ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ И ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА БАД «ЯГЕЛЬ ДЕТОКС»

Степанова А.В.; Аньшакова В.В.

ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ И ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА БАД «ЯГЕЛЬ ДЕТОКС»

Степанова А.В. 1, Аньшакова В.В. 1

1ФГАОУ ВПО "Северо-Восточный федеральный университет им. М.К. Аммосова"

По международным стандартам, биологически активные добавки (БАД) – это природные (идентичные природным) биологически активные вещества, предназначенные для употребления одновременно с пищей или введения в состав пищевых продуктов.Разработанная в Северо-Восточном федеральном университете биологически активная добавка к пище «Ягель Детокс» из таллома лишайников используется как дополнительный источник полисахаридов, витамина В12, содержит лишайниковые кислоты антибиотическогодействия [5–8]. Производство БАД осуществляется инновационной экологически чистой, безотходной механохимической биотехнологией [1, 2, 9].

Уникальная технология обработки сырья позволяет получить межмолекулярные комплексы на основе полимерной матрицы природных олигосахаридов. Полученные комплексы состоят из «активного наполнителя» – лишайниковых β-олигосахаридов, образующихся в процессе механохимической переработки лишайниковых β-полисахаридов, и действующего вещества любой природы, в том числе, вносимых извне фармацевтических препаратов антибиотического, адаптагенного, иммуномодуляторного, цитостатического действия и витаминно-микроэлементных комплексов [3, 4]. В этой связи нами ведется планомерная работа для регистрации БАД как фармацевтического средства. Надлежащей практикой оценки применимости новых фармакологических веществ являются испытания безопасности их использования.

Целью исследования является определение безопасности и потенциальных токсических эффектов биологически активной добавки к пище «Ягель Детокс».

Материалы и методы исследований

Экспертиза образцов БАД к пище «Ягель Детокс» по показателям безопасности проводилась в аккредитованном испытательном лабораторном центре на основании нормативных и методических документов Государственной системы санитарно-эпидемиологического нормирования Российской Федерации с учетом требований Европейской конвенции по защите позвоночных животных, требований национального руководства и руководства учреждения по содержанию и использованию лабораторных животных.

Токсичность БАД изучали согласно требованиями к доклиническому изучению общетоксического действия фармакологических веществ [10, 11]. Животные Mussp. СD-1 (n=60 самок и n = 60 самцов) предоставлены Питомником лабораторных животных ФИБХ РАН г. Пущино в возрасте 7 недель и массой тела33,0 ± 0,6 г (самцы) и 25,4 ± 0,5 г (самки). Тестируемый препарат «Ягель Детокс» и контрольное вещество (физ. раствор) вводились животным внутрижелудочно объемом 10 мл/кг в двух различных дозах 1000 и 2000 мг/кг.

В ходе прижизненной фазы исследования у животных регистрировались клинические признаки возможной интоксикации, вес тела, потребление корма. Половина животных была подвергнута эвтаназии через две недели после начала введения тестируемых препаратов. Вторая половина была подвергнута эвтаназии через 8 недель после начала введения тестируемых препаратов. У животных были выполнены измерения гематологических показателей периферической крови, биохимический анализ сыворотки крови, массы органов. В рамках данного исследования гистологический анализ не потребовался.

Для всех количественных данных была применена описательная статистика: подсчитаны средние значения и стандартная ошибка среднего. Нормальность распределения вариант в группе определяли тестом Shapiro-Wilk при 5 %-ном уровне значимости. Данные веса тела и потребления корма были проанализированы двухфакторным дисперсионным анализом ANOVA с последующим тестом Newman-Keuls или Duncan. Данные гематологии, биохимии и веса органов были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с последующим тестом Newman-Keuls или непараметрического критерия Kruskal-Wallis с последующим тестом Dunn в зависимости от типа распределения количественных данных.

Статистический анализ проводили программой Statisticaver. 7.1. Различия определяли при P < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

По результатам определения микробиологических исследований БАД к пище было установлено отсутствие патогенной микрофлоры во всех пробах, что свидетельствует о высокой степени микробиологической чистоты биопродукции. Также по обследованным показателям токсичных элементов и пестицидов биопрепарат соответствует нормативам, установленным для БАД (СанПиН 2.3.2.1290-03).

