Кроме известных гемопоэтических островков [9] в костном мозге существует другая разновидность кластеров, в которых происходит не созревание, а разрушение - (эритроклазия) - эритроцитов, это эритроклазические костномозговые кластеры [1,2]. Интенсивность и характер их образования претерпевают характерные изменения при гематологических заболеваниях, что используется для прогнозирования характера их течения и дифференциальной диагностики [3,4,7,8]. Эти исследования производились без учета видов кластеробразующих миелокариоцитов с оценкой лишь суммарного их количества кластеров. Поэтому было целесообразно исследовать способность различных видов образовывать эритроклазические кластеры.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Исследованы аспираты костного мозга 9 детей, больных апластической анемией; 20 детей, больных острым лимфобластным лейкозом в активной фазе и в фазе ремиссии; 10 детей, больных хроническим миелолейкозом; 9 больных железодефицитной анемией и 10 детей с нейтрофильными лейкемоидными реакциями. Все дети находились на лечении в детской областной клинической больнице г.Твери. Был исследован также костный мозг 50 больных множественной миеломой. Костный мозг получали стернальной пункцией, мазки аспиратов окрашивали по Романовскому-Гимзе. При световой микроскопии мазков костного мозга производили определение и подсчет количества эритроклазических кластеров, образованных различными видами миелокариоцитов, для проведения дифференциального анализа процесса кластерообразования.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Установлено, что подавляющее большинство эритроклазических кластеров в костном мозге исследованных больных, за исключением больных в активной фазе острого лимфобластного лейкоза, было образовано клетками гранулоцитарного ряда. В активной фазе острого лимфобластного лейкоза в связи с лимфобластной инфильтрацией костного мозга большинство эритроклазических кластеров было образовано бластными клетками. Значительно меньшее количество эритроклазических кластеров при этом состоянии было образовано гранулоцитами.

При лейкемоидных реакциях содержание гранулоцитарных миелокариоцитов находилось в пределах нормы. Из них образовывали эритроклазических кластеров 36,2%. В костном мозге больных апластической анемией на фоне значительного уменьшения его клеточности (таблица) содержание клеток гранулоцитарного ряда было резко уменьшено, образовывали эритроклазические кластеры лишь 4,4% их количества. У больных острым лимфобластным лейкозом в стадии ремиссии клеточность костного мозга и количество содержащихся в нем гранулоцитарных клеток были меньше нормальных величин (таблица). Тем не менее количество гранулоцитарных миелокариоцитов, образующих эритроклазические кластеры, было в 4 раза больше, чем при апластической анемии и составляло 8,6% от их общего количества (таблица).

Таблица. Количество гранулоцитарных миелокариоцитов и образованных ими эритроклазических кластеров в мкл костного мозга исследованных больных

Примечание: в числителе - количества кластеробразующих миелокариоцитов. К ним относится показатель «Р». В знаменателе - общее количество миелокариоцитов данных видов.

В активной стадии острого лимфобластного лейкоза при лимфоидной метаплазии костного мозга и резком увеличении его клеточности абсолютное содержание в нем гранулоцитарных клеток было таким же низким, что и в костном мозге больных апластической анемией (таблица). В соответствии с лимфоидной инфильтрацией костного мозга в активной фазе острого лимфобластного лейкоза основное количество кластеров было образовано бластными клетками. Из их общего количества гранулоцитарными миелокариоцитами было образовано лишь 2%. Следует отметить, что в соответствии с большим - в 2,4 раза содержанием гранулоцитарных миелокариоцитов в костном мозге больных острым лимфобластным лейкозом в стадии ремиссии, они образовывали в 2,36 раза большее, чем в активной стадии, количество эритроклазических кластеров. Из этого следует, что относительное (процентное) содержание кластеробразующих гранулоцитарных миелокариоцитов в обе фазы течения острого лимфобластного лейкоза было практически одинаковым. Действительно, и в активной фазе, и в фазе ремиссии эритроклазические кластеры были образованы соответственно 7,7% и 8,6% гранулоцитарных миелокариоцитов.

При хроническом миелолейкозе в кластеробразовании также участвовало относительно небольшое количество гранулоцитарных миелокариоцитов - 5,3%, несмотря на резкое увеличение их абсолютного количества (таблица). В костном мозге больных множественной миеломой образовывали кластеры 18,4% гранулоцитарных миелокариоцитов.

