Современные интенсивные технологии основываются на внесении больших доз минеральных азотных удобрений. Важно сократить внесение азота в виде минеральных азотных удобрений и восполнить потребность растений в этом элементе путем перехода на использование «биологического азота» [5,6,11].
Среди микроорганизмов, усваивающих азот атмосферы, выделяется группа симбиотических азотфиксаторов рода Rhizobium и еще две большие группы не симбиотических анаэробных и аэробных азотфиксаторов ‒ это гетеротрофы из родов Azotobacter и Beijerinckia, а также микроорганизмы, относящиеся к группе ассоциативных бактерий из рода Azospirillum, Klebsiella, Pseudomonas, Flavobacterium и других, обитающие в ассоциациях на поверхности корневой системы высших растений [1].
Активность клубеньковых бактерий рода Rhizobium при микробно-растительных взаимодействиях с бобовыми растениями в значительной степени определяется вирулентностью штамма, его конкурентной способностью в определенных экологических условиях и совместимостью с растением-хозяином, определяющее значение которого состоит в способности вида или сорта обеспечить процесс связывания азоте достаточным количеством энергетических веществ [3, 4, 7, 9, 10, 12]. Отсюда следует, что очень важно изучить потенциальные возможности бобово-ризобиального симбиоза и найти пути его стимуляции применительно к конкретным смешанным бобово-злаковым посевам и почвенно-климатическим условиям.
Целью исследования являлась разработка методики оценки эффективности микробно-растительных взаимодействий при использовании микробиологического состава на основе клубеньковых бактерий рода Rhizobium (симбиотического азотфиксатора), по величине урожайности биомассы смешанного бобово-злакового посева.
Задачей исследования было выяснение эффектов микробно-растительных взаимодействий при различных соотношениях клубеньковых бактерий рода Rhizobium lupini и ассоциативных бактерии рода Flavobacterium sp. и их влияния на урожайность биомассы двухкомпонентного люпино-злакового посева.
Материалы и методы исследований
Полевые и лабораторные опыты были проведены в 2006–2009 годах на опытном поле и лаборатории «Азотфиксации и иммунитета растений» БГУ. Объекты исследований: смешанный посев, включающий люпин и ячмень, клубеньковые и ассоциативные бактерии рода Rhizobium lupine, штамм 363а получен от Кожемякова А.П. (ВНИИСХМ Россельхозакадемии), и Flavobacterium sp., штамм № 30, получен от Кожемякова А.П. (ВНИИСХМ Россельхозакадемии). Предшественник в полевом опыте – яровая пшеница. Размер опытной делянки: общая площадь – 25,8 м2, учетная площадь – 25,0 м2 Размещение вариантов рендомизированное в четырехкратной повторности. Почва опытного участка – серая лесная легкосуглинистая на лессовидном карбонатном суглинке с содержанием гумуса по Тюрину 2,4–3,1 %, подвижного фосфора Р2О5 по Кирсанову – 22–28 мг и обменного калия К2О по Масловой – 14–20 мг на 100 г почвы, рНсол. 5,2–5,8. Способ посева – сплошной рядовой сеялкой СН-16 с нормой посева 1,0 млн. всхожих семян люпина и 1,6 млн всхожих семян на гектар ячменя. В день посева семена обрабатывались ризоторфином, штамм 363а, и флавобактерином, штамм № 30, согласно схеме опыта (таблица) полувлажным способом с прилипателем Nа КМЦ. Все варианты опыта высевали в один день. В состав, содержащий бактерии рода Rhizobium lupini, штамм 363а, не менее 2,5 млрд активных клеток клубеньковых бактерий в 1 грамме препарата дополнительно вводили ассоциативные азотфиксирующие бактерии рода Flavobacterium sp., штамм № 30, содержащие не менее 4,0 млрд активных клеток в 1 г препарата. При этом весовое соотношение компонентов составляло 1,0–1,5:1,5–2,0 [6].
Учеты и наблюдения в опыте проводили по методике Госсортосети [8].
Учет урожая – поделяночным методом вручную с взвешиванием всей массы растений.
Расчет показателя взаимодействия компонентов смеси и биопрепаратов по величине прибавки урожая.
Для расчета взаимодействия растений-компонентов гетерогенного посева и биопрепаратов использовали уравнение, которое позволяет рассчитать теоретический показатель микробно-растительного взаимодействия по величине прибавки урожая Е:
для двух компонентов смеси Е = (Х·Y)/100;
для трех компонентов смеси E = (X·Y·Z)/10000;
для n компонентов смеси En = (X·Y·Z·...n)/100n–1,
где Х – прибавка урожайности после применения соотношения компонентов 1, %; Y – прибавка урожайности после применения соотношения компонентов 2; Z – прибавка урожайности после применения соотношения компонентов 3; n – прибавка урожайности после применения соотношения компонентов n.
Прибавка урожайности после применения соотношения компонентов определяется как разница с контролем. Если фактически полученное значениениже рассчитанного по формуле, растения при этом соотношении компонентов считаются антагонистами, выше – синергистами, при равенстве рассчитанных и полученных величин их действие рассматривается как аддитивное.
Закладку полевых опытов и дисперсионный анализ полученных данных проводили по методике Б.А. Доспехова (1985) [2].