В ходе токсикологического исследования признаков интоксикации организма животных не отмечено, случаи летальных исходов отсутствовали. Статистически значимых различий между животными, получавшими тестируемые препараты, и контрольными животными, получавшими физиологический раствор, по массе тела и ее приросту ни у самцов, ни у самок выявлено не было.

После введения тестируемых препаратов у мышей не наблюдалось выраженных изменений биохимических показателей сыворотки крови, которые могли бы свидетельствовать о токсических изменениях во внутренних органах (табл. 1).

Таблица 1

Биохимические показатели крови животных (самки, n = 60)

Биохимический параметр	Срок эвтаназии, день	Значение биохимического параметра/препарат
Биохимический параметр	Срок эвтаназии, день	Контроль (физ. раствор)	Ягель Детокс, доза 1 (1000 мг/кг)	Ягель Детокс, доза 2 (2000 мг/кг)
1	2	3	4	5
Мочевина, ммоль/л	15-й	10,1 ± 3,6	8,6 ± 1,5	8,3 ± 1,3
Мочевина, ммоль/л	60-й	8,4 ± 2,9	10,2 ± 3,7	9,1 ± 2,4
Холестерин, ммоль/л	15-й	2,4 ± 0,5	2,5 ± 0,3	2,6 ± 0,7
Холестерин, ммоль/л	60-й	3,2 ± 1,4	2,9 ± 0,9	3,1 ± 0,9
Триглицериды, ммоль/л	15-й	0,7 ± 0,3	0,8 ± 0,3	0,6 ± 0,2
Триглицериды, ммоль/л	60-й	0,8 ± 0,2	0,7 ± 0,4	0,8 ± 0,3
АЛТ, Ед/л	15-й	35,1 ± 14,3	26,0 ± 3,8	32,0 ± 3,4
АЛТ, Ед/л	60-й	27,9 ± 12,7	31,5 ± 4,6	30,8 ± 2,3
АСТ, Ед/л	15-й	86,8 ± 34,1	59,4 ± 9,4	73,8 ± 31,0
АСТ, Ед/л	60-й	67,5 ± 24,8	63,2 ± 19,0	72,9 ± 32,1
Билирубин, мкмоль/л	15-й	3,8 ± 1,9	4,7 ± 1,1	4,8 ± 1,5
Билирубин, мкмоль/л	60-й	4,1 ± 2,0	3,9 ± 2,5	4,6 ± 1,7
Креатинин, мкмоль/л	15-й	63,3 ± 14,0	53,0 ± 16,4	56,6 ± 8,5
Креатинин, мкмоль/л	60-й	57,8 ± 9,1	61,2 ± 19,3	55,4 ± 7,2
ЩФ, Ед/л	15-й	119,0 ± 22,3	100,4 ± 22,9	114,9 ± 35,5
ЩФ, Ед/л	60-й	115,3 ± 12,6	107,9 ± 21,4	116,5 ± 27,7
Альбумин, г/л	15-й	32,9 ± 2,1	31,8 ± 1,7	31,9 ± 2,1
Альбумин, г/л	60-й	33,5 ± 3,0	34,2 ± 2,8	32,5 ± 3,1
Кальций, ммоль/л	15-й	2,5 ± 0,2	2,4 ± 0,05	2,4 ± 0,1
Кальций, ммоль/л	60-й	2,4 ± 0,1	2,7 ± 0,8	2,6 ± 0,3
Фосфор, ммоль/л	15-й	3,8 ± 1,0	3,4 ± 0,5	3,3 ± 0,2
Фосфор, ммоль/л	60-й	3,5 ± 2,0	3,3 ± 0,7	3,4 ± 0,1
Общий белок, г/л	15-й	45,3 ± 2,9	43,7 ± 2,6	44,0 ± 3,6
Общий белок, г/л	60-й	41,9 ± 3,0	44,6 ± 1,9	45,6 ± 2,1
Глобулины, г/л	15-й	12,4 ± 1,2	11,9 ± 1,2	12,1 ± 1,7
Глобулины, г/л	60-й	12,8 ± 1,3	10,9 ± 2,0	12,8 ± 2,6

Результаты гематологического анализа показали, что внутрижелудочное введение тестируемого препарата «Ягель Детокс» мышам CD-1 не выявило токсических эффектов на систему крови (табл. 2).

