Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,118

ИЗМЕНЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ЦЕМЕНТНОЙ ПЫЛИ И РАДИАЦИИ В ОТДАЛЕННОМ ПЕРИОДЕ И ИХ КОРРЕКЦИИ

Ильдербаев О.З.
Нарушения иммунного статуса более значительны при комбинированном поражении организма, чем обособленном воздействии, проявляется супраадитивизим. Под воздействием фитопрепарата отмечается нормализация количества лейкоцитов и лимфоцитов, происходит увеличение количества CD3+, CD4+, CD8+ и повышение лимфокинпродуцирующей способности лейкоцитов, активизация функциональной и фагоцитарной активности нейтрофилов.

Иммуномодулирующая терапия - «золотой стандарт» иммунотерапии. Результатом ее влияний при ИДС с инфекционным синдромом является восстановление работы дефектных звеньев иммунной системы, восстановление адекватности реагирования иммунной системы на имеющиеся воспалительные процессы различной этиологии [1]. Лекарственные растения и препараты из них, выгодно отличающиеся от своих синтетических аналогов биологическим сродством к тканям организма, малой токсичностью и доступностью, являются ценным сырьем получения лекарств, для лечения различных заболеваний, связанных с нарушением функциональной активности иммунной системы организма [2, 3]. Целью исследования явилось изучение действия фитопрепарата Ве (тритерпеноид - из коры березы повислой) на иммунный статус организма животных после фракционированного ионизирующего излучения в отдаленном периоде и при комбинированном воздействий гамма-облучения в дозе 2 Гр и цементной пыли.

I. Материалы и методика: Для реализации поставленной цели были выполнены 5 серии опытов на беспородных белых крысах массой 180-200 г. I группа-интактные (n=10), II группа-облученные в дозе 2 Гр (n=15), III группа-облученные получавшие фитопрепарат (n=15), IV группа-облученные в дозе 2 Гр параллельно затравленные цементной пылью (n=15) и V группа-облученные в дозе 2 Гр параллельно затравленные цементной пылью получавшие фитопрепарат (n=15). Животных II, III, IV и V групп облучали однократно за 90 суток до исследования на радиотерапевтической установке Терагам 60Сo в дозе 2Гр. Для воспроизведения экспериментального силикатоза подопытным крысам в легкие вводилась цементная пыль методом Е.Н. Городецкой (1954). Работу с экспериментальными животными проводили согласно приказу №755 Минздрава СССР «Правила проведения работ с использованием лабораторных животных».

В качестве фитопрепарата использовался Тритерпеноид из коры березы повислой Betula Pendula Poth (Ве), назначался по 2,5мг/100г массы per os в течение 14 дней. У всех животных изучали основные показатели, характеризующие иммунную систему организма, с проведением статистической обработки с вычислением критериев t-Стьюдента.

II. Результаты исследования. Отмечается повышение как процентного, так и абсолютного количества лимфоцитов на 32,45% (р<0,05) и 16,96% (р<0,05) соответственно. Абсолютное количество лимфоцитов у животных, получавших препарат, повысилось на 14,66% (р<0,05) или до 3691±146,83 в 1 мкл, а процентное количество имеет тенденцию к снижению до 49,74±3,11%, по сравнению со II группой. Общее количество Т-лимфоцитов у облученных животных в отдаленном периоде увеличено до 2734±206,45 (р<0,001), а относительное количество их имеет тенденцию к снижению по отношению к контрольной группе (р>0,05). Общее количество Т-лимфоцитов в III группе увеличено на 51,35% при сравнении с I группой (р<0,05), снижено на 25,18% при сравнении со II группой или 1,25 раза (р<0,01), а относительное количество увеличено на 12,91%, при сравнении со II группой.

У облученных животных абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов с хелперной активностью (CD4+) имеет тенденцию к снижению, у животных получавших препарат процентное количество Т-хелперов увеличивается на 23,57% (р<0,05), а абсолютное количество - на 32,58% (р<0,05). Исследование показало, что у животных получавших фракционированные дозы облучения в отдаленном периоде абсолютное количество Т-лимфоцитов с супрессорной активностью (CD8+), достоверно отличается от контрольного показателя, т.е. снижено в 2,35 раза (р<0,001), относительное количество осталось без изменения. Тогда как у III группы абсолютное количество достоверно повышается на 95,90% (р<0,05) при сравнении со второй группой, а процентное количество имеет тенденцию к снижению. Данное изменение вызывает снижение иммунорегуляторного индекса, который составил в среднем 2,01±0,12, что достоверно ниже, чем во втором группе 3,41±0,33 (р<0,01).

Исследование показало, что у облученных животных, отмечено снижение лимфокинпродуцирующей способности Т-лимфоцитов, увеличением индекса миграции в РТМЛ на ФГА с 0,79±0,04 в контрольной группе до 0,82±0,05 во второй группе, а у животных получавших фитопрепарат отмечено увеличение лимфокинпродуцирующей способности Т-лимфоцитов, снижением индекса миграции в РТМЛ на ФГА с 0,82±0,05 во группе до 0,51±0,03 в третьей группе (р<0,001). Вероятно, в контрольной группе выражена способность клеток продуцировать цитокины, подавляющие миграцию лейкоцитов, тогда как при воздействии радиации в дозе 2 Гр в отдаленном периоде продукция цитокинов видимо, была значительно меньше, так как индекс миграции составил больше чем у интактных животных. Фитопрепарат наоборот способствовал увеличению продукции цитокинов.

