На сегодняшний день актуальным вопросом остается родоразрешение путем кесарева сечения. Имеется тенденция к росту частоты выполнения данной операции преимущественно за счет увеличения количества первородящих старше 30 лет и роста сопутствующей соматической патологии [1].
Кесарево сечение часто сопровождается развитием инфекционных осложнений, в основе которых лежит бактериальная обсемененность. Множество исследований посвящено изучению влияния как комменсальной, так и патогенной микрофлоры на исход беременности, а также течение послеоперационного периода. При малой обсемененности дальнейшее развитие воспаления зависит от иммунореактивности организма [2]. На данный момент недостаточно освящены вопросы, связанные с факторами неспецифической защиты репродуктивного тракта беременных, а также влияния самой беременности на эти факторы. Важным моментом в формировании хронического эндометрита является репарационная способность ткани репродуктивного тракта.
В связи с этим особый интерес представляют такие факторы, как муцины и трефоиловые пептиды, которые играют ведущую роль в мукозальной защите и регенерации слизистых. Изучение муцинов и TFFs invitro показало, что они стимулируют эпителиальную реституцию, но клеточно-молекулярный механизм еще до конца не ясен. Дальнейшие исследования в этой области помогут более четко определить роль TFFs и муцинов в механизмах репарации слизистых тканей.
Цель исследования – определить содержание муцинов (MUC 5AC, MUC 6) и трефоилового пептида-3 (TFF-3) в эндометрии и цервико-вагинальном секрете у женщин с физиологической беременностью, родоразрешенных путем кесарева сечения.
Материалы и методы исследования
Для выполнения поставленной задачи в исследование включены 50 беременных женщин в сроке 38–40 недель гестации, в возрасте 21–40 лет, рекомендованные на плановое кесарево сечение, находившиеся в МБУЗ «ГБ № 1 им. Семашко Н.А.» г. Ростова-на-Дону, роддоме № 1, подписавших информированное согласие на участие в исследовании. Беременные были поделены на группы. Первую группу составили 25 беременных с первыми родами в анамнезе (n = 25). Вторую группу составили 25 беременных с повторными родами (n = 25). Средний возраст беременных в I группе составил 28,5 ± 4,7 лет, во II группе – 30,5 ± 5,9 лет.
Помимо стандартных исследований выполнялось определение содержания трефоилового фактора-3, муцинов 5 АС и 6. Материалом для исследования служили цервико-вагинальный секрет, забранный перед операцией и эндометрий, забранный сразу же после извлечения плода.
Исследование проводилось методом иммуноферментного анализа наборами компании «Bio Vendor» (Чехия) и «CUSABIO» (Китай). Статистическая обработка выполнена с использованием программы «Statistica 6», методами параметрической и непараметрической статистики по критериям Стьюдента и Манна–Уитни. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05. Описательная статистика отображала количественную информацию: среднее значение (М), стандартную ошибку среднего (m).
Результаты исследования и их обсуждение
При исследовании концентрации MUC 5 ACв ткани эндометрия было отмечено достоверное повышение его уровня в группе повторнородящих женщин в сравнении с первородящими (р < 0,04). Вместе с тем содержание MUC 6 в группе повторнородящих женщин статистически значимо снижалось относительно группы первородящих женщин (р < 0,05). При этом как в первой, так и во второй группе корреляционная связь между MUC 5 AC и MUC 6 отсутствовала. Наряду с этим концентрация трефоилового пептида-3 в эндометрии, как и в случае с MUC 5 AC, достоверно повышалась во II группе относительно I группы (р < 0,03). В группе первородящих женщин присутствовала положительная корреляционная связь между TFF-3 и MUC 5 AC (r = 0,44), а во II группе данная связь отсутствовала (табл. 1). Напротив, содержание факторов мукозального барьера в цервико-вагинальном секрете было значительно выше у женщин I группы.
Исследование цервико-вагинального секрета показало тенденцию к повышению концентрации MUC 5 AC у первородящих женщин относительно группы повторнородящих (р < 0,07). Также установлено достоверное повышение концентрация MUC 6 в группе первородящих женщин (р < 0,001). В I группе женщин была отмечена слабая положительная корреляционная связь между MUC 5 AC и MUC 6 (r = 0,47). Вместе с этим в I группе статистически значимым было повышение концентрации трефоилового пептида-3 (р < 0,02) и положительная корреляция между TFF-3 и MUС 6 (r = 0,76) (табл. 2).
