Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,074

РЕФЕРЕНСНЫЕ ИНТЕРВАЛЫ ЛЕЙКОЦИТОВ У ДЕТЕЙ ПЕРВОГО ГОДА ЖИЗНИ

Зиновьева А.В. 1 Кузьмина О.В. 2 Никулина Е.Г. 1
1 БУ ВО ХМАО-Югры «Ханты-Мансийская государственная медицинская академия»
2 БУ ХМАО-Югры Окружная клиническая больница
Актуальность проблемы. Промышленное освоение территорий Тюменской области привело к строительству новых городов и поселков, значительную часть населения которых составляют дети. Дети, родившиеся на Севере, – особая часть популяции. Они не обладают теми наследственными качествами, которые присущи коренным жителям, чьи приспособительные механизмы к экологическим условиям Крайнего Севера формировались на протяжении многих поколений. Для повышения информативности и достоверности лабораторных тестов необходима разработка точных педиатрических референсных интервалов, которые смогут выполнять роль стандарта при сравнении с результатами исследования пациентов. Пробелы в существующих педиатрических референсных интервалах могут привести к неверной трактовке полученных результатов и постановке ошибочного диагноза [2, 4, 9]. В настоящей работе с помощью автоматического гематологического анализатора мы исследовали количество лейкоцитов у здоровых детей в возрасте от 2 до 12 месяцев, определили референсные интервалы с помощью современных международных рекомендаций и их в зависимости от возраста и пола.
клинический анализ крови
референсные интервалы
лейкоциты
здоровые дети
современные методы
1. ГОСТ Р 53022.3-2008. Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству лабораторных исследований. Правила оценки клинической эффективности лабораторных тестов. – М., 2008. – С. 2–23.
2. Джанг Б. Референснсные интервалы лабораторных исследований в педиатрии : проект КАЛИПЕР / Б. Джанг, Х. Адели // Вопросы диагностики в педиатрии. – 2009. – № 3. – С. 6–13.
3. Казакова М.С. Референсные значения показателей общего анализа крови взрослого работающего населения / М.С. Казакова, С.А. Луговская, В.В. Долгов // Клиническая лабораторная диагностика. – 2012. – № 6. – С. 43–49.
4. Кишкун А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики / А.А. Кишкун. – Москва, 2007. – С. 1–30.
5. Референсные интервалы лейкоцитов и тромбоцитов у детей, полученные с помощью автоматического гематологического анализатора / Н.А. Маянский, А.С. Балабанов, Е.А. Копыльцова, [и др.] // Вопросы диагностики в педиатрии. – 2011. – № 6. – С. 5–10.
6. Справочник педиатра : справочное руководство / под ред. Н.П. Шабалова. – Санкт-Петербург : Питер, 2005. – 644 с.
7. Bellamy G.J. Total and differential leucocyte counts in infants at 2, 5 and 13 months of age / G.J. Bellamy, R.F. Hinchliffe, K.C. Crawshaw, A. Finn, F. Bell // Clininical Laboratory Haematology. – 2000. – Apr 22(2). – Р. 81–87.
8. Clinical and Laboratory Standars Institute (CLSI). Defining, Establishing, and Verifing Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline – Third Edition CLSI document. – 2008. – P. 71–76.
9. Jung B. Clinical laboratory reference intervals in pediatrics: The CALIPER initiative / B. Jung, K. Adeli // Clinical Biochemistry. – 2009. – № 42. – P. 1589–1595.
10. Ozyürek E. Complete blood count parameters for healthy, small-for-gestational-age, full-term newborns / E. Ozyürek, S. Cetintaş, T. Ceylan, [etc.] // Clininical Laboratory Haematology. – 2006. – Apr. 28 (2). – С. 97–104.

Актуальность проблемы. Промышленное освоение территорий Тюменской области привело к строительству новых городов и поселков, значительную часть населения которых составляют дети. Дети, родившиеся на Севере, – особая часть популяции. Они не обладают теми наследственными качествами, которые присущи коренным жителям, чьи приспособительные механизмы к экологическим условиям Крайнего Севера формировались на протяжении многих поколений.

Клинический анализ крови входит в перечень обязательных исследований при проведении профилактических осмотров детей. На основе его параметров и в сравнении с референсными интервалами (РИ) делается вывод о состоянии ребенка, принимается определенное клиническое решение.

Соответственно для повышения информативности и достоверности лабораторных тестов необходима разработка точных педиатрических РИ, которые смогут выполнять роль стандарта при сравнении с результатами исследования пациентов.

