Как про-, так и противовоспалительные цитокины являются медиаторами межклеточных коммуникаций. Они образуют многокомпонентную систему молекулярно-клеточной регуляции процессов развития и функционирования фетоплацентарного комплекса [3, 6]. Также цитокины, являясь регуляторами метаболических процессов, принимают участие в перестройке обмена веществ во время беременности. Специфическая перестройка материнского организма, обеспечивающая нормальное развитие и выживание плода, сопровождается морфологическими и функциональными изменениями в иммунной системе беременной [5]. Не вызывает сомнений тот факт, что в пределах маточно-плацентарного комплекса существует тонко сбалансированная система контроля репродуктивных процессов, которая функционирует на протяжении всей беременности [4].
В настоящее время операция кесарева сечения выполняется в 15–20 % случаев, в связи с чем все большее внимание уделяется проблеме формирования хронического воспаления [2]. Таким образом, особого внимания требует вопрос о состоянии цитокинового профиля у женщин с физиологической беременностью, родоразрешенных путем кесарева сечения. Одной из основных функций иммунитета является контроль за репродукцией как на системном, так и на локальном уровне. Большое количество иммунных функций опосредуется растворимыми факторами, среди которых выделяют провоспалительные цитокины, такие как ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНОα, и противовоспалительные – ТФРβ и ИЛ-1РА, обладающие выраженным дистантным эффектом. Они практически не поступают в кровоток и не оказывают системных эффектов, но при влиянии различных эндогенных и экзогенных факторов может наблюдаться повышение их концентрации в периферической крови, что свидетельствует о нарушении принципа локальности функционирования цитокиновой сети.
Цель исследования – определить содержание провоспалительных (ИЛ-1β, ФНОα) и противовоспалительных (ИЛ-1РА, ТФРβ) цитокинов в эндометрии и плазме крови у женщин с физиологической беременностью, родоразрешенных путем кесарева сечения.
Материалы и методы исследования
Для выполнения поставленной задачи в исследование включены 40 беременных женщин в сроке 38–40 недель гестации, в возрасте 21–40 лет, рекомендованные на плановое кесарево сечение, находившиеся в МБУЗ «ГБ № 1 им. Семашко Н.А. г. Ростова-на-Дону» роддоме № 1, подписавших информированное согласие на участие в исследовании. Беременные были поделены на группы. Первую группу составили 20 беременных с первыми родами в анамнезе (n = 20). Вторую группу составили 20 беременных с повторными родами (n = 20). Средний возраст беременных в I группе составил 28,5 ± 4,7 лет, во II группе – 30,5 ± 5,9 лет.
Материалом для исследования служили: плазма крови и эндометрий, забранный сразу же после извлечения плода.
Исследование проводилось методом иммуноферментного анализа наборами компании «Вектор Бест» (Россия) и «DRG» (Германия). Статистическая обработка выполнена с использованием программы «Statistica 6», методами параметрической и непараметрической статистики по критериям Стьюдента и Манна–Уитни. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05. Описательная статистика отображала количественную информацию: среднее значение (М), стандартную ошибку среднего (m), перцентили, медиану (Ме).
Результаты исследования и их обсуждение
Исследование концентрации ИЛ-1β в ткани эндометрия показало достоверное снижение его уровня в группе повторнородящих женщин относительно первородящих (р < 0,04). Вместе с тем уровень ФНОα также снижался во II группе женщин в сравнении с I группой (р < 0,03).
Вместе с тем при исследовании противовоспалительных цитокинов достоверно значимых отличий не наблюдалось. При этом в группе первородящих женщин отмечалась отрицательная корреляционная связь между ИЛ-1β и ИЛ-1РА (r = –0,46; р < 0,05), а в группе повторнородящих женщин была отмечена положительная корреляция между ТФРβ и ИЛ-1 (r = 0,52; р < 0,02) (табл. 1 и 2).
Таблица 1
Содержание провоспалительных (ИЛ-1β, ФНОα) цитокинов в эндометрии
|
Группы |
ИЛ-1β, пг/мл |
ФНОα, пг/мл |
||||
|
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
|
|
I |
11044,4 ± 1821,2 |
9370 |
5670–11182 |
28,9 ± 6,3 |
22,8 |
14,6–26,7 |
|
II |
6536,8 ± 906,3* |
6000 |
3870–9252 |
16,2 ± 1,2* |
16,5 |
13,2–19,8 |
Примечание: * – различия статистически значимы в сравнении с первородящими (р < 0,05).
При исследовании содержания про- и противовоспалительных цитокинов в плазме крови статистически значимых отличий выявлено не было.
Наряду с этим в группе первородящих женщин ФНОα коррелировал с ТФРβ (r = 0,60; р < 0,004), а также отмечалась слабая корреляционная связь с ИЛ-1β (r = 0,37; р < 0,09). Вместе с тем в I группе женщин отмечена корреляция между ФНОα эндометрия и ФНОα плазмы крови (r = 0,50; р < 0,02), тогда как во II группе присутствовала корреляция между ТФРβ эндометрия и ТФРβ плазмы крови (r = 0,50; р < 0,03) (табл. 3 и 4).