У облученных животных со стороны количества В-лимфоцитов (CD19+) отмечено достоверное снижение в 1,21 раза (р<0,05), относительное количество CD19+ увеличивается в 1,78 раза (р<0,05). После фитотерапии отмечено повышение абсолютного количества на 70,16% по сравнению со второй группой, а относительное количество CD19+ стремилось в сторону контрольного показателя.

У облученных животных в отдаленном периоде фагоцитарная активность (ФА) клеток крови составила 43,24±3,41%, что не достоверно от контрольных значений, и в III группе составила 43,54±2,44%, которое отмечено достоверное изменение (р<0,05). Фагоцитарное число (ФЧ) у животных II группы отмечено в среднем 2,24±0,17 (р<0,05), у III группы в среднем 1,78±0,11 (р>0,05). Фитопрепарат направленно действовал на нормализацию показателей в этой ситуации.

В сыворотке крови у облученных крыс отмечено снижение концентрации циркулирующих иммунных комплексов до 0,71±0,08 усл.ед., что почти 1,8 раза ниже контрольных значений (р<0,001). На фоне фитотерапии в III группе отмечено статистически значимое повышение, примерно в 1,6 раза (р<0,05) по сравнению со второй группой. НСТ-тест отражает итоговую реакцию одной из ключевых ферментных систем, ответственных за эффекторный потенциал фагоцитов. Исследование показало, что показатель НСТ-теста у экспериментально облученных животных статистически достоверно возрос с 4,87±1,55 до 7,69±0,56 (р<0,05), что свидетельствует о повышении функциональной активности нейтрофилов в отдаленном периоде. Выявленное нами напряжение фагоцитарного звена в виде повышения фагоцитарной активности, числа и НСТ-теста у фракционировано облученных животных в отдаленном периоде свидетельствует о важной роли неспецифических факторов резистентности организма в поддержании иммунологического гомеостаза. Снижение НСТ-теста у третьей группы приводило к исходному уровню контрольных животных.

Общий уровень IgА в сыворотке крови, у облученных животных был достоверно снижен (1,83±0,23 г/л при норме 3,09±0,28 г/л, (р<0,05). Выявлено достоверное увеличение уровня IgA в 1,8 раза у животных принимавших фитопрепарат. Выявлена тенденция к увеличению общего уровня IgМ (4,39±0,34 г/л против 4,05±0,28 г/л). После фитопрепарата происходит недостоверное снижение уровня IgM. Уровень IgG во второй группе был статистически достоверно снижен (2,89±0,35 г/л против 5,05±0,70 г/л, (р<0,05). У животных III группы отмечено увеличение уровня при сравнении со II группой (5,13±0,38 г/л против 2,89±0,35 г/л (р<0,01).

Таким образом, проведенные исследования позволяли выявить нарушения иммунного статуса у крыс, подвергавшихся радиационному фактору в отдаленном периоде, характеризующиеся в целом снижением количества CD4+, CD8+-лимфоцитов и IgA, IgG на фоне увеличение содержания абсолютного количества CD3+ и снижения относительного количества CD19+. Под воздействием фитопрепарата отмечается лейкоцитоз, на фоне лимфоцитоза увеличение количества CD3+, CD4+, CD8+ и повышение лимфокинпродуцирующей способности лейкоцитов и нормализация функциональной активности нейтрофилов и содержания иммуноглобулинов классов A, G. Исходя из показателей исследований, препарат обладает больше иммуномодулирующим эффектом.

Исследование иммунного статуса у животных подвергавшегося к комбинированному воздействию радиации 2 ГР и цементной пыли, в отдаленном периоде показало, что у животных, подвергавшихся пыле-радиационному фактору отмечено лейкопения - 5336±374,55 в 1 мкл (р<0,05). При действии фитопрепарата достоверно повышается число лейкоцитов в 1,27 раза в сравнении со второй группой. У животных после комбинированного воздействия отмечается повышение как процентного, так и абсолютного количества лимфоцитов в 1,26 раза и 1,13 раза соответственно. Абсолютное и относительное количество лимфоцитов у животных, получавших препарат, отмечена тенденция к снижению до 2987±155,44 в 1 мкл, а процентное количество до 43,73±2,36%, по сравнению с IV группой.