Таблица 1
Содержание муцинов (MUC 5AC и MUC 6) и трефоилового пептида -3(TFF-3) в ткани эндометрия
|
Группы |
Муцин 5 АС (MUC 5AC), нг/мл |
Муцин 6 (MUC 6), нг/мл |
Трефоиловый пептид -3 (TFF-3), нг/мл |
||||||
|
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
|
|
I |
201,15 ± 23,78 |
168,61 |
119,62–308,72 |
63,03 ± 3,14 |
66,63 |
62,24–68,21 |
1,90 ± 0,08 |
1,82 |
1,68–2,17 |
|
II |
288,58 ± 30,24* |
257,60 |
187,90–374,14 |
51,62 ± 4,76* |
64,98 |
38,08–67,99 |
2,22 ± 0,1* |
2,11 |
1,92–2,70 |
Примечание. * – различия статистически значимы в сравнении с первородящими.
Таблица 2
Содержание муцинов (MUC 5AC и MUC 6) и трефоилового пептида-3 (TFF-3) в цервико-вагинальном секрете
|
Группы |
Муцин 5 АС (MUC 5AC), нг/мл |
Муцин 6 (MUC 6), нг/мл |
Трефоиловый пептид -3 (TFF-3), нг/мл |
||||||
|
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25-75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
|
|
I |
51,03 ± 11,67 |
52,62 |
14,85–76,46 |
23,77 ± 4,97 |
14,32 |
12,01–32,73 |
2,42 ± 0,18 |
2,22 |
1,86–3,09 |
|
II |
14,54 ± 7,8* |
10,17 |
2,88–13,0 |
11,71 ± 29,18* |
6,89 |
4,68–7,99 |
1,65 ± 0,19* |
1,80 |
1,04–2,19 |
Примечание. * – различия статистически значимы в сравнении с первородящими.
Как известно, совместная локализация муцинов и трефоиловых пептидов имеет функциональную значимость. В литературных данных указывается, что TFF-3 в комплексе с муцинами не увеличивают вязкость слизи, но образуют в ней комплексы. Таким образом, слизь с низкой вязкостью, которая имеется в репродуктивном тракте, выполняет свои функции по удалению бактерий и микрочастиц. Также к функциональным свойствам TFF-3 и муцинов относится увеличение трансэпителиального сопротивления, то есть повышение резистентности эпителиального барьера [3].
Данные, полученные в ходе исследования, наглядно показывают, что в группе первородящих женщин, матка которых была интакта до беременности, факторы неспецифической защиты локализуются преимущественно в нижнем репродуктивном тракте. Тогда как у повторнородящих женщин, имеющих в анамнезе оперативное родоразрешение, эти факторы локализуются, главным образом, в матке.
Можно предположить, что действие муцинов и трефоилового пептида, локализующихся в нижнем отделе репродуктивного тракта, направлено на ограничение распространения микроорганизмов и сохранение стерильности верхнего отдела репродуктивного тракта.
Как известно, после оперативного родоразрешения часто формируется хронический эндометрит. И как при любом воспалении происходит экспрессия провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-1β и ФНОα, которые в свою очередь являются индукторами TFF-3[4]. Это, вероятнее всего, и объясняет повышенное содержание муцина 5АС и трефоилового фактора-3 в эндометрии у повторнородящих женщин. Также обращает на себя внимание «мотогенный» эффект TFF-3[5], то есть участие в миграции эпителиальных клеток, что актуально при оперативном вмешательстве при восстановлении эндометрия.
Заключение
У первородящих женщин в цервико-вагинальном секрете отмечается повышение содержания MUC 5 AC и TFF-3, MUC 6. Вместе с тем наблюдается положительная корреляция между TFF-3 иMUC 6, MUC 5AC и MUC 6. В эндометрии повышена концентрация MUC 6, но снижена MUC 5AC и TFF-3. Отмечается положительная корреляция между MUC 5AC и TFF-3.
У повторнородящих женщин в цервико-вагинальном секрете отмечается снижение концентрации MUC 5AC и TFF-3, MUC 6. Тогда как в эндометрии наблюдается повышение концентрации MUC 5AC и TFF-3, но снижение MUC 6. Корреляция между показателями как в секрете, так и в эндометрии отсутствует.
Таким образом, после оперативного родоразрешения наблюдается транслокация факторов мукозальной защиты из нижнего отдела репродуктивного тракта в верхние.
Рецензенты:
Шкурат Т.П., д.б.н., профессор, директор НИИ биологии ЮФУ, ФГАОУ ВПО «Южный федеральный университет», г. Ростов-на-Дону;
Чистяков В.А., д.б.н., доцент, заведующий лабораторией экспериментального мутагенеза НИИ биологии ЮФУ, ФГАОУ ВПО «Южный федеральный университет», г. Ростов-на-Дону.
Работа поступила в редакцию 30.11.2013.