов и процент неагрегированных эритроцитов

ПНА = (КСЭ·100)/(СРА·КА + КСЭ) [6].

Для статистической обработки полученных результатов применен t-критерий Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

В течение фазы молочно-растительного питания у здоровых поросят отмечено постепенное усиление АОА плазмы (с 38,0 ± 0,09% в начале до 42,4 ± 0,09% в ее конце), определяющее понижение активности в ней ПОЛ. Так, количественное содержание в жидкой части крови первичных продуктов АГП составляло в начале фазы 1,30 ± 0,12 Д233/1мл, в ее конце - 1,18 ± 0,08 Д233/1мл, вторичных продуктов пероксидации липидов - ТБК-активных соединений 2,96 ± 0,10 и 2,64 ± 0,05 мкмоль/л, соответственно.

В течение фазы молочно-растительного питания в мембранах эритроцитов у поросят найдено постепенное повышение количества холестерина с 0,91 ± 0,003 до 0,98 ± 0,006 мкмоль/1012 эр. при понижении ОФЛ с 0,70 ± 0,002 до 0,64 ± 0,003 мкмоль/1012эр.

Уровень АГП в эритроцитах здоровых 21-суточных животных составлял 2,83 ± 0,09 Д233/1012эр., постепенно уменьшаясь к 40-суточному возрасту (2,50 ± 0,07 Д233/1012эр.). При этом уровень МДА в эритроцитах также понижался с 0,98 ± 0,04 до 0,82 ± 0,05 нмоль/1012 эр. Отмеченная динамика ПОЛ в эритроцитах здоровых поросят молочно-растительного питания была вызвана усилением их антиоксидантной системы, оцененной по уровню активности каталазы, составившей в начале фазы 11170,0 ± 11,6 и 13980,0 ± 10,3 МЕ/1012эр. в ее конце, и СОД, функциональные возможности которой достигали 1781,3 ± 8,36 МЕ/1012эр. на 21-е сутки жизни и 1923,4 ± 5,22 МЕ/1012эр. на 40-е сутки, соответственно.

У наблюдаемых животных отмечено постепенное снижение в крови количества дискоцитов до 83,3 ± 0,09%, обеспечив к концу фазы повышение уровня ИТ до 0,20 ± 0,004 (таблица). При этом у животных с 21-х до 40-х суток жизни отмечено повышение содержания в крови обратимо измененных эритроцитов до 10,8 ± 0,07% и их необратимо трансформированных форм до 5,9 ± 0,05%. Найденная динамика цитоархитектоники эритроцитов обеспечила у поросят увеличение в течение фазы молочно-растительного питания ИОТ до 0,13 ± 0,005 при достижении ИНОТ 0,07 ± 0,007 и ИО - 1,83 ± 0,009.

При этом у взятых под наблюдение поросят выявлено значимое нарастание агрегационной способности эритроцитов (табл.) с увеличением уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты (на 20,5%), повышение количества этих агрегатов в кровотоке (на 22,7%) при понижении на 8,6% содержания в крови свободно перемещающихся эритроцитов при постоянстве СРА, легком нарастании ПА (до 1,12 ± 0,07) и невыраженном уменьшении ПНА (до 86,3 ± 0,24).

Таким образом, для поросят молочно-растительного питания характерно повышение выраженности изменений цитоархитектоники и усиление агрегации эритроцитов, что, видимо, является необходимым элементом их адаптации к условиям внешней среды в течение третьей фазы их индивидуального развития.

Состояние микрореологических особенностей эритроцитов у здоровых поросят молочно-растительного питания

