Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,074

ИЗМЕНЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА В ГЕПАТОЦИТАХ КРЫС НА 3 СУТКИ ПОСЛЕ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ

Красовский В.С. 1
1 ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия»
В ходе исследования выявлено колебание общего белка в гепатоцитах крыс в норме и в результате механической травматизации животного. После любого повреждения печени происходит компенсаторная регенерация с образованием новых клеточных элементов путем митотического деления оставшихся. Это весьма энергозатратный процесс, поэтому происходит резкий скачок белка в гепатоцитах печени. В ходе исследования установлена закономерность колебаний общего белка в двух исследуемых группах. Отмечено уменьшение метаболической активности работы гепатоцитов в норме у крыс, которое наблюдается в 12 часов. Выявлено, что в 12 часов начинается активация синтетических процессов в гепатоцитах, к 23 часам содержание общего белка становится максимальным. Под действием стрессового фактора, механической травматизации наблюдается смещение циркадианных колебаний общего белка в гепатоцитах печени крыс. Регенеративные процессы протекают быстрее, если травматизация органа осуществлялась в момент его гиперактивности.
печень
механическая травма
регенерация
общий белок
1. Борисов А.Е., Кубачев К.Г., Мухуддинов Н.Д. Диагностика и хирургическое лечение изолированных и сочетанных травматических повреждений печени // Вестник хирургии. – 2007. – № 4. – С. 35–39.
2. Булынин В.И., Пархисенко Ю.А., Глухов А.А., Солод Н.В., Мошуров И.П. К технике резекции печени // Вестник хирургии. – 1996. – № 1. – С. 86–88.
3. Кошелев В.Н., Чалык Ю.В. Причины летальности при повреждении печени и селезенки // Вестник хирургии. – 1996. – № 2. – С. 51–53.
4. Чирков Р.Н., Васютков В.Я., Шабанов Ю.А. Диагностика и хирургическое лечение повреждений печени // Хирургия. – 2006. – № 4. – С. 42–45.
5. Шахназаров С.Р. Повреждение печени // Вестник хирургии. – 1996. – № 6. – С. 97–99.

Актуальность исследований регенеративных процессов печени с каждым годом не теряет своего значения. Связано это, прежде всего, с высокими цифрами травматизации органа и послеоперационной летальностью.

Частота повреждения печени колеблется от 8,2 до 56 % от всех травм брюшной полости [4, 5], а послеоперационная летальность при обширных резекциях печени в среднем составляет от 9 до 33 %, а при правосторонних гемигепатэктомиях может достичь 50 % [2].

Летальность при закрытых повреждениях живота может достигать до 56–78 % [3].

Трудность диагностики обусловлена тяжестью состояния пострадавших, совокупностью сочетанных повреждений, шоком и большой кровопотерей [1].

После травматизации печени происходит её компенсаторная регенерация с образованием новых клеточных элементов путем митотического деления оставшихся. Это весьма энергозатратный процесс, поэтому происходит резкий скачок белка в гепатоцитах печени.

Именно исследование общего белка позволяет более правильно оценить функциональное состояние органа в целом, и, как следствие, правильно построить в дальнейшем лечебно-восстановительный процесс.

Цель исследования ‒ определить циркадианные колебания общего белка в гепатоцитах печени крыс на 3-и сутки после механической травмы органа.

Метод и материалы исследования

Объектом исследования послужили 48 беспородных крыс средним весом 180 грамм, в возрасте 90 суток. Все животные содержались в стандартных условиях вивария, отдельно друг от друга, с правильно сбалансированным питанием. Каждое животное выводили из эксперимента в первые минуты каждого часа.

Животные были разделены на 2 группы:

1) контрольная группа – исследование циркадианных колебаний общего белка в гепатоцитах печени (24 крысы – самцы);

2) экспериментальная группа – исследование циркадианных колебаний общего белка в гепатоцитах печени после механической травмы (24 крысы – самцы).

Животное помещали в специализированную камеру, вводили в медикаментозный сон, после чего приступали к эксперименту.

В качестве анестезирующего вещества использовали раствор хлороформа в дозе 1 мл/180 гр.

Протокол эксперимента был составлен в соответствии с принципами биоэтики, правилами лабораторной практики (GLP); с приказом МЗ РФ № 267 от 19.06.2003, «Об утверждении правил лабораторной практики» (Минздрав ССР № 755 от 12.08.1977).

У каждого выведенного из эксперимента лабораторного животного брали исследуемый орган для изготовления гистологических микропрепаратов. Микропрепараты изготавливали с помощью микротома МЗ-2. После получения гистологических срезов проводилась их окраска. Использовались методы окраски гематоксилином и эозином и окраска прочным зеленым при pH 2,2.

Животным экспериментальной группы проводилась механическая травматизация органа типичный (анатомический) методом резекции: срединная лапаротомия. После обработки зоны резекции послойно разрезали кожу, брюшину, и, обнажив орган, проводили механическую травму.

Повреждение органа осуществлялась скальпелем. Разрез проводили в V сегменте печени длиной 10 мм, глубиной 4 мм.

Далее на печень накладывали узловые швы и послойно зашивали ткани.

Выведение животных из эксперимента осуществлялось на 3 сутки после механической травматизации аналогичным путем, что и контрольная группа.

Количественное определение белка в контрольной и экспериментальной группе проводилось с помощью комплекса «Морфолог». Определение концентрации белка проводилось в 300 гепатоцитах в цитоплазме клетки.