К сожалению, большинство РИ лабораторных анализов были установлены более трех десятилетий тому назад, при помощи аналитических технологий, которые во многом уже устарели и не могут считаться актуальными с точки зрения современных методов [6]. Пробелы в существующих педиатрических РИ могут привести к неверной трактовке полученных результатов и постановке ошибочного диагноза [2, 4, 9].

В настоящей работе с помощью автоматического гематологического анализатора мы исследовали количество лейкоцитов у здоровых детей в возрасте от 2 до 12 месяцев, определили РИ с помощью современных международных рекомендаций и разделили их в зависимости от возраста и пола.

Следует отметить, что РИ включают результаты обследования только 95 % популяции «практически здоровых детей», у 5 % пациентов лабораторные показатели будут выходить за границы «нормы». В свою очередь, значения, входящие в РИ, не могут гарантировать отсутствие заболевания [5].

Применение РИ, разработанных в конкретных лабораториях, позволяет применить более дифференцированный подход в оценке состояния детей, снизить тенденцию к гипердиагностике (например, необоснованный отвод при плановой вакцинации, применение дополнительных инвазивных методов исследования) и пр.

Таким образом, РИ можно рассматривать как необходимый ориентир в клинической практике врача – педиатра.

Материалы и методы исследования

Мы использовали метод локального установления РИ, применив классический способ со строго определенными критериями прямого отбора референсной группы.

Образцы капиллярной крови получили у 937 здоровых детей при проведении профилактических осмотров с диагнозом «Рутинное обследование состояния здоровья детей (Z 00.1)».

Капиллярную кровь использовали вследствие сложности проведения флеботомии у детей и связанных с этим проблем преаналитического этапа.

Соматическую патологию исключали по ретроспективному анализу амбулаторных карт и анкетированию родителей непосредственно перед процедурой.

Из дальнейшего анализа были исключены образцы крови детей:

● с гемолизом или наличием сгустков в пробах [1];

● повторные образцы, направленные на исследование в этот же период (по данным медицинской информационной системы «МИС-пациент»);

● с уровнем гемоглобина ниже 110 г\л согласно рекомендациям ВОЗ;

● c увеличением скорости оседания эритроцитов более 10 мм\час (по методу Панченкова).

Для оценки динамики количества лейкоцитов полученные данные были выделены по полу и возрасту обследованных детей: мальчики и девочки в группах от 2 до 6 месяцев и от 7 до 12 месяцев включительно.

Периферическую кровь собирали в пробирки с К3-ЭДТА («Microvette», Sarstedt, Германия). Образцы крови получали непосредственно в лаборатории и исследовали в течение 2 часов с момента взятия. Исследование проводили в марте – июле 2013 г., что позволило минимизировать погрешности, связанные с изменением настроек анализатора.

Анализ образцов крови соответствовал рутинной процедуре исследования общего анализа крови, в т.ч. режим работы гематологического анализатора, сервисное обслуживание прибора, проведение калибровки и процедуры внутрилабораторного контроля качества с использованием сертифицированных контрольных материалов при удовлетворительных результататах в Федеральной системе внешней оценки качества клинических лабораторных исследований [1].

Количество лейкоцитов исследовали с помощью автоматического гематологического анализатора
ADVIA 2120 (Siemens Healthcare Diagnostics Inc, США).

Все статистические процедуры выполняли с помощью программы StatSoft STATISTICA 10.

Для определения РИ использовали «Правила установления референтных интервалов и пределов» ГОСТ Р 53022.3-2008 [1] и современные протоколы Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) [8].

Исходя из предпосылки, что характер распределения в ряду количества лейкоцитов в группах здоровых детей отличался от нормального распределения, были применены непараметрические методы.

Из дальнейшего анализа были исключены статистические выбросы по методу Тьюки на основе интервала «нормальных» значений [5].

Полученные результаты были представлены как среднее значение (Хср), 95 % доверительный интервал для среднего (ДИ 95 %), стандартное отклонение (SD), стандартная ошибка среднего (StEr), и 2,5, 5, 50, 95, 97,5 процентили распределения.

РИ ограничили референтными пределами, между которыми располагается 95 % всех референтных значений. Ряд значений РИ расположен между 2,5 и 97,5 ‰ [3].

Для сравнения показателей в группах детей использовали U-критерий Манна-Уитни, различия считали статистически значимыми при p < 0,05.

Результаты исследования
и их обсуждение

Для расчета РИ мы использовали показатели количества лейкоцитов 884 детей, минимальный возраст обследованных cсоставил 2 месяца, максимальный – 12 месяцев.