Параметры

Фаза молочно-растительного питания, n = 39, M ± m

21 сут. жизни

25 сут. жизни

30 сут. жизни

35 сут. жизни

40 сут. жизни

Средние значения

Дискоциты,%

86,2 ± 0,06

85,8 ± 0,05

85,0 ± 0,13

р < 0,05

84,0 ± 0,18

р < 0,05

83,3 ± 0,09

р < 0,05

84,9 ± 0,10

Обратимо изм. эритроциты,%

8,8 ± 0,05

9,0 ± 0,02

9,6 ± 0,04

р < 0,05

10,3 ± 0,09

р < 0,05

10,8 ± 0,07

р < 0,05

9,7 ± 0,05

Необратимо изм. эритроциты,%

5,0 ± 0,03

5,2 ± 0,05

5,4 ± 0,02

р < 0,05

5,7 ± 0,07

р < 0,05

5,9 ± 0,05

р < 0,05

5,4 ± 0,04

Индекс трансформации

0,16 ± 0,006

0,17 ± 0,009

0,18 ± 0,005

0,19 ± 0,003

0,20 ± 0,004

0,16 ± 0,005

Индекс обратимой трансформации

0,10 ± 0,003

0,10 ± 0,004

0,11 ± 0,005

0,12 ± 0,006

0,13 ± 0,005

0,11 ± 0,005

Индекс необратимой трансформации

0,06 ± 0,002

0,06 ± 0,004

0,06 ± 0,007

0,07 ± 0,003

0,07 ± 0,007

0,06 ± 0,005

Индекс обратимости

1,76 ± 0,007

1,73 ± 0,006

1,77 ± 0,004

1,81 ± 0,012

1,83 ± 0,009

1,78 ± 0,008

Сумма всех эритроцитов в агрегате

33,1 ± 0,16

34,8 ± 0,15

р < 0,05

36,5 ± 0,03

р < 0,05

38,7 ± 0,08

р < 0,05

39,9 ± 0,05

р < 0,05

36,6 ± 0,09

Количество агрегатов

7,5 ± 0,06

7,8 ± 0,08

р < 0,05

8,4 ± 0,03

р < 0,01

8,7 ± 0,06

р < 0,05

9,2 ± 0,03

р < 0,05

8,3 ± 0,05

Количество свободных эритроцитов

270,2 ± 0,15

265,4 ± 0,11

р < 0,05

261,5 ± 0,08

р < 0,05

254,3 ± 0,18

р < 0,05

248,7 ± 0,15

р < 0,05

260,0 ± 0,19

Показатель агрегации

1,09 ± 0,02

1,10 ± 0,06

1,10 ± 0,05

1,11 ± 0,03

1,12 ± 0,07

1,10 ± 0,05

Процент не агрегированных эритроцитов

89,1 ± 0,15

88,3 ± 0,12

р < 0,05

87,9 ± 0,16

р < 0,05

86,9 ± 0,19

р < 0,05

86,3 ± 0,24

87,7 ± 0,17

Средний размер агрегата, клеток

4,4 ± 0,03

4,5 ± 0,02

4,3 ± 0,04

4,4 ± 0,03

4,3 ± 0,04

4,4 ± 0,03

Условные обозначения: р - достоверность возрастной динамики учитываемых показателей.

Течение всего онтогенеза у продуктивных животных характеризуется изменениями микрореологических особенностей их форменных элементов, что неизбежно влияет на общие реологические свойства крови [7]. Нарастающая у поросят молочно-растительного питания активность ферментов антиокисления эритроцитов способствует стабилизации на невысоком уровне процессов ПОЛ, что в сочетании с небольшим повышением содержания в их мембранах ХС обеспечивает оптимальные для любых экологических условий микрореологические характеристики эритроцитов. Несомненно, это является физиологической основой поддержания в кровотоке у поросят оптимального уровня обратимо и необратимо измененных разновидностей эритроцитов при стойком превалировании их неизмененных форм, обеспечивая наилучшие реологические свойства крови, достаточную перфузию внутренних органов и, в этой связи, оптимальность процесса роста животного.

Выявленное в исследовании постепенное усиление агрегации эритроцитов у поросят в течение фазы молочно-растительного питания во многом связано с возрастным изменением заряда эритроцитов, вследствие динамики числа отрицательно заряженных протеинов [6] на фоне выявленного в них увеличения количества ХС. Это неизбежно повышает силу сцепления данных белков эритроцитарной мембраны с глобулярными протеинами плазмы, выполняющими роль «мостиков» между отдельными красными кровяными тельцами в агрегатах.

Найденные микрореологические свойства эритроцитов у поросят молочно-растительного питания во многом обеспечивают необходимые для данного этапа онтогенеза жидкостные свойства крови и, тем самым, достаточную перфузию внутренних органов. Это помогает поддерживать у них необходимый для организма обмен в клетках, способствуя дальнейшему росту и развитию животного. Очевидно, что выявленные особенности цитоархитектоники и агрегации эритроцитов поросят молочно-растительного питания в значительной мере обеспечивают переход организма на питание только растительными кормами.

Заключение

У здоровых поросят молочно-растительного питания отмечается оптимальный липидный состав эритроцитов и невысокая активность в них перекисного окисления липидов при некотором повышении агрегации эритроцитов и увеличении в их крови содержания обратимо и необратимо измененных эритроцитов на фоне понижения количества дискоцитов.

Рецензенты:

  • Грушкин А.Г., д.б.н., профессор кафедры ветеринарии и физиологии животных Калужского филиала РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева, г. Калуга;
  • Фурман Ю.В., д.б.н., профессор, декан факультета социальной работы, педагогики и психологии Курского института социального образования (филиал) РГСУ, г. Курск.

Работа поступила в редакцию 25.07.2012.


Библиографическая ссылка

Медведев И.Н., Парахневич А.В. АГРЕГАЦИОННЫЕ И ЦИТОАРХИТЕКТОНИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТОВ У ПОРОСЯТ В ТЕЧЕНИЕ ФАЗЫ МОЛОЧНО-РАСТИТЕЛЬНОГО ПИТАНИЯ // Фундаментальные исследования. – 2012. – № 9-3. – С. 573-576;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=30311 (дата обращения: 21.11.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074