Данная работа посвящена новому способу пластинации биологических объектов с использованием в качестве замещающего полимера полиизопрена. Пластинация - метод долгосрочного сохранения биологических объектов путем замещения в них воды и липидов на полимер.
Цели работы.
Разработка новых, экономически более выгодных методов пластинации биологических объектов.
Задачи.
- Изучение физико-химических свойств изопреновых каучуков.
- Изучение свойств ацетона как дегидратирующего агента.
- Разработка оптимальной схемы применения данных реагентов.
- Оценка адекватности применения данной методики на приктике.
Материалы.
Работа была произведена на 10 невскрытых эмбрионов белых крыс, 5 вскрытых мышах и 5 органокомплексах взрослых лабораторных крыс, 2 сердцах новорожденных детей.
Методы.
В ходе работы было апробировано несколько оригинальных методик, из которых одна, нижеизложенная методика, дала наилучшие результаты.
Фиксация. В 10-ти кратном объеме 10% растворе кислого формалина до полного фиксирования (1-2 суток).
Промывка. В проточной водопроводной воде в течение 24 часов.
Мацерация. В 5-ти кратном объеме 10% раствора уксусной кислоты в течение 2-3 суток.
Обезвоживание. В 5-ти кратном объеме ацетона при температуре -20°С. Производится до тех пор, пока содержание воды в растворе ацетона и, соответственно, в образце будет не более 2%. Для достижения этой цели требуется смена ацетона 5 раз.
Форсированная пропитка. Перед форсированной пропиткой основным полимером производится дополнительная пропитка в 5-ти кратном объеме 10% раствора целлоидина в абсолютном ацетоне в течение 7 суток при комнатной температуре. После этого образец помещается в 5-ти кратный объем 80% раствора полиизопрена в ксилоле (возможно применение бензола или другого органического растворителя с высокой точкой кипения). Далее емкость с образцом в полимере помещается на водяную баню при температуре 80-100°С. Происходит вскипание ацетона и его замещение на раствор полимера. Кипячение проводят по 1 часу с интервалами в 24 часа до прекращения кипения ацетона. Далее образец оставляют в растворе полимера еще на 24 часа при комнатной температуре.
Сушка. Производится под тягой при комнатной температуре после извлечения образца из полимера и тщательного удаления остатков полимера с поверхности образца.
Ход работы.
До начала обработки по указанной методике каждый образец был измерен в продольном и поперечном направлениях и взвешен. Произведена субъективная оценка эластичности и консистенции тканей. После обработки в среднем продольные размеры образцов уменьшились на 2%, поперечные - на 4,5%, масса - на 65 %. Консистенция препаратов плотная, эластичность слабо выражена. Цвет препаратов не сохраняется и становится светло-серым.
Выводы:
- Данная методика пластинации биологических тканей может быть применена для приготовления демонстрационных препаратов из органов и органокомплексов животных и человека без сохранения цвета.
- Методика дает незначительное изменение размеров и пропорций образцов по сравнению с нативными препаратами.
- Происходит значительное уменьшение массы образца, что выгодно для хранения и транспортировки.
- Препараты сохраняют эластичность и, отчасти, консистенцию.
- Методика экономически выгодна, материалы для ее осуществления дешевле аналоговых.
- Методика нуждается в дальнейшей разработке в больших масштабах. Полученные результаты имеют предварительный характер.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Гайворонский И.В., Старчик Д.А., Григорян С.П., Ничипорук Г.И. Новые методы бальзамирования биологических объектов //Научные ведомости. Изд. Белгородского ун-та, 2000, №2. - С.31-32.
- Гайворонский И.В., Кузьмина И.Н., Старчик Д.А., Тихонова Л.П., Ничипорук Г.И. Современные аспекты преподавания нормальной анатомии в Военно-медицинской академии //Морфология, 2000, т. 117, вып.З. - С.34-35.
- Гончаров Н.И., Сперанский Л.С., Краюшкин А.И., Дмитриенко С.В. Руководство по препарированию и изготовлению анатомических препаратов. - Н. Новгород, Изд. НГМА, 2002.
- Кузнецов Л.Е., Хохлов В.В., Фадеев С.П., Шигеев В.Б. Бальзамирование и реставрация трупов: руководство. - М., 1999.
- von HAGENS G., Tiedman К., Kriz W. The current potential of Plastination. Anat. Embryol. -1987.Bd. 175.-S.411-421.