Таблица 2
Содержание противовоспалительных (ИЛ-1РА, ТФРβ) цитокинов в эндометрии
|
Группы |
ИЛ-1РА, пг/мл |
ТФРβ, пг/мл |
||||
|
M ± m |
Ме |
[25-75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25-75] перцентили |
|
|
I |
13980,5 ± 2143,8 |
11126 |
6915,2–20200,2 |
4021,1 ± 355,9 |
3906,2 |
2760–4865,6 |
|
II |
13443 ± 3107,9 |
10778 |
7390,8–15882 |
3933 ± 494,3 |
3883,6 |
2325,4–4555,8 |
Таблица 3
Содержание провоспалительных (ИЛ-1β,ФНОα) цитокинов в плазме крови
| Группы |
ИЛ-1β, пг/мл |
ФНОα, пг/мл |
||||
|
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
|
| I |
1,77 ± 0,2 |
1,7 | 1,2–1,9 |
1,57 ± 0,1 |
1,3 | 1,07–1,8 |
| II |
1,97 ± 0,2 |
1,8 | 1,2–2,2 |
1,97 ± 0,2 |
1,6 | 1,27–2,39 |
Также интересно проследить взаимосвязь между цитокинами и факторами мукозального барьера репродуктивного тракта женщин с физиологической беременностью, а именно с муцинами (MUC 5AC и MUC 6) и трефоиловым пептидом – 3 (TFF-3). Так было установлено, что в группе первородящих женщин в ткани эндометрия присутствует положительная корреляция между Muc 6 и ИЛ-1РА (r = 0,48; p < 0,03) и отрицательная корреляция между Muc 6 и ИЛ-1β (r = –0,45; p < 0,05). Напротив, в группе повторнородящих женщин мы наблюдаем корреляцию между Muc 5 AC и ТФР1β (r = 0,46; p < 0,05), Muc 5AC и ИЛ-1β (r = 0,50; p < 0,03), наряду с этим TFF-3 отрицательно коррелирует с ТФР1β (r = –0,45; p < 0,06) и ИЛ-1β (r = –0,61; р < 0,008).
На данный момент представлено большое количество данных, свидетельствующих о важной роли цитокинов в репродукции: развитии эндометрия, имплантации эмбриона, росте трофобласта. Цитокины, продуцируемые клетками эндометрия, миометрия и трофобласта, и их рецепторы способствуют успешному течению беременности. Эти данные указывают на разнообразное и активное участие цитокинов в репродуктивных процессах на всех этапах беременности.
Таблица 4
Содержание противовоспалительных (ИЛ-1РА, ТФРβ) цитокинов в плазме крови
|
Группы |
ИЛ-1РА пг/мл |
ТФРβ пг/мл |
||||
|
M ± m |
Ме |
[25-75] перцентили |
M ± m |
Ме |
[25–75] перцентили |
|
|
I |
343,5 ± 32,9 |
282 |
250,2–429,8 |
5244,7 ± 148,6 |
5070,4 |
4904,6–5571,7 |
|
II |
484 ± 88,7 |
354,1 |
271,5–494,5 |
5429,3 ± 205,3 |
5458,7 |
5064,4–5709,9 |
Эффект того или иного цитокина существенно зависит от его локальной концентрации, времени действия, экспрессии специфических рецепторов на клетке-мишени и взаимодействия с другими цитокинами и гормонами. До сих пор нет полной определенности в отношении того, какую роль в регуляции гестационных процессов играют цитокины, находящиеся в периферической циркуляции матери, и насколько их уровень отражает изменения, происходящие в беременной матке [3,1].
Известно, что начало родов сопровождается увеличением секреции провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-1β, ФНОα, которые в свою очередь регулируют факторы, индуцирующие сократительную активность миометрия, в первую очередь простагландинов [1, 3, 4]. Кроме того, ИЛ-1β и ИЛ-6 усиливают синтез рецепторов окситоцина в миометрии. В свою очередь окситоцин является одним из медиаторов стимуляции сократительной активности гладкой мускулатуры матки. Большинство исследователей приходят к мнению, что это нормальный физиологический процесс. С другой стороны, мы имеем противовоспалительные цитокины, которые подавляют действие провоспалительных цитокинов. Недостаточная продукция противовоспалительных цитокинов может являться причиной раннего наступления родов из-за отсутствия контроля за продукцией провоспалительных цитокинов [1].
При исследовании первородящих женщин отмечается корреляция между ФНОα эндометрия и ФНОα плазмы крови, что указывает на провоспалительный характер течения предродового периода, что, по мнению многих авторов, является физиологичным состоянием. В то время как у повторнородящих женщин, имеющих в анамнезе оперативное родоразрешение, присутствует корреляция между ТФРβ эндометрия и ТФРβ плазмы крови, что может говорить о противовоспалительном течении предродового периода. Можно предположить, что данная тенденция в отношении противовоспалительных цитокинов у повторнородящих женщин является ответной реакцией на воспалительные процессы в матке, а также грубые рубцовые изменения после оперативного родоразрешения.
Заключение
Таким образом, у женщин, имеющих в анамнезе оперативное родоразрешение, в эндометрии наблюдается относительное понижение концентрации провоспалительных цитокинов в сравнении с первородящими женщинами. Тогда как в содержании противовоспалительных цитокинов в эндометрии, а также про- и противовоспалительных цитокинов в плазме крови достоверно значимых отличий не наблюдалось.
Рецензенты:Чистяков В.А., д.б.н., доцент, заведующий лабораторией экспериментального мутагенеза НИИ биологии ЮФУ, ФГАОУ ВПО «Южный федеральный университет», г. Ростов-на-Дону;
Шкурат Т.П., д.б.н., профессор, директор НИИ биологии ЮФУ, ФГАОУ ВПО «Южный федеральный университет», г. Ростов-на-Дону.