Результаты исследований и их обсуждение
Изучение микробно-растительных взаимодействий и влияния микробиологических составов на рост и развитие смешанного бобово-злакового посева показало, что применяемые дозы клубеньковых бактерий Rhizobium lupini повышали на 6,5–10,1 %, а ассоциативные азотфиксаторы рода Flavobacterium sp. ‒ на 4,5–7,7 % урожайность зеленой массы по сравнению с контролем без обработки посева ризобактериями (таблица). Установлено, что наиболее благоприятно на урожайность люпино-ячменного посева влияли смесевые микробиологические препараты, а именно дозы 2 и 3 (таблица). Прибавки зеленой массы от дозы 2 и 3 составили 7,0–9,1 т/га или 15,8–20,6 % к контролю соответственно, что статистически достоверно (таблица).
Увеличение урожайности от применения смесевых микробиологических составов по сравнению с их раздельным использованием позволяет сделать предположение о возможности синергического взаимовлияния компонентов микробиологической композиции ризобактерий.
Расчет эффекта синергизма, выполненный по вышеуказанной методике для двухкомпонентной бобово-злаковой смеси, выявил следующую зависимость:
Е = (Х·Y)/100.
Доза (1) Е фактическое = 512 – 442 = 70.
Ерасчетное = (29·20)/100 = 5,8.
Е = Ефакт > Ерасчет, можно предположить синергизм, доза (1).
Доза (2) Е фактическое = 529 – 442 = 87.
Ерасчетное = (41·28):100 = 11,5.
Е = Ефакт > Ерасчет, можно предположить синергизм, доза (2).
Доза (3) Ефактическое = 533 – 442 = 91.
Ерасчетное = (45·34)/100 = 15,3.
Е = Ефакт > Ерасчет, можно предположить синергизм, доза (3).
Установлен ряд существенных преимуществ микробно-растительных взаимодействий. Концентрация бактерий рода Rhizobium и бактерий рода Flavobacterium sp. в новом микробиологическом составе на 25–50 % выше, чем при внесении раздельно каждого из этих бактериальных препаратов. При обработке семян новым микробиологическим составом среднесуточный прирост стебля у растений люпина к фазе цветения был на 87 % больше, чем на контроле. Сумма чистой продуктивности фотосинтеза возросла и составила в смешанном посеве при обработке новым составом 9,71 г/дм2 час сухого вещества компонентов, что на 21,9 % больше, чем на контроле. Увеличилось суммарное содержание хлорофилла в листьях с 404,5 мг/л вытяжки на контрольном варианте до 463,8 мг/л (доза 3), или на 14,7 %. Исследования показали, что степень угнетения культурных растений или повреждения снижается по сравнению с контролем в 1,4–8 раз (таблица).
Влияние доз препаратов на урожайность зеленой массы и степень угнетения растений люпино-ячменного посева, т/га (среднее за 2006–2009 гг.).
|
Компоненты состава |
Урожайность в смешанном посеве, в т/га |
Степень угнетения культурных растений, или повреждения, в % |
||
|
Бактерии рода Rhizobium lupini – препарат ризоторфин, в г/га |
Бактерии рода Flavobacterium sp – препарат флавобактерин, в г/га |
Урожайность зеленой массы, т/га |
Прибавка к контролю, т/га |
|
|
100,0 200,0 300,0 0 0 0 (1)100,0 (2)200,0 (3) 300,0 Контроль – без препаратов НСР05 |
0 0 0 200,0 300,0 400,0 200,0 300,0 400,0 - |
47,1 48,3 48,7 46,2 47,0 47,6 51,2 52,9 53,3 44,2 1,59 |
2,9 4,1 4,5 2,0 2,8 3,4 7,0 8,7 9,1 - |
0,7 0,6 0,6 0,8 0,9 0,7 0,3 0,2 0,3 1,6 |
Расчет экономической эффективности, проведенный по технологической карте с учетом всех совокупных затрат, показал, что доля затрат на приобретение и внесение нового микробиологического состава составляет 16–18 % от стоимости прибавки урожая. На рубль затрат чистый доход от прибавки урожая составляет 4–5,5 рубля.
Выводы
Таким образом, в результате исследований доказана эффективность методики оценки величины стимуляции роста и развития растений в бобово-злаковом смешанном посеве. Установлено, что оценку эффективности микробно-растительных взаимодействий необходимо проводить по взаимовлиянию компонентов микробиологической композиции на урожайность зеленой массы смешанных посевов. Показано, что новая методика расчетов взаимодействий позволяет выявить эффект синергизма. Установлено, что наиболее эффективным является микробиологический состав, содержащий бактерии рода Rhizobium lupini в который дополнительно введены бактерии рода Flavobacterium sp. при массовом соотношении компонентов 1,0–1,5:1,5–2,0, который обладает эффектом синергизма. Установлено, что совместное действие микробиологических препаратов ризоторфина и флавобактерина на фактические показатели прибавки урожайности выше рассчитанных. Разработанный нами микробиологический состав обладает синергическим взаимодействием компонентов и благоприятно влияет на смешанные двухкомпонентные люпино-ячменные посевы, обеспечивает прибавки урожая зеленой массы 8,7–9,1 т/га или 16–21 % к контролю и не оказывает токсического воздействия на культурные растения.
Рецензенты:
Заякин В.В., д.б.н., профессор кафедры ботаники, ФГБОУ ВПО «Брянский государственный университет имени академика И.Г. Петровского», г. Брянск;
Ториков В.Е., д.с.-х.н., профессор, проректор БГСХА по научной работе, ФГБОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия», пос. Кокино Брянской области.
Работа поступила в редакцию 05.12.2013.