Материалы обрабатывались на персональном компьютере с помощью программ «Microsoft Office Windows 2007», «Microsoft Office Excel 2007».

Результаты исследования и их обсуждение

В ходе исследования выявлены следующие колебания общего белка (таблица).

Анализируя табл. 1, можно увидеть четкую обратно пропорциональную зависимость между группами. Min значение общего белка в контрольной группе приходится на 12 часов и составляет 4220 ± 10 усл. ед. В экспериментальной группе в это время наблюдается пик активности max значение 7389 ± 19 усл. ед. В 23 часа в контрольной группе наблюдается max значение, оно составляет 4831 ± 12 усл. ед., в экспериментальной группе наблюдается min в 24 часа – 6264 ± 11 усл. ед.

Вероятнее всего, так как крысы являются по свой природе ночными животными, поэтому пик активности общего белка приходится именно в эти часы. Регенеративные процессы в эти часы будут протекать более быстро, чем у животных, получивших механическую травму печени в дневные часы.

Можно предположить, что у людей процесс более благоприятного послеоперационого течения будет наблюдаться у пациентов, у которых операция проводилась в дневные часы.

Колебания общего белка в гепатоцитах печени самцов крыс в зависимости от времени суток (в усл. ед.)

Время суток, часы

Количество белка, усл. ед.

Контрольная группа

Экспериментальная группа

00.00

4801 ± 16

6264 ± 11

01.00

4757 ± 13

6319 ± 07

02.00

4698 ± 24

6412 ± 07

03.00

4649 ± 07

6499 ± 13

04.00

4602 ± 10

6557 ± 15

05.00

4579 ± 11

6647 ± 11

06.00

4546 ± 10

6701 ± 07

07.00

4493 ± 15

6777 ± 24

08.00

4451 ± 13

6825 ± 13

09.00

4404 ± 08

6978 ± 19

10.00

4364 ± 11

7034 ± 15

11.00

4321 ± 16

7294 ± 17

12.00

4220 ± 10

7389 ± 19

13.00

4349 ± 15

7263 ± 16

14.00

4420 ± 13

7088 ± 09

15.00

4499 ± 10

7001 ± 11

16.00

4529 ± 12

6924 ± 12

17.00

4566 ± 09

6853 ± 17

18.00

4604 ± 17

6750 ± 13

19.00

4648 ± 18

6661 ± 10

20.00

4708 ± 05

6584 ± 14

21.00

4734 ± 15

6493 ± 19

22.00

4761 ± 13

6412 ± 16

23.00

4831 ± 12

6303 ± 17

На гистограмме (рисунок) отчетливо видно снижение общего белка в цитоплазме гепатоцитов к 12 часам, у контрольной группы и рост показателей ‒ в экспериментальной.

Приблизительно равные средние значения общего белка в контрольной группе наблюдается в 4 и 18 часов и составляют 4602 ± 10 и 4604 ± 17 усл. ед. соответственно, а также в 7 и 15 часов – 4493 ± 15 и 4499 ± 10 усл. ед. соответственно. В экспериментальной группе почти равные значения наблюдаются в 3 и 21 час и составляют 6499 ± 13 и 6493 ± 19 усл. ед., соответственно. Абсолютно равное значение соответствует 2 и 22 часам и составляет 6412 усл. ед.

Изучая рисунок, видно, что в среднем за один час количество общего белка в контрольной группе изменяется на 51 усл. ед., однако между 4 и 5 часами утра зафиксировано минимальное изменение соотношения общего белка, оно составляет 23 усл. ед. Довольно высокое изменение показательней характерно перед минимальным значением в 12 часов и составляет между 11 и 12 часами 101 усл. ед. и между 12 и 13 часами – 129 усл. ед. Также можно наблюдать 2 скачка показателей между 13 и 14 часами на 79 усл. ед., и перед и после максимального значения между 22 и 23 часами и – между 23 и 0 часами – изменение на 70 усл. ед.

pic_4.tif

Изменение количества общего белка в гепатоцитах печени крыс на 3 сутки после механической травмы в сравнении с нормой

В экспериментальной группе замечено, что в среднем за один час количество общего белка изменялось на 93 усл. ед., max значение наблюдается между 10 и 11 часами и составляет 260 усл. ед., min значение соответствует промежутку времени между 23 и 24 часами и составляет 39 усл. ед.

Выводы

Таким образом, можно отметить, что уменьшение метаболической активности работы гепатоцитов в норме у крыс наблюдается к 12 часам.

После 12 часов начинается активация синтетических процессов в гепатоцитах, к 23 часам содержание общего белка становится максимальным.

Под действием стрессового фактора, механической травматизации наблюдается смещение циркадианных колебаний общего белка в гепатоцитах печени крыс.

Регенеративные процессы протекают быстрее, если травматизация органа осуществлялась в момент его гиперактивности.

Рецензенты:

Сентюрова Л.Г., д.м.н., зав. кафедрой биологии, ГБОУ ВПО «Астраханская государственная медицинская академия», г. Астрахань;

Ермолаев Д.О., д.м.н., профессор кафедры уголовно-правовых дисциплин, Астраханский филиал ФГБОУ ВПО «Саратовская государственная юридическая академия», г. Астрахань.

Работа поступила в редакцию 19.07.2013.


Библиографическая ссылка

Красовский В.С. ИЗМЕНЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА В ГЕПАТОЦИТАХ КРЫС НА 3 СУТКИ ПОСЛЕ МЕХАНИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 9-1. – С. 62-64;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32178 (дата обращения: 14.11.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074