Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,222

ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА СЛЮНЫ ПРИ ПАТОЛОГИИ АДЕНОТОНЗИЛЛЯРНОЙ СИСТЕМЫ У ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ

Фурманова Е.А. 1 Нагаева Т.А. 1 Балашева И.И. 1 Пономарева Д.А. 1 Басарева Н.И. 1
1 ГБОУ ВПО «Сибирский Государственный Медицинский Университет Минздрава России»
В данной статье представлены результаты исследования иммуноцитокинового статуса 100 дошкольников в возрасте 4–6 лет, относящихся к группе часто болеющих детей (40 детей с хроническими заболеваниями аденотонзиллярной системы, 45 детей с гипертрофией лимфоидной ткани носоглотки, 15 часто болеющих детей без аденотонзиллярной патологии), и 20 дошкольников контрольной группы. Выявлено, что часто болеющие дети с патологией аденотонзиллярной системы имеют высокий уровень герпесвирусной инфицированности, преимущественно цитомегаловирусной инфекцией. С помощью метода иммуноферментного анализа проведена оценка содержания провоспалительных цитокинов – интерлейкина 17 (IL-17) и интерлейкина 8 (IL-8) в слюне детей. Показано возрастание уровня IL-17 в группе детей с хронической патологией аденотонзиллярной системы и у детей с гипертрофией небных и глоточной миндалин. Оценка локального уровня IL-17 в зависимости от типа гипертрофии лимфоидной ткани носоглотки позволила установить особенно существенное его возрастание у детей со смешанной формой гипертрофии, что может свидетельствовать о высоком риске хронизации. Наиболее высокие показатели IL-17 зафиксированы в слюне детей с сочетанной хронической патологией аденотонзиллярной системы. Средний уровень IL-8 в слюне у детей с хроническими поражениями аденотонзиллярной системы и гипертрофией лимфоидной ткани носоглотки достоверно превышал контрольные цифры. Оценка локального уровня IL-8 в позволила установить особенно существенное его возрастание при смешанной форме гипертрофии. Наиболее высокие показатели зафиксированы в слюне детей с хроническим аденоидитом.
интерлейкин-17
интерлейкин-8
часто болеющие дети
аденотонзиллярная система
1. Альбицкий В.Ю., Баранов А.А., Камаев И.А., Огнева М.Л. Часто болеющие дети. – Н. Новгород: НГМА, 2003. – 180 с.
2. Асмалова А.М. Состояние системного и местного иммунитета у часто болеющих детей с патологией ЛОР-органов: автореф. … дис. кан. мед. наук. – Оренбург. 2007. – 25 с.
3. Закирова Л.М., Нагаева Т.А., Балашева И.И., Пономарева Д.А. Комплексная оценка состояния здоровья первоклассников в процессе адаптации к обучению в образовательных учреждениях «нового типа» // Бюллетень Сибирской медицины. – 2012. – №1. – С. 206 – 211.
4. Коровина Н.А. Часто и длительно болеющие дети: терминология, патофизиология, терапевтические подходы // Опыт применения рибомунила в российской педиатрической практике. – М., 2002. – С. 7-17.
5. Кетлинский С.А. Th17 – новая линия дифференцировки Т-хелперов: обзор данных // Цитокины и воспаление. – 2009. – Т. 8, № 2. – С. 315
6. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С. Цитокины. – СПб.: Фолиант, 2008. – С. 552
7. Карпова Н.В. Состояние иммунной и цитокиновой систем у ЧБД и методы коррекции выявленных нарушений: автореф. … дис. канд. мед. наук. – М., 2008. – 23 с.
8. Коробкина А.Г. Состояние мукозального и адаптивного иммунитета у часто болеющих детей с маркерами цитомегаловирусной и Эпштейн-Барр-вирусной инфекцией и их прогностическая значимость: автореф. … дис. канд. мед. наук. – Екатеринбург, 2009. – 19 с.
9. Мещерякова К.Л., Якушенкова А.П. Оценка изменений показателей гуморального иммунитета у детей с хронической патологией лимфоидного кольца глотки // Российская ринология. – 2008. – № 2. – С. 64.
10. Насибулин Б.А. Корреляты изменений клеточного состава жидкости полости рта у больных с разной патологией глотки и показателей активности иммунной системы // Экспериментальная и клиническая медицина. – 2013. – №2. – С.110-114.
11. Оториноларингология. Национальное руководство. Краткое издание. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. – С. 682-724.
12. Пономарева Л.И. Формирование здоровья ЧБД дошкольного и младшего школьного возраста с различными состояниями лимфоидной ткани носоглотки: автореф. … дис. канд. мед. наук. – Смоленск, 2012. – 47 с.
13. Плужников М.С., Левин М.Я. Мукозальная иммунная система // Новые Санкт-Петербургские врачебные ведомости. – 2005. – №4. – С. 41-43.
14. Brandtzaeg P. Immune functions of nasopharyngeal lymphoid tissue // Adv. Otorhinolaryngol. – 2011. № 72. – Р. 20-24.
15. Bettelli E. Th17: the third member of effector T-cell Trilogy // Immunol. – 2007. – Vol. 19, № 6. – P. 652-657.
16. Jones C.E., Chan K. Interleukin-17 stimulates the expression of interleukin-8, growth-related oncogene-alpha, and granulocyte-colony-stimulating factor by human airway epithelial cells // Am J Respir Cell Mol Biol. – 2002. № 26 – Р.748-753.