Результаты исследования представлены в табл. 1.

Расчет РИ представлен в табл. 2 в виде 2,5–97,5 ‰.

Таблица 1

Количество лейкоцитов у детей первого года жизни

Параметр

Пол

n

Хср

ДИ95 %

StEr

SD

2,5‰

5‰

50‰

95‰

97,5‰

Количество лейкоцитов у детей в возрасте от 2 до 6 месяцев

WBC

х 10*9/л

м

276

8,76

0,27

0,14

2,34

5,08

5,51

8,47

13,01

14,12

ж

266

8,94

0,27

0,14

2,30

5,36

5,79

8,67

12,97

14,01

Количество лейкоцитов у детей в возрасте от 7 до 12 месяцев

WBC

х 10*9/л

м

163

9,01

0,32

0,16

2,13

5,52

5,95

8,77

12,93

13,93

ж

179

9,20

0,36

0,18

2,47

5,33

5,79

8,89

13,65

14,82

Таблица 2

Расчет количества лейкоцитов у детей первого года жизни

Референсные интервалы лейкоцитов у детей в возрасте от 2 до 6 месяцев

Параметр

Мальчики (n = 276)

Девочки (n = 266)

U-критерий

Манна-Уитни (p)

способ расчета

РИ

способ расчета

РИ

WBC

х 10*9/л

2,5 – 97,5 ‰

5,08 – 14,12

2,5 – 97,5 ‰

5,36 – 14,01

0,484

Референсные интервалы лейкоцитов у детей в возрасте от 7 до 12 месяцев

Параметр

Мальчики (n = 163)

Девочки (n = 179)

U-критерий

Манна-Уитни (p)

способ расчета

РИ

способ расчета

РИ

WBC

х 10*9/л

2,5 – 97,5 ‰

5,52 – 13,93

2,5 – 97,5 ‰

5,33 – 14,82

0,684

Таблица 3

Mayo Medical Laboratories [12]

Пол

Возраст 2–5 месяцев

Возраст 6 месяцев – 2 года

м

5,0–15,0x10*9/л

6,0–11,0x10*9/л

ж

5,0–15,0x10*9/л

6,0–11,0x10*9/л

ARUP Laboratories [13]

Пол

Возраст 61–180 дней

Возраст 6 месяцев – 23 месяца

м

6,9–15,7x10*9/л

6,2–14,5x10*9/л

ж

6,8–16,0x10*9/л

6,4–15,0x10*9/л

Данные приведены для капиллярной крови. Необходимо учитывать, что при исследовании капиллярной крови количество лейкоцитов выше, чем в венозной примерно на 3–12 % [7, 10].

Для выявления возможной разницы показателей в группах девочек и мальчиков мы использовали U-критерий Манна-Уитни. Учитывая значения p, представленные в табл. 2, признавать различия достоверными оснований нет.

Для сравнения современные лаборатории указывают следующие данные табл. 3.

Заключение

В результате проведенных исследований была выполнена оценка динамики общего количества лейкоцитов в периферической крови детей разного пола и возраста с определением РИ.

Сравнивая полученные значения в группах девочек и мальчиков, было доказано отсутствие достоверной разницы в зависимости от пола.

Результаты проведенного исследования определили высокую значимость выполненной нами работы над уточнением достоверных педиатрических РИ и натолкнули нас на мысль о необходимости более детального и широкомасштабного подхода к изучению проблемы в современных условиях.

Материалы исследований можно использовать в клинической практике для повышения информативности лабораторных данных при исследовании анализа крови и рекомендовать для применения в других лабораториях [1] при работе на гематологических анализаторах ADVIA 2120 с помощью отбора и обследования ограниченной референсной группы (20 человек).

Рецензенты:

Литовченко О.Г., д.б.н., доцент, профессор кафедры физиологии медицинского института, проректор по научной и инновационной работе ГБОУ ВПО «Сургутского государственного университета ХМАО-Югры», г. Сургут;

Лапшина Е.Д., д.б.н., профессор, заведующая кафедрой биологии Югорского государственного университета, г. Ханты-Мансийск.

Работа поступила в редакцию 16.12.2014.


Библиографическая ссылка

Зиновьева А.В., Кузьмина О.В., Никулина Е.Г. РЕФЕРЕНСНЫЕ ИНТЕРВАЛЫ ЛЕЙКОЦИТОВ У ДЕТЕЙ ПЕРВОГО ГОДА ЖИЗНИ // Фундаментальные исследования. – 2014. – № 12-3. – С. 520-523;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=36142 (дата обращения: 14.10.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074