Под воздействием препарата общее количество CD3+ увеличено на 30,76% (р<0,05), а относительное количество - на 30,51% (р<0,05) по отношению к IV группе. У животных, подвергавшихся пыле-радиационному фактору, абсолютное и относительное количество CD4+ статистически достоверно снижается: абсолютное - в 1,32 раза (р<0,05), процентное - в 1,27 раза (р<0,05), а у животных, получавших фитопрепарат, абсолютное количество CD4+ увеличивается в 1,31 раза (р<0,05), процентное количество - в 1,3 раза (р<0,05). Исследование показало, что у животных получивших фракционированные дозы облучения и подвергавшихся запылению (IV группа), абсолютное и процентное количество CD8+, снижается по сравнению контрольного показателя (абсолютное: 411,22±38,66 в 1 мкл при норме 479,11±19,61 в 1 мкл, процентное: 9,07±0,87% при норме 11,24±0,42%, (р<0,05). У животных получивших препарат (V группа) процентное количество Т-супрессоров увеличивается на 36,16%, а абсолютное количество - на 15,70%. Данное изменение вызывает увеличение CD4+/CD8+, которое составило в среднем 1,45±0,09, по сравнению с IV группой - 1,31±0,07.

Анализ полученных результатов показал, что у животных, подвергавшихся пыле-радиационному фактору, отмечено снижение лимфокинпродуцирующей способности Т-лимфоцитов, увеличение индекса миграции в РТМЛ на ФГА с 0,79±0,04 в контрольной группе до 1,22±0,09 (р<0,01), а у животных пятой группы отмечено снижение индекса до 0,83±0,07 (р<0,05, по сравнению с IV группой), это показывает, что под воздействием фитопрепарата повысилась лимфокинпродуцирующая способность CD3+ клеток.

Под воздействием препарата абсолютное количество CD19+ имеет тенденцию к снижению, по сравнению с четвертой группой, а абсолютное количество к повышению. Вместе с тем, наблюдается тенденция к снижению концентрации ЦИК в сыворотке крови на 13,39% у животных подвергавшихся к пыле-радиационному фактору. В группе получивших фитопрепарат отмечено тенденция к увеличению иммунных комплексов (1,21±0,10 усл.ед. против 1,12±0,10 усл.ед.). У животных IV группы фагоцитарная активность (ФА) клеток крови составила 34,03±2,66%, V группе - 38,67±2,87% (р>0,05). Фагоцитарное число (ФЧ) у животных IV группы составило в среднем 1,39±0,09, у V группы - 1,64±0,12 (р>0,05). Показатель НСТ-теста у V группы статистически достоверно снижен до 7,02±0,42% (р<0,05) по сравнению с IV группой, но статистически достоверно выше чем в контрольной группе.

Общий уровень IgА в сыворотке крови, у животных IV группы был достоверно снижен (1,77±0,12 г/л при норме 3,09±0,28 г/л, (р<0,01). Выявлено достоверное увеличение уровня IgA в 1,61 раза (р<0,05) у животных V группы, принимавших фитопрепарат. При исследовании общего уровня IgМ отмечено достоверное снижение в IV группе (2,97±0,18 г/л против 4,05±0,28 г/л (р<0,05). После фитотерапии происходит статистически достоверное увеличение уровня IgM в V группе в 1,41 раза (р<0,05). Уровень IgG в IV группе был статистически достоверно снижен (3,46±0,25 г/л против 5,05±0,70 г/л, (р<0,05). У животных V группы уровень IgG увеличивалась почти в 1,5 раза (р<0,05).

Таким образом, иммунная система активно вовлекается в патологический процесс при комбинированном воздействии факторов ионизирующего излучения и производственной пыли. Нарушения иммунного статуса более значительны при комбинированном поражении организма, чем обособленном воздействии факторов радиационного и нерадиационного генеза.

Под воздействием фитопрепарата Ве отмечается тенденция к нормализации количества лейкоцитов и лимфоцитов, на фоне этих изменении происходит увеличение количества CD3+, CD4+, CD8+ и повышение лимфокинпродуцирующей способности лейкоцитов. Умеренное повышение уровня ЦИК и активизация функциональной и фагоцитарной активности нейтрофилов. Таким образом, назначение фитопрепарата «Ве» оказало положительное воздействие на иммунологическую реактивность организма, экспериментальные данные свидетельствуют об иммуномодулирующих свойствах данного препарата. Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод о необходимости дальнейших исследований отдаленных последствий радиационного поражения в комбинации с нерадиационными факторами, которые трудно корригируются и являются малоизученными.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

  1. Нестерова И.В. РАЖ. 2008. №1. приложение 1. с.199-203.
  2. Бакуридзе А.Д., Курцикидзе М.Ш.,Писарев В.М. и др. Иммуномодуляторы растительного происхождения //Хим. -фармац. журн. - 1993. - № 8. - С. 43-47.
  3. Лазарева Д.Н., Плечев В.В., Моругова Т.В., Самигуллина Л.И. Растения, стимулирующие иммунитет. - Уфа, 2005. - 96 с.

Библиографическая ссылка

Ильдербаев О.З. ИЗМЕНЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ОРГАНИЗМА ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ЦЕМЕНТНОЙ ПЫЛИ И РАДИАЦИИ В ОТДАЛЕННОМ ПЕРИОДЕ И ИХ КОРРЕКЦИИ // Фундаментальные исследования. – 2008. – № 10. – С. 17-21;
URL: http://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=3836 (дата обращения: 20.06.2018).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252