Проблема часто и длительно болеющих детей (ЧБД) остается одной из актуальных в детском здравоохранении [1]. Число детей, подверженных частым острым респираторным инфекциям (ОРИ), по данным разных авторов, колеблется от 15 % до 75 % [4,10,12]. Высокая частота ОРИ сопровождается многочисленными неблагоприятными последствиями для организма ребенка, является фактором риска формирования хронической патологии, особенно в области лимфоэпителиальной глоточной системы [12,14]. Известно, что в группе ЧБД более половины имеют гипертрофию лимфоидной ткани носоглотки, а число больных хроническим тонзиллитом может достигать 40 % и более [10].

Отечественными и зарубежными авторами накоплен обширный материал, касающийся изучения генеза иммунных дисфункций у ЧБД [2,3,7]. Вместе с тем, исследований, отражающих особенности иммуноцитокинового статуса слюны в этой диспансерной группе, явно недостаточно.

Согласно современной терминологии, миндалины и аденоиды представляют собой так называемую «ассоциированную с носом лимфоидную ткань» (NALT) и являются первой линией защиты слизистых оболочек от микроорганизмов [13]. В фолликулах с зародышевыми центрами проходят начальные этапы формирования антиген-специфичных лимфоцитов, в эффекторных зонах слизистой оболочки развертывается целый спектр иммунных реакций, происходит выделение цитокинов, секреторных иммуноглобулинов (IgA) и пр. [13]. Выявлены существенные изменения иммуноцитокинового статуса секрета ротоглотки, в частности, у больных хроническим тонзиллитом и после тонзилэктомии [9]. Параллельно в сыворотке крови возрастает содержание провоспалительных цитокинов, фактора миграции макрофагов, наблюдаются фазные изменения содержания иммуноглобулинов [10]. В ряде работ показано возрастание уровня интерлейкина-8 (IL-8) в очаге острого и хронического воспалительного процесса, что может быть результатом действия микроорганизмов, тропных к лимфоидной ткани, в том числе герпесвирусов, которые запускают механизм апоптоза лимфоцитов и активацию генов многих медиаторов воспаления [2,6,8]. В настоящее время все большее внимание уделяется изучению провоспалительной роли интерлейкина-17 (IL-17), открытого сравнительно недавно, который также обнаруживается в очаге хронического воспаления и, по-видимому, принимает участие в его формировании [5]. Доказана значимость данного цитокина в развитии аутоиммунных болезней, туберкулеза, онкопатологии у детей [15].

С учетом вышеизложенного, дальнейшее изучение особенностей иммуноцитокинового статуса слюны ЧБД с патологией аденотонзиллярной системы представляет несомненный научный интерес.