Таблица 2

Гематологические показатели животных (самки, n = 60)

Параметр		Срок эвтаназии, день	Значение параметров гематограммы / препарат
			физ. раствор		Ягель Детокс, доза 1 (1000 мг/кг)		Ягель Детокс, доза 2 (2000 мг/кг)
1		2	3		4		5
Количество лейкоцитов (WBC), г/л		15-й	3,2 ± 1,2		4,0 ± 1,9		3,3 ± 1,0
		60-й	3,9 ± 0,9		3,5 ± 1,6		3,8 ± 1,4
Количество эритроцитов (RBC), т/л		15-й	9,16 ± 0,12		10,02 ± 0,36		9,18 ± 0,49
		60-й	10,29 ± 0,26		9,45 ± 0,74		9,97 ± 0,68
Уровень гемоглобина (Hb), г/л		15-й	152 ± 3		138 ± 4		129 ± 5
		60-й	147 ± 7		129 ± 6		135 ± 4
Гематокрит (HCT), л/л		15-й	0,482 ± 0,024		0,457 ± 0,037		0,457 ± 0,023
		60-й	0,471 ± 0,035		0,445 ± 0,062		0,439 ± 0,027
Средний объем эритроцита (MCV), фл		15-й	51,8 ± 0,2		51,4 ± 0,4		49,9 ± 3,6
		60-й	50,3 ± 0,4		52,1 ± 0,9		49,7 ± 2,2
Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC), г/л		15-й	316 ± 0,1		307 ± 0,4		282 ± 12
		60-й	293 ± 0,5		314 ± 0,2		301 ± 4
Количество тромбоцитов (PLT), г/л		15-й	816 ± 0,12		902 ± 0,36		854 ± 185
		60-й	875 ± 23		892 ± 35		868 ± 119
Средний объем тромбоцитов (MРV), фл		15-й	5,2 ±0,3		4,8 ± 0,4		4,9 ± 0,2
		60-й	4,9 ± 0,2		5,0 ± 0,3		5,1 ± 0,3
Тромбокрит (PCT), сл/л		15-й	0,489 ± 0,023		0,517 ± 0,073		0,393 ± 0,076
		60-й	0,457 ± 0,038		0,522 ± 0,069		0,420 ± 0,034
Широта распределения тромбоцитов по объему,%		15-й	11,8 ± 0,2		11,4 ± 0,4		10,7 ± 1,3
		60-й	11,5 ± 0,3		11,6 ± 0,7		11,8 ± 1,4
Лейкограмма
Нейтрофилы палочкоядерные, г/л	15-й		0,02 ± 0,02	0,01 ± 0,01		0,02 ± 0,04
	60-й		0,01 ± 0,03	0,02 ± 0,02		0,03 ± 0,05
Нейтрофилы сегментоядерные, г/л	15-й		1,50 ± 0,27	2,06 ± 0,40		0,30 ± 0,16
	60-й		1,44 ± 0,35	1,86 ± 0,84		0,32 ± 0,17
Эозинофилы, г/л	15-й		0,07 ± 0,04	0,11 ± 0,05		0,03 ± 0,02
	60-й		0,09 ± 0,03	0,05 ± 0,04		0,08 ± 0,02
Базофилы, г/л	15-й		0,00 ± 0,00	0,00 ± 0,00		0,00 ± 0,00
	60-й		0,00 ± 0,00	0,00 ± 0,00		0,00 ± 0,00
Лимфоциты, г/л	15-й		5,63 ± 1,30	6,76 ± 1,52		2,90 ± 0,81
	60-й		4,45 ± 1,60	5,19 ± 1,43		3,22 ± 0,64
Моноциты, г/л	15-й		0,02 ± 0,02	0,08 ± 0,07		0,04 ± 0,01
	60-й		0,06 ± 0,03	0,05 ± 0,04		0,08 ± 0,02

Статистически значимых различий по массе органов между группами животных, получавших тестируемые препараты, и контрольными животными в ходе исследования также выявлено не было (табл. 3).Данные в табл. 1 – 3 приведены для самок, у самцов результаты аналогичны.