При заболеваниях, сопровождающимися тяжелыми расстройствами кроветворения (апластическая анемия, острый лимфобластный лейкоз, хронический миелолейкоз) процесс образования эритроклазических кластеров в костном мозге больных имел одинаковый характер. Наибольшие количества гранулоцитарных эритроклазических кластеров были образованы про- и миелоцитами. Этими клетками в костном мозге больных апластической анемией было образовано 69,3% от всех гранулоцитарных эритроклазических кластеров, в костном мозге больных острым лимфобластным лейкозом в активной фазе - 92%, в фазе ремиссии - 57,6% и при хроническом миелолейкозе - 75%. По мере созревания гранулоцитарных миелокариоцитов их кластеробразующая способность существенно уменьшалась по сравнению с кластеробразующей способностью про- и миелоцитов; хотя количество зрелых и созревающих гранулоцитов превосходило суммарное количество про- и миелоцитов (таблица). В костном мозге больных железодефицитной анемией и при лейкемоидных реакциях, то есть при состояниях, не сопровождающихся тяжелыми нарушениями гранулоцитопоэза, процесс образования эритроклазических кластеров имел совершенно иной характер. При множественной миеломе 69% эритроклазических кластеров были образованы созревающими и зрелыми клетками - метамиелоцитами, палочко- и сегментоядерными. Соответственно промиелоциты и миелоциты образовывали в 2 раза меньшее количество эритроклазических кластеров (таблица). При лейкемоидных реакциях так же, как и при множественной миеломе, созревающие и зрелые гранулоциты образовывали большие, чем про- и миелоциты, количества эритроклазических кластеров, составляющие 63% от числа всех эритроклазических кластеров. В костном мозге больных железодефицитной анемией количество эритроклазических кластеров, образованных созревающими и зрелыми гранулоцитарными миелокариоцитами, также было больше количества эритроклазических кластеров, образованных про- и миелоцитами, однако, различие было статистически недостоверным. Тем не менее уменьшения образования эритроклазических кластеров гранулоцитарными миелокариоцитами по мере их созревания, как это имело место при апластической анемии и остром лимфобластном лейкозе, при железодефицитной анемии не наблюдалось (таблица).

При анализе результатов исследования обратили на себя внимание следующие обстоятельства. При заболеваниях, сопровождающихся выраженным подавлением гранулоцитопоэза - (апластическая анемия и активная фаза острого лимфобластного лейкоза абсолютные количества гранулоцитарных миелокариоцитов в мкл костного мозга были практически одинаковыми и составляли соответственно 6500±660 и 6797±1450. Маловероятно, чтобы такое совпадение имело случайный характер. В костном мозге больных в активной фазе острого лимфобластного лейкоза и в фазе его ремиссии процентное содержание гранулоцитарных миелокариоцитов, образующих эритроклазические кластеры, как указывалось выше, практически совпадает. Это может быть обусловлено тем, что при восстановлении гранулоцитопоэза в стадии ремиссии острого лимфобластного лейкоза и соответственно при увеличении числа гранулоцитарных миелокариоцитов сохраняется пропорциональность между возросшим общим количеством гранулоцитов и количеством гранулоцитов, образующих эритроклазические кластеры. Оба эти наблюдения можно объяснить существованием субклона гранулоцитарных миелокариоцитов, устойчивых к миелотоксическим факторам.

Таким образом, между процессами кластерообразования при заболеваниях, протекающих с тяжелыми нарушениями гранулоцитопоэза и без них, существуют не только количественные, но и качественные различия. Эти наблюдения свидетельствуют о функциональной неоднородности гранулоцитарных миелокариоцитов, возможно, о существовании нескольких линий. Это подтверждается выявлением неоднородности популяции нейтрофилов крови, установленной методом розеткообразования in vitro [5].

Пропорциональность величин общего количества гранулоцитарных миелокариоцитов, и количества образующих эритроклазических кластеров, характерная для активной фазы острого лимфобластного лейкоза и фазы его ремиссии, одинаковое («остаточное») содержание гранулоцитарных миелокариоцитов в костном мозге больных апластической анемией и активной стадии острого лимфобластного лейкоза, различный характер процесса образования эритроклазических кластеров при заболеваниях, протекающих с нарушениями гранулоцитопоэза и без них могут быть объяснены существованием в костном мозге субклона гранулоцитарных миелокариоцитов, обладающего повышенной устойчивостью при тяжелых нарушениях кроветворения.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бельченко Д.И. // Клиническая лабораторная диагностика.- 1993. - № 4. - С.9-13.
2. Бельченко Д.И., Кривошеина Е.Л. // Гематология и трансфузиология. - 1999. - Т. 44. - № 5. - С. 18-21.
3. Бельченко Д.И. Диплом на открытие «Явление образования в костном мозге млекопитающих эритроклазических костномозговых кластеров» выдан международной ассоциацией авторов научных открытий. - 2001.
4. Бельченко Д.И., Кривошеина Е.Л. // Педиатрия.- 2001. - № 2. - С.22-25.
5. Дзержинская И.И. // Иммунология. - 1983. - № 6. - С.44-47.
6. Руководство по гематологии. / Под ред. А.И. Воробьева. -М., 2002. - Т. 1. - С.43-45.
7. Смирнова Е.А., Бельченко Д.И., Кривошеина Е.Л. //Педиатрия. - 1997. - № 4. - С. 63-65.
8. Смирнова Е.А., Бельченко Д.И., Кривошеина Е.Л. //Педиатрия. - 2002. - № 6. - С. 11-14.
9. Bessis M. // Rev. Hematol. - 1958. - Vol. 13. - P.8-11.