Цель исследования. Оценить содержание IL-17 и IL-8 в слюне ЧБД с гипертрофией лимфоидной ткани носоглотки и хроническими заболеваниями аденотонзиллярной системы.

Материал и методы исследования

Обследовано 100 детей в возрасте 4–6 лет, страдающих рецидивирующими ОРИ (основная группа), из которых 40 детей имели хронические заболевания аденотонзиллярной системы (1 группа), 45 детей – гипертрофию лимфоидной ткани носоглотки (2 группа), 15 детей относились к группе ЧБД без патологии ЛОР-органов (3 группа). Критерием включения в исследование явилось отсутствие хронических заболеваний (у детей 2 и 3 групп наблюдения) либо хронических заболеваний со стороны других систем (у детей 1 группы наблюдения), а также отсутствие проявлений атопии у дошкольников. В группу контроля включены 20 здоровых детей, сопоставимых по полу и возрасту с детьми основной группы. Все дети посещали детские дошкольные учреждения (МДОУ №57 и №13 г. Томска) более 2-х лет, находились под наблюдением в поликлиническом отделении №4 ОГАУЗ ДБ №2 г. Томска и проживали на одной прикрепленной к участку территории.

Всем детям проведены клинико-анамнестические, оторинологические, общелабораторные, серологические, иммунологические методы исследования. Наличие специфических иммуноглобулинов (Ig) класса M и G к герпесвирусной инфекции (ГВИ) определялось иммуноферментным анализом (ИФА) сыворотки крови. Определение уровней IL-17, IL-8 в слюне осуществляли с помощью специфических реактивов фирмы ЗАО «Вектор-Бест» (Россия) методом сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. Забор слюны для исследования уровня цитокинов (IL-17, IL-8) проводился в период ремиссии между ОРИ (не менее 1 месяца), вне обострения заболевания.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью интегрированного пакета программ «STATISTICA for Windows 6,0». Данные представлены в виде медианы (Ме) и квартилей (Q1-Q3). Достоверность различий между двумя средними оценивалась по непараметрическому U-критерию Манна-Уитни. Для сравнительной оценки частот в группах использовали критерий c χ2. Различия между средними величинами в сравниваемых группах считались достоверными при p<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

В результате проведенного исследования показано, что в структуре патологии аденотонзиллярной системы у детей 1 группы преобладает хронический тонзиллит, выявленный у 17 (42,5 %) детей; хронический аденоидит отмечается у 11 (27,5 %) детей, и 12 (30 %) детей имеют сочетанную форму патологии. Во второй группе наблюдения выявлено 20 (45 %) детей с гипертрофией аденоидов I–II степени, 12 (26 %) детей с гипертрофией небных миндалин I–II степени, 13 (29 %) детей со смешанной формой гипертрофии лимфоидной ткани.

По результатам ИФА специфических антител IgM к ГВИ у детей обследуемых групп обнаружено не было. У 95 % детей с рецидивирующими ОРИ и патологией аденотонзиллярной системы обнаружены специфические антитела IgG к ГВИ, из них у 79 % детей – к цитомегаловирусу (ЦМВ), у 16 % детей – к другим типам ГВИ. У детей контрольной группы возбудители семейства герпес-вирусов обнаружены не были. Полученные данные согласуются с результатами других исследований и подтверждают ведущую роль ГВИ в этиологии частой респираторной заболеваемости и хронической патологии дыхательных путей.

Анализ содержания IL-17 в слюне ЧБД показал достоверно значимое (р<0,001) увеличение его уровня как в группе детей с хронической патологией аденотонзиллярной системы, так и у детей с гипертрофией небных и глоточной миндалин (табл.1). При этом у детей без патологии ЛОР-органов (3 группа) содержание данного цитокина в слюне так же достоверно значимо (р<0,001) отличалось от контрольных цифр. Наиболее высокие значения уровня IL-17 отмечались в 1 группе детей.