Таблица 3

Масса органов животных (самки, n = 60)

Орган	Срок эвтаназии, день	Масса органов, г/препарат
Орган	Срок эвтаназии, день	Контроль (физ. раствор)	Ягель Детокс, доза 1 (1000 мг/кг)	Ягель Детокс, доза 2 (2000 мг/кг)
Семенники/ яичники	15-й	0,0217 ± 0,001	0,021 ± 0,001	0,0232 ± 0,001
Семенники/ яичники	60-й	0,0199 ± 0,001	0,0223 ± 0,001	0,0211 ± 0,001
Селезенка	15-й	0,1028 ± 0,008	0,1118 ± 0,01	0,112 ± 0,008
Селезенка	60-й	0,1048 ± 0,01	0,1250 ± 0,012	0,1095 ± 0,01
Почки	15-й	0,3460 ± 0,02	0,3292 ± 0,01	0,3353 ± 0,02
Почки	60-й	0,3542 ± 0,04	0,3485 ± 0,08	0,3352 ± 0,06
Надпочечники	15-й	0,0091 ± 0,001	0,0103 ± 0,001	0,0123 ± 0,001
Надпочечники	60-й	0,0110 ± 0,001	0,0099 ± 0,001	0,0110 ± 0,001
Печень	15-й	1,1994 ± 0,03	1,1354 ± 0,03	1,1868 ± 0,03
Печень	60-й	1,1761 ± 0,06	1,1494 ± 0,05	1,1645 ± 0,04
Тимус	15-й	0,0491 ± 0,004	0,0512 ± 0,008	0,0468 ± 0,004
Тимус	60-й	0,0468 ± 0,005	0,0495 ± 0,01	0,0501 ± 0,03
Сердце	15-й	0,1297 ± 0,005	0,123 ± 0,003	0,1247 ± 0,005
Сердце	60-й	0,1315 ± 0,009	0,1286 ± 0,007	0,1252 ± 0,006
Легкие	15-й	0,1653 ± 0,01	0,1658 ± 0,005	0,1578 ± 0,01
Легкие	60-й	0,1722 ± 0,009	0,1684 ± 0,007	0,1595 ± 0,015

При плановой некропсии животных в ходе визуального осмотра внешнего состояния тела, внутренних поверхностей и проходов, полости черепа, грудной, брюшной и тазовой полостей с находящимися в них органами и тканями, шеи с органами и тканями, каркаса и скелетно-мышечной системы, а также мест введения морфологических признаков отклонений от общепринятой нормы, связанных с действием исследуемых препаратов, выявлено не было.

Таким образом, на основании проведенного исследования можно сделать заключение о том, что тестируемый препарат «Ягель Детокс «прошел токсиколого-гигиеническую экспертизу и может быть рекомендован для проведения дальнейших доклинических испытаний.

Рецензенты:

Кершенгольц Б.М., д.б.н., профессор, зам. директора по науке Института биологических проблем криолитозоны СО РАН, г. Якутск;

Борисова Н.В., д.м.н., зам. директора по учебной работе Медицинского института ФГАОУ ВПО «Северо-Восточный федеральный университет им. М.К. Аммосова», г. Якутск.

Работа поступила в редакцию 04.06.2014.

Библиографическая ссылка

Степанова А.В., Аньшакова В.В. ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ И ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА БАД «ЯГЕЛЬ ДЕТОКС» // Фундаментальные исследования. 2014. № 9. С. 105-109;
URL: https://www.fundamental-research.ru/article/view?id=34651 (дата обращения: 24.08.2026).