Таблица 1

Уровень цитокинов в слюне детей (пг/мл) , Me (Q1-Q3)

Показатель

1 группа (n=40)

2 группа (n=45)

3 группа (n=15)

Контрольная группа (n=20)

ИЛ-17

6,9 (3,2-8,3)

р¹<0,001

р²<0,001

р³<0,001

3,5 (1,7-5,7)

р¹<0,001

р²<0,001

0,5 (0,1-0,7)

р¹=0,02

0,1 (0,1-0,9)

ИЛ-8

1,2 (0,7-1,8)

р¹=0,02

1,2 (0,6-1,6)

р¹=0,04

0,9 (0,6-1,7)

1,0 (0,8-1,0)

Примечание: р¹ – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с контрольной группой;

р² – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с 3 группой;

р³ – достигнутый уровень значимости различий в сравнении со 2 группой.

Оценка локального уровня IL-17 в зависимости от типа гипертрофии лимфоидной ткани носоглотки позволила установить существенное его возрастание при смешанной форме гипертрофии, достоверно превышающее значения данного показателя не только у детей контрольной и третьей групп (р<0,001), но и у детей с изолированной гипертрофией аденоидов I-II степени (р<0,01) (табл.2).

Таблица 2

Уровень цитокинов в слюне детей (пг/мл), в зависимости от формы патологии ЛОР-органов, Me (Q1-Q3)

Показатель

Гипертрофия

аденоидов

1-2 степени

(n=20)

Гипертрофия

миндалин

1-2 степени

(n=12)

Смешанная

форма

гипертрофии

(n=13)

Хронический аденоидит

(n=11)

Хронический тонзиллит

(n=17)

Смешанная

форма

хронической

патологии (n=12)

3 группа

(n=15)

Контрольная

группа

(n=20)

IL-17

1,8 (1,5-2,5)

р¹<0,001

р2=0,002

р3=0,005

р4=0,002

р5<0,001

4,6 (1,8-6,2)

р¹<0,001

р5<0,001

5,4 (3,8-5,9)

р¹<0,001

р5<0,001

5,7 (2,9-8,2)

р¹<0,001

р5<0,001

6,9 (3,1-9,7)

р¹<0,001

р5<0,001

7,3 (4,0-8,0)

р¹<0,001

р5<0,001

0,5(0,1-0,7)

р¹=0,02

0,1 (0,1-0,9)

IL-8

1,2 (0,5-1,7)

1,1 (0,6-1,4)

р6=0,048

1,4 (1,0-1,9)

р¹=0,018

1,6 (1,0-2,3)

р¹=0,004

1,0 (0,7-1,5)

1,1 (0,7-1,8)

0,9 (0,6-1,7)

1,0 (0,8-1,0)

Примечание: р¹ – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с контрольной группой; р2 – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с группой детей со смешанной формой гипертрофии лимфоидной ткани; р3 – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с группой детей с хроническим тонзиллитом; р4 – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с группой детей со смешанной формой хронической патологии; р5 – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с 3 группой; р6 – достигнутый уровень значимости различий в сравнении с группой детей с хроническим аденоидитом.

При сравнительном анализе содержания IL-17 зависимости от формы хронической патологии носоглотки максимально высокие его значения – 7,3 пг/мл зафиксированы в слюне детей с сочетанной хронической патологией аденотонзиллярной системы, достоверно отличающиеся от соответствующих показателей в контрольной группе и у детей в группе сравнения (р<0,001). Показано, что у детей с гипертрофией аденоидов содержание IL-17 было достоверно ниже в сопоставлении с группами детей со смешанной формой гипертрофии лимфоидной ткани, хроническим тонзиллитом и смешанной формой хронической патологии.

Известно, что главная функция IL-17 – провоспалительная и состоит в вовлечении в воспалительную реакцию большого количества различных клеток за счет индукции экспрессии многих цитокинов, хемокинов, металлопротеиназ. Важную роль IL-17 играет в рекрутировании, активации и миграции нейтрофилов [5,16]. Если в спокойном состоянии постоянная продукция небольшого количества IL-17 способствует укреплению эпителиального барьера за счет синтеза дефенсинов и уменьшению бактериальной колонизации слизистых оболочек носоглотки, то при нарушении иммунного ответа активированные дендритные клетки начинают продуцировать большое его количество, что, в свою очередь, стимулирует синтез других провоспалительных молекул [15]. Полученные нами результаты могут указывать на индукцию иммунного ответа в очагах хронической инфекции носоглотки и существенную активацию воспалительного процесса, обусловленную, в том числе, персистирующей ГВИ.

Установлено, что IL-8 является мощным медиатором воспаления, относится к группе хемокинов и продуцируется многими клетками под воздействием бактериальных эндотоксинов и цитокинов [6]. Кроме того, IL-8 участвует в создании градиента для хемотаксиса фагоцитирующих клеток, обладает способностью вызывать появление в клетках эндотелия специфических рецепторов, которые реагируют с моноцитами, нейтрофилами и останавливают эти клетки в капиллярах, расположенных в районах воспаления [6]. Нами показано, что средний уровень IL-8 в слюне у детей с хроническими поражениями аденотонзиллярной патологией и гипертрофией лимфоидной ткани носоглотки достоверно превышал контрольные цифры (табл. 1). Оценка локального уровня IL-8 в зависимости от типа гипертрофии лимфоидной ткани носоглотки позволила установить особенно существенное его возрастание до 1,4 пг/мл при смешанной форме по сравнению с таковым у детей контрольной группы (р<0,05) (табл.2). Не выявлено статистически значимых различий в содержании IL-8 в зависимости от формы хронической патологии носоглотки. Вместе с тем, наиболее высокие показатели содержания IL-8 зафиксированы в слюне детей с хроническим аденоидитом, что имело достоверные различия по сравнению с детьми группы контроля. Данный факт может свидетельствовать о значительной тропности ГВИ к лимфоидной ткани глоточной миндалины, усиливая выработку трансформирующего фактора роста b, угнетая механизмы апоптоза лимфоцитов, что приводит к выраженной гипертрофии лимфоидной ткани и, как следствие, долгого персистирования, хронизации процесса [7].

Таким образом, можно предположить, что по мере ухудшения состояния лимфоидного кольца у ЧБД происходят существенные изменения состояния иммуноцитокинового профиля слюны. Нарушения мукозального иммунитета являются свидетельством истощения адаптационно-приспособительных механизмов слизистых оболочек рта и носа, снижения их резистентности и противомикробной защиты, обусловливающих персистирующие течение воспалительного процесса в носоглотке.

Выводы

  1. Часто болеющие дети с патологией аденотонзиллярной системы имеют высокий уровень герпесвирусной инфицированности, преимущественно ЦМВ-инфекцией, что может указывать на участие этих патогенов в поддержании хронического воспалительного процесса.
  2. Высокий локальный уровень IL-17 у ЧБД с гипертрофией лимфоидной ткани носоглотки и хроническими заболеваниями аденотонзиллярной системы дает основание предположить его важную провоспалительную роль в системе мукозального иммунитета и формировании хронических очагов инфекции ЛОР-органов. Значительное возрастание содержания IL-17 у ЧБД со смешанной формой гипертрофии лимфоидной ткани носоглотки свидетельствует о высоком риске хронизации, а при наличии у детей сочетанной хронической патологии лимфоидной ткани носоглотки, рецидивирующего течения патологического процесса.
  3. Повышенный уровень IL-8 при патологии аденотонзиллярной системы может служить диагностическим маркером для оценки течения воспалительного процесса в данной группе ЧБД.

Рецензенты:

Желев В.А., д.м.н., профессор кафедры госпитальной педиатрии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России, г. Томск;

Михалев Е.В., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой педиатрии ФПК и ППС ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России, г. Томск.

Работа поступила в редакцию 24.06.2014.


Библиографическая ссылка

Фурманова Е.А., Нагаева Т.А., Балашева И.И., Пономарева Д.А., Басарева Н.И. ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА СЛЮНЫ ПРИ ПАТОЛОГИИ АДЕНОТОНЗИЛЛЯРНОЙ СИСТЕМЫ У ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ // Фундаментальные исследования. – 2014. – № 7-4. – С. 798-802;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=34985 (дата обращения: